王海燕
(陕西省林业科学院,陕西 西安 710082)
大马士革玫瑰(Rosa damascena),又名突厥蔷薇,蔷薇科、蔷薇属,属古典庭院玫瑰,丛生灌木植物,虽然叫做玫瑰,但与真正的玫瑰(Rosa rugosa)没有亲缘关系,是由欧洲古老的野蔷薇杂交而成。
大马士革玫瑰的插穗取自杨凌绿谷玫瑰种植基地,选择插穗需要在植物落叶之后,从母柱上剪取充分木质化、粗壮、无病害的枝条,不适合选取节间比较长的健壮枝丫。在获取插穗之后,将其裁剪成10cm,上口是平面,下口呈现45°马蹄形,同时留有3~4个枝丫。
温室中做育苗畦,需要在苗畦中加入约10cm的扦插基质,畦长度1.2m。之后进行打孔操作,将处理好的插穗插入畦中,将插穗的2/3部分放入基质中,每株间隔5cm,并用多菌灵进行浇灌,重复浇灌3次。
大马士革玫瑰的初代培养以MS培养为基本培养基,继带增殖和生根培养以WPM培养基为基本基,之后在其中添加不同浓度组合的植物生长调节剂,并结合实际情况在其中添加0.6%比重的琼脂和30g/L比重的蔗糖。之后将植物的pH值控制在5.6~5.8,确保植物每天有14h进行光合作用。在诱导生根阶段,需要在继代培养阶段获取无菌茎条,无菌状态下,接种在以1/2MS为基础的培养基上,从而筛选出最适合作物生长的基配方。
表1 不同激素组合大马士革玫瑰茎段继代培养基的增殖效果
表2 不同激素组合生根培养基的生根效果
不同激素处理方式对大马士革玫瑰扦插的生根率有着十分明显的影响,50mg/L的NAA和50mg/L的ABT处理生根率比较接近,分别达到了52%和48%,二者之间差异不明显。应用50mg/L的IBA和ABT处理插穗,生根率分别是50.7%和57.3%,2种处理方式所导致的生根率不同,在与清水对照中发现,应用激素处理后的插穗生根率更高。
另外,激素处理时间对大马士革玫瑰扦插生根率会产生不同影响。其中,以NAA激素处理的0.5h和2h生根率影响差异不显著,在处理1h时,大马士革玫瑰生根率为64%,和以前0.5h和2h的生根率相比提升较为明显。50mg/L的NAA在处理2h时,扦插生根率明显超过之前的0.5h扦插生根率。
将初代诱导培养基上出现的大马士革玫瑰嫩芽及时切下,将其转接到增殖培养基上。大约7d后茎芽开始萌动,伴随而来的是不同的枝丫类型。但从实际情况来看,不同配方培养基上的茎芽分化程度不同。在35d之后,总结分析不同培养基上外植体的继代增殖情况。根据表1的数据信息可知,在1组激素配比中,第3组增殖倍数最大,达到了3.0,枝芽生长最为繁盛。但是大马士革玫瑰的生芽长势比较薄弱,不利于大马士革玫瑰的进一步生根培养。2号组合的大马士革玫瑰增殖倍数为2.8,且丛生芽比较粗壮。在2号和3号的激素配比试验操作中发现,几个编号试验都在1mg/L时,NAA的增殖效果要比IBA的效果好,且大马士革玫瑰的增殖倍数达到了3.4。
在大马士革玫瑰继代增殖培基的基础上,能够生长出健壮的小茎条,将小茎条转接到生根培养基上,14d后开始出现新的枝芽。30d后统计出不同培养基上的茎条生根情况。根据表2的数据信息可以发现,IBA和NAA对大马士革玫瑰生根率和平均生根数的影响基本保持一致,在IBA浓度达到0.5mg/L时,大马士革玫瑰生根率达到了最大值。
综上所述,大马士革玫瑰组织培养快速繁殖,外植体以摘花芽萌芽之后顶茎尖为最好,MS的培养基适合大马士革玫瑰组织培养形式。在试验中研究发现,主要影响大马士革玫瑰尖萌芽植物激素为6-BA和NAA。高浓度的6-BA是大马士革玫瑰分化出不定芽的重要基础,辅助使用较低浓度的生长素则是能诱导出低浓度的生长素,进而促进大马士革玫瑰健康成长。