白头翁散对鸡多杀性巴氏杆菌病防治效果试验

陆毅兴 , 邵思欣 , 许斯祺 , 王 一 , 梁诗欣 , 马 驿 , 彭金菊

(广东海洋大学农学院动物医学系 ， 广东 湛江 524088)

鸡多杀性巴氏杆菌病，又称禽霍乱，是由多杀性巴氏杆菌引起禽类的一种急性败血性传染病，是对养禽业危害较大的疫病之一。中草药用于畜牧生产在我国有悠久历史，在现代畜牧业生产发展中仍发挥重要作用。在防治畜禽疾病方面，中草药有着疗效显著、不易产生耐药性、提高畜禽免疫力、低副作用等优势。长期的临床实践表明，合理的中西药配伍应用能提高疗效，降低药物毒副作用，但是中草药化学成分与药物作用机理十分复杂，中西药联合使用不当会降低疗效，增加副作用，严重的甚至危及动物生命[1]，需通过试验观察中西药联合对某些细菌性传染病的防治是否有效。为寻找安全、高效、毒副作用小的防治鸡多杀性巴氏杆菌病的药物，本试验在体外抑菌效果观察的基础上，选取具有体外抑菌效果的中药复方水提物，通过给人工感染多杀性巴氏杆菌的鸡灌服，观察药物对其防治效果，及其与抗生素联用药的防治效果，为采用中西药联合防治畜禽疾病提供理论依据和参考。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 中药药材白头翁、秦皮、黄柏、黄连、五味子、五倍子、诃子，均购自湛江市药材市场。强力霉素，含量98%，批号：100252102，江苏恒盛药业有限公司。氟苯尼考，含量98%，批号：100252108，江苏恒盛药业有限公司。

1.1.2 禽巴氏杆菌(C48-3)标准菌株，由中国兽医药品监察所提供。

1.1. 试验动物 40日龄三黄鸡，公母各半，体重0.8～1.2 kg。

1.2 方法

1.2.1 试验分组 试验设阴性对照组、阳性感染对照组、灌服药物试验组，每组20羽鸡。给药剂量由体外抑菌试验测得的最小抑菌浓度(MIC值)确定。I组为不感染细菌阴性对照组；II组为感染细菌阳性对照组；III组为白头翁散组，预防组和治疗组用药量(灌服水提物，药量以生药含量计算)分别为2.083 g/kg·d、4.166 g/kg·d；IV组为加味白头翁散组，预防组和治疗组用药量分别为0.781 g/kg·d、1.562 g/kg·d；V组为氟苯尼考组，预防组和治疗组用药量分别为4 mg/kg·d、8 mg/kg·d；VI组为强力霉素组，预防组和治疗组用药量分别为4 mg/kg·d、8 mg/kg·d；VII组为白头翁散与氟苯尼考联合组，预防组用药量白头翁散2.083 g/kg·d、氟苯尼考4 mg/kg·d，治疗组用药量为白头翁散4.166 g/kg·d、氟苯尼考8 mg/kg·d；VIII组为加味白头翁散与强力霉素联合组，预防组用药量为加味白头翁散0.781 g/kg·d、强力霉素4 mg/kg·d，治疗组用药量为加味白头翁散1.562 g/kg·d、强力霉素8 mg/kg·d。

1.2.2 药物投喂方法 将白头翁、秦皮、黄柏、黄连、五味子、五倍子、诃子等各味中药分别加热煮沸30 min，连续煎煮3次，冷却，过滤，合并煎煮药液，浓缩使药液浓度含生药达1 g/mL，试验前配制成白头翁散(白头翁、黄连、黄柏、秦皮)与加味白头翁散(白头翁、黄连、黄柏、秦皮、五味子、五倍子、诃子)水提物，1 d的药量给鸡1次灌服。将氟苯尼考可溶性粉、强力霉素可溶性粉分别溶于蒸馏水后，1 d的药量给鸡1次灌服。

1.2.3 人工感染试验 将多杀性巴氏杆菌接种于营养肉汤中，37 ℃恒温培养12-16 h，采用平板计数法计数，用肉汤稀释至所需浓度，通过预试验筛选出可引起鸡死亡的多杀性巴氏杆菌菌液的浓度，通过皮下注射不同浓度的菌液，以感染后能引起鸡只72 h内死亡率达100%的最小菌液浓度为攻毒浓度。预试验确定每只鸡皮下注射浓度为104CFU/mL的细菌混悬液0.1 mL，阴性对照组每只鸡皮下注射生理盐水0.1 mL。治疗试验：攻毒当天灌服药液，连续给药3 d，停药后观察10 d；预防试验：连续灌服药物3 d后注射细菌，攻毒后仍连续灌服药物3 d，自攻毒之日开始连续观察10 d。统计各组死亡鸡数量，按常规检验方法对病死鸡进行剖检，分离体液及组织中细菌、镜检，确定死亡原因。

1.2.4 防治效果评价 用保护率进行评价：保护率(%)=(阳性感染对照组的死亡数-药物试验组死亡数)/阳性感染对照组的死亡数×100%。

2 结果

2.1 不同药物治疗效果 各种药物对多杀性巴氏杆菌的体外抑菌效果见表1。在供试的9种抗菌药中，氟苯尼考和强力霉素对多杀性巴氏杆菌的体外抑菌效果最好，MIC均为4 μg/mL。白头翁散对多杀性巴氏杆菌的抑菌效果较好(MIC=12.5 mg/mL、MBC=50 mg/mL)。加味白头翁散的抑菌效果(MIC=0.781 mg/mL、MBC=12.5 mg/mL)比白头翁散的抑菌效果更显著。选取氟苯尼考和强力霉素与中药方剂联合进行防治试验。各种药物对鸡多杀性巴氏杆菌病的治疗试验结果见表2。攻毒后阳性对照组鸡死亡20羽，存活率为0%。灌服药物组的鸡死亡率与阳性对照组比较有所降低；白头翁散、氟苯尼考、白头翁散与氟苯尼考联合对鸡的保护率分别为15%、75%、90%。加味白头翁散、强力霉素、加味白头翁散与强力霉素联合对鸡的保护率分别为20%、80%、75%。白头翁散与氟苯尼考联合组的保护率最高，对鸡多杀性巴氏杆菌病有较好的治疗效果。

表1 不同药物对多杀性巴氏杆菌的体外抑菌效果 (μg/mL)

表2 不同药物对鸡多杀性巴氏杆菌病的治疗效果

2.2 不同药物对鸡巴氏杆菌病的预防效果 预防试验结果见表3，攻毒后阳性对照组鸡死亡20羽，存活率为0%。灌服药物组的鸡死亡率与阳性对照组比较均降低。白头翁散、氟苯尼考、白头翁散与氟苯尼考联合对鸡的保护率分别为25%、80%、95%。加味白头翁散、强力霉素、加味白头翁散与强力霉素联合对鸡的保护率分别为25%、90%、85%。白头翁散与氟苯尼考联合组的保护率最高，对鸡多杀性巴氏杆菌病的预防效果较好。

表3 不同药物对鸡多杀性巴氏杆菌病的预防效果

2.3 病死鸡的剖检结果及细菌形态特征 给鸡感染巴氏杆菌后，体温升高，精神沉郁，食欲减退，羽毛松乱，缩颈闭眼。鸡冠、肉髯暗红色或青紫色，排灰白或黄绿色稀粪。感染18 h后阳性对照组开始出现死亡，大多数鸡在24-48 h死亡，第7天后未见死亡。感染24 h后药物试验组开始出现死亡，多数在感染后第3-5天死亡，第6天后未见死亡。感染后药物试验组鸡死亡的数量较阳性对照组有所下降，且死亡速度有所减缓。

剖检病死鸡可见鼻腔内有黏液，腹膜、皮下组织及腹腔脂肪有大小不等的出血点，胸腔、腹腔和气囊有纤维素性灰白色渗出物，肠黏膜充血，有出血性病灶，十二指肠最为严重。心外膜上有多量出血点，心包内积有多量淡黄色液体。肺充血、水肿，脾脏肿大柔软，肝脏肿大、质变脆，表面有布满针尖大小的白色坏死点。分离体液及组织中细菌进行培养鉴定，在鲜血培养基上生长良好，长成淡灰白色、闪光的露珠状小菌落，且无溶血现象。染色镜检为革兰阴性、两端钝圆、两极浓染，以单个和成双排列为主的球杆状或短杆状细菌，与试验前感染的多杀性巴氏杆菌的形态特征相同。

3 讨论

3.1 不同药物对鸡多杀性巴氏杆菌病的防治效果 通过体外抑菌试验表明，中药白头翁散、加味白头翁散对多杀性巴氏杆菌的均有较好的抑菌效果，MIC分别为12.5 mg/mL、0.781 mg/mL，氟苯尼考、强力霉素对多杀性巴氏杆菌的MIC均为4 μg/mL。将白头翁散分别按照4.166 g/kg·d、2.083 g/kg·d给鸡灌服后，对鸡巴氏杆菌病治疗和预防的保护率分别为15%、25%；将加味白头翁散分别按照1.562 g/kg·d、0.781 g/kg·d给鸡灌服后，对鸡巴氏杆菌病治疗和预防的保护率分别为20%、25%。诸多文献报道，应用中草药防治鸡巴氏杆菌病有一定的效果[2-3]。本试验中，加味白头翁散比白头翁散对鸡巴氏杆菌病的治疗效果稍好，但两者对鸡巴氏杆菌病的防治效果均不太理想。可能与人工感染多杀性巴氏杆菌的鸡发病过快，没有充分发挥药物的作用有一定关系[4]。在中药散剂与抗生素联合防治试验中，白头翁散与氟苯尼考联合对鸡多杀性巴氏杆菌病的防治效果明显比单用白头翁散或单用氟苯尼考更好，保护率分别为90%、95%；加味白头翁散与强力霉素联合对鸡巴氏杆菌病的防治效果(保护率分别为75%、85%)明显比加味白头翁散的防治效果好，但不及单用强力霉素(保护率为80%、90%)的防治效果好，可能是加味白头翁散与强力霉素联合在鸡体内产生了某些反应，使药效降低。通过本试验可知，合理的中西药联合对鸡巴氏杆菌病的防治效果优于单用中药，也优于单用抗生素。不合理的联合用药反而会使药效降低。

3.2 中西药联合在畜禽疾病防治中的作用 细菌性疾病一直是我国养禽业的棘手难题之一。抗生素广泛应用于现代畜牧养殖的细菌性疾病，并且疗效显著，同时抗生素广泛使用带来的问题是细菌耐药性产生和动物性食品药物残留[5]。西药注重祛除病邪，消除病因；中药强调扶正，重在提高机体的免疫力，在养殖过程中可起到治疗疾病和预防保健作用，应用安全可靠[6]。中西药联合在兽医临床上非常普遍，合理的中西药联用可取长补短，提高临床疗效，其效果已得到普遍认可[7]。李军成[8]等用黄连、黄柏等中药和盐酸环丙沙星组成的中西药复方制剂对肉鸽巴氏杆菌病的治愈率达到96.6%。周勇[9]用氯霉素与自拟清瘟散结合，对鹅巴氏杆菌病疗效显著。蒋大成[10]采用黄连、黄芩、黄柏、大黄、苍术、厚朴、甘草等中药与氟苯尼考联合对鸭禽霍乱的防治效果明显。

中西药联合使用是兽医临床常用的治疗方案，坚持中西医结合的方针，力争形成具有中国特色的高效新兽医学，是当代兽医工作者的长期任务。中西药合理结合，不仅从实践上大大提高临床疗效，而且从理论上丰富和发展了中兽医学内容[11]。但盲目或不合理的联合使用可能导致药效降低，甚至出现毒副作用。对于中西药联合防治畜禽疾病，既要积极推广，又要注意配伍禁忌，尚未弄清楚机理情况下，不可滥用，要持科学谨慎态度。