张立强 丁桂珍 邓 平 余少梅 魏朝辉 罗杨志 喻运珍 周伟东 艾桃山
近年来,随着对虾集约化养殖的迅猛发展,水环境恶化,病害频发,抗生素及其他药物的使用已产生细菌抗药性及药物残留等问题,严重影响了对虾产业的健康持续发展。为此,寻找无公害药物替代品成为研究热点。中草药和益生菌因具有促进养殖动物生长、增强机体免疫功能及抗病力等功效,广泛应用于水产养殖业。研究表明,姜黄素和益生菌共同使用具有协同增效作用,姜黄素可促进益生菌增殖,益生菌可促进生物体对姜黄素的吸收和利用。有关姜黄素和益生菌联合使用在畜禽上的研究较多,在水产方面的研究仅见在凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)、罗非鱼(Oreochromis niloticus)和建鲤(Cyprinus carpio)方面的报道。本研究在凡纳滨对虾饲料中添加一定比例的姜黄素复合益生菌制剂,研究姜黄素复合益生菌制剂对凡纳滨对虾生长及成活率的影响,为姜黄素复合益生菌制剂在对虾养殖业中的推广应用提供理论依据。
试验用凡纳滨对虾,同批次,同龄,同规格,体质量(7.00±1)g,由泰国玛希隆大学提供,挑选健康、规格均一、无特定病原体的对虾暂养7d后用于试验,暂养条件:温度(28.5±2)℃,盐度为5,过滤、消毒海水。
姜黄素 姜黄素由武汉中博水产生物技术有限公司提供,粉碎,过孔径180μm筛。
菌株 枯草芽孢杆菌由武汉中博水产生物技术有限公司提供。
基础饲料,某品牌的凡纳滨对虾料,营养指标(质量分数):水分10.53%,粗蛋白43.00%,粗脂肪8.41%,粗灰分0.95%,粗纤维2.66%。
1.2.1 枯草芽孢杆菌制剂的制备
菌种活化:取枯草芽孢杆菌菌种,以体积分数1%接种于营养肉汤中,于摇床中,在37℃、200r/min的条件下培养24h,再二次活化12h后,放置于4℃冰箱保存备用。
1.2.2 试验饲料制备
饲料A:将基础饲料与枯草芽孢杆菌制剂混合,使枯草芽孢杆菌的含量为2×107cfu/g,与适量黏合剂、纯净水混匀,晾干,现配现用。
饲料B:将基础饲料与枯草芽孢杆菌制剂和姜黄素混合,使枯草芽孢杆菌的含量为2×107cfu/g,姜黄素的含量为1%,与适量黏合剂、纯净水混匀,晾干,现配现用。
将凡纳滨对虾随机分成3个组,每个组设3个重复组。标记为A、B、NC组,按表1所示分别饲喂基础饲料和试验饲料。
养殖试验在泰国玛希隆大学的对虾养殖池塘中进行,周期为56d。依照1.3的方案按体质量的8%~10%投喂相应饲料,投饲时间分别为6:00、10:00、19:00和23:00,早晚的投喂量占日投喂量的60%~70%。每周根据对虾的生长状况调节投饲量。试验期间不间断充气,每两天换一次水。水温为(28.5±2)℃。
表1 试验饲料
每两个星期对对虾称重一次。
增重率=(终末体质量—初始体质量)/初始体质量×100%;
成活率=终末对虾数/初始对虾数×100%。
姜黄素益生菌制剂对凡纳滨对虾生长性能指标的影响见表2。A、B组凡纳滨对虾的成活率和增重率均高于NC组,且B组对凡纳滨对虾生长性能指标的影响效果优于A组,说明饲料中添加益生菌制剂、姜黄素益生菌制剂均可以显著促进凡纳滨对虾生长,以添加姜黄素复合益生菌制剂的促生长效果为最佳。
表2 姜黄素益生菌制剂对凡纳滨对虾生长及成活率的影响
益生菌可产生维生素、氨基酸、促生长因子、蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶等多种酶,促进水产动物的生长。李晓英等在饲料中添加复合芽孢杆菌时发现,实验组中国对虾(Fenneropenaeus chinensis)的平均生长速度为0.15g/d,显著高于对照组(0.12g/d);朱学芝等将乳酸杆菌(Lactobacillus sporogenes)、地衣芽孢杆菌+枯草芽孢杆菌(等比例)、复合菌虾乐333添加于饲料中或投入养殖水体中,结果发现,三者均可促进凡纳滨对虾的生长。胡毅等研究饲料中添加单一益生菌和复合益生菌,结果表明,复合益生菌饲喂组凡纳滨对虾的特定生长率高于对照组(P<0.05),而单一益生菌饲喂组与对照组差异无统计学意义(P>0.05)。于明超等研究表明,饲料中添加姜黄素和芽孢杆菌促进了凡纳滨对虾的生长,且共同添加的效果优于单独添加。
本研究结果与上述研究结果相一致,证明饲料中添加芽孢杆菌制剂、姜黄素复合益生菌制剂均可促进凡纳滨对虾的生长,姜黄素益生菌制剂组的促生长效果优于益生菌制剂组。这可能是因为姜黄素和益生菌具有协同增效作用。一方面,姜黄素富含多种营养物和一些未知的诱食因子,可以增强养殖动物的食欲,促进水产动物机体代谢和消化酶的分泌,提高营养物质利用率,从而加速养殖动物生长发育,降低饲料系数;另一方面,益生菌制剂中的芽孢杆菌可产生多种消化酶类,可提高动物消化道内消化酶的生物活性,促使动物机体更好地消化和吸收胃肠道中的营养物质,提高饲料利用率。