四子填精胶囊中蛇床子素的含量

徐洪胜 彭振宇

【摘要】四子填精胶囊现行标准为国家食品药品监督管理总局国家标准WS-6018（B-1018）-2014Z，原标准无含量测定项，本文研究用高效液相色谱法测定蛇床子中蛇床子素的含量，以便更好地控制药品质量。

【关键词】四子填精胶囊；药品检验；蛇床子素含量测定

【中图分类号】R259 【文献标识码】A 【文章编号】ISSN.2095-6681.2019.7..02

1 方 法

1.1 仪器与试药

仪器：Agilent 1200 series高效液相色谱仪，DAD检测器

蛇床子素对照品，购于中国食品药品检定研究院（批号：110822-201609，供含量测定用，纯度99.6%）。乙腈为色谱纯，水为超纯水，其它试剂均为分析纯。

1.2 色谱条件

色谱柱：Sepax Bio-C18（4.6×250 mm，5 ?m）；流动相：乙腈-水（50：50）；流速：0.9 ml/min；柱温：40℃；检测波长：322 nm；理论板数按蛇床子素峰计算应不低

于5000。

1.3 对照品溶液的制备

精密称取蛇床子对照品适量，加无水乙醇制成每1 mL含0.030 mg的溶液，即得。

1.4 供试品溶液的制备

取装量差异项下的内容物，研细，取约0.3 g，精密称定，精密加无水乙醇50 mL，称定重量，超声处理30分钟，取出，放冷，再称定重量，用无水乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，即得。

1.5 测定法

精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5 ?L，注入液相色谱仪，测定，计算，即得。

2 方法學考察

2.1 系统适用性试验

2.1.1 测定波长的选择

精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5 ?L，注入液相色谱仪，观察对照品溶液与供试品溶液210 nm～400 nm范围内在线紫外光谱图，蛇床子素在320 nm波长附近有最大吸收。参照中国药典2015年版一部蛇床子项下含量测定方法，选择322 nm为本实验的测定波长。

2.1.2 流动相的选择

参照《中国药典》2015年版一部蛇床子项下含量测定方法，以Sepax Bio-C18（4.6×250 mm，5 ?m）为色谱柱，采用乙腈-水（65：35）作为流动相，蛇床子素峰保留时间较快，调整流动相的比例至乙腈-水（50：50），结果分离效果较好，保留时间适度，因此，确定乙腈-水（50：50）为本法的流动相。

2.2 阴性对照试验

为进一步考察试验的合理性，取不含蛇床子的阴性对照样品、供试品、溶剂（无水乙醇）。依正文所述方法进行测定。结果，阴性样品色谱在与蛇床子素峰相应的保留时间附近无干扰峰检出，从而证明本方法是合理可

行的。

2.3 标准曲线制备

精密称取蛇床子素对照品适量，加甲醇制成每1 mL含0.03024 mg的溶液，分别精密吸取1、3、5、7、9、15 ?L

测定，以对照品进样量为横坐标，以峰面积和为纵坐标，绘制标准曲线，计算回归方程为y=2511.5056x-4.5053 R2=0.9999，见表1，结果表明蛇床子素在0.03024～0.45358 ?g

范围内，进样量与峰面积呈线性关系，符合外标法定量测定的要求。

2.4 精密度试验

精密吸取供试品溶液5 ?L，注入液相色谱仪，重复6次，测定其色谱峰面积值

2.5 稳定性试验

精密吸取供试品溶液5 ?L，间隔以下时间，注入液相色谱仪，按正文色谱条件测定。

2.6 重复性试验

取同一供试品（批号130827）依正文方法独立测定六次。

2.7 回收率试验

采取半量加样回收法，精密称取已知含量的供试品（含蛇床子素5.4933 mg/g）共6份，每份0.3 g，分别置具塞锥形瓶中，精密加入对照品溶液（含蛇床子素0.03888 mg/mL，

未折纯度）50 mL，依法测定回收率。

3 样品和原料测定

依正文方法测定。

4 限 度

蛇床子现行标准为中国药典2015年版一部，其中含量测定项规定，按干燥品计算，含蛇床子素不得少于1.0%；水分不得过13.0%，根据处方计算，理论值应不少于

1.70 mg/粒。考虑到生产中的波动，原料药材投料时未折水分，70%乙醇提取转移率为50%，暂定本品每粒含蛇床子以蛇床子素（C13H18O7）计，不得少于0.80 mg/粒。

参考文献

[1] 中国药典2015年版一部.

[2] 国家食品药品监督管理总局国家标准WS-6018（B-1018）-2014Z.

本文编辑：刘欣悦