240 g/L虫螨腈悬浮剂对桑螟防效及对家蚕毒性测定＊

杨一平，林蔚红，戴建忠，张 芬，钱秋杰，孙海燕，陈伟国

（浙江省海宁市蚕桑技术服务站，浙江 海宁 314400）

桑螟是桑园主要害虫之一，秋季第4、5代易暴发成灾，常导致桑园片叶不存，严重影响秋蚕饲养［1］。因高龄桑螟幼虫潜伏隐蔽的特点，农药防治要求在低龄期进行，而秋季采叶养蚕间隔时间短，可选的适用农药品种极少，再加上从2017年开始，桑园主要杀虫剂“灭多威”列入限制使用农药名录［2，3］，对秋季桑螟防治非常不利，生产上急需新的适用农药品种。

虫螨腈（Chlorfenapyr）又名溴虫腈，是美国氰胺公司于20世纪80年代后期研制开发的芳基吡咯类杀虫杀螨剂。该药主要通过氧化磷酸化的解偶联作用阻碍昆虫呼吸，使昆虫不能产生能量而导致躯体瘫痪，从而无法进行正常的生理活动而死亡［4，5］。虫螨腈对家蚕和桑园害虫间存在一定的选择毒性，对非靶标生物家蚕的毒性较低［6］，因而成为近年来桑园害虫防治农药的主要筛选试验对象。为进一步明确虫螨腈防治桑螟的药效以及对养蚕生产的安全性，我们于2018年秋季进行了24%虫螨腈悬浮剂应用试验。

1 材料与方法

1.1 供试材料

1.1.1 供试农药

240 g/L虫螨腈悬浮剂（江苏生久农化有限公司生产），40%辛硫磷乳油（江苏宝灵化工股份有限公司生产），77.5%敌敌畏乳油（南通江山农药化工股份有限公司生产）。

1.1.2 供试桑园

海宁市蚕桑站试验桑园，8年生“农桑14号”，中低杆养成，每667 m2桑园栽1000株。

1.1.3 家蚕品种

一代杂交种为“白玉×秋丰”，浙江省海宁市新兴蚕种制造有限公司生产。

1.2 对桑螟田间防效试验方法

1.2.1 处理设置

设240 g/L虫螨腈悬浮剂750倍（320 mg/L）、1500倍（160 mg/L）2个稀释浓度处理，77.5%敌敌畏乳油750倍+40%辛硫磷乳油1500倍（以下简称“敌辛混剂”）为农药对照，喷清水为空白对照，共4个处理，处理间设2行桑树保护。

1.2.2 喷药方法

采用大红叶3WBD-16HBA电动喷雾器，以桑叶正反面均匀喷湿为度，农药处理和清水对照区喷水量一致。

1.2.3 调查方法

在喷药前和喷药后2 d、4 d、8 d、12 d调查，分别调查记载低龄（1～3龄）和高龄（4～5）桑螟虫量，重复3次，计算各农药处理重复小区的虫口减退率及校正防效。

1.3 对家蚕毒性试验方法

1.3.1 虫螨腈对家蚕的室内毒性测定

在预备试验基础上，将240 g/L虫螨腈悬浮剂稀释成7～9个梯度浓度，取适熟桑叶分别浸入不同浓度的药液中1 min，取出后自然晾干，置于保鲜盒内，然后给入20头3龄起蚕，在温度26.5℃±1℃、相对湿度75%～85%的恒温室内饲喂药叶，添毒时间分24 h、48 h和72 h，然后改用新鲜无毒桑叶继续饲养至4龄饷食，每天调查家蚕幼虫中毒死亡数，以清水处理为空白对照，重复3次。

1.3.2 虫螨腈在桑叶上的残留毒性试验

残毒试验以农药处理和采叶养蚕间隔时间为双向处理组合。农药处理为240 g/L虫螨腈悬浮剂320 mg/L、160 mg/L，“敌辛混剂”为农药对照，清水为空白对照，共4个处理。采叶养蚕间隔时间设喷药后1 d、2 d、3 d、4 d、5 d、7 d，各处理小区30头蚕供试，重复3次。供试家蚕1～2龄期常规饲养，3龄起蚕开始分别饲喂不同处理的桑叶，连续1个龄期，逐日调查记载各处理死亡蚕头数；其中喷药后3 d、5 d、7 d处理区继续饲养到上蔟结茧，调查各小区茧质成绩。

1.4 数据处理

虫口减退率和校正防效计算公式如下：虫口减退率（%）=（1-残存虫口量/施药前虫口量）×100%；校正防效（%）=（处理组虫口减退率-对照组虫口减退率）/（100-对照组虫口减退率）×100%。

试验数据均采用DPS（15.10版）数据处理软件统计［7］，以Duncan新复极差测验法进行多重比较，检测田间药剂试验校正防效的差异显著性；对药液质量浓度对数与幼虫死亡率概率值进行线性回归分析，求出致死中浓度（LC50）和95%置信限。

2 结果与分析

2.1 田间防效

从表1可以看出，喷药后2 d，240 g/L虫螨腈悬浮剂320 mg/L对1～3龄桑螟的防效最高，“敌辛混剂”略低，240 g/L虫螨腈悬浮剂160 mg/L最低，3个处理校正防效均在70%以上，处理间差异不显著。喷药后4 d，3个处理校正防效均提高到80%以上，240 g/L虫螨腈悬浮剂320 mg/L校正防效达到94.47%，处理间差异也不显著，表明240 g/L虫螨腈悬浮剂药效作用较慢。喷药后8 d和12 d，240 g/L虫螨腈悬浮剂320 mg/L的校正防效显著高于240 g/L虫螨腈悬浮剂160 mg/L，两者均极显著高于“敌辛混剂”。“敌辛混剂”的校正防效持续下降，表明240 g/L虫螨腈悬浮剂的药效期明显长于“敌辛混剂”。

从表2可见，喷药后2 d，对4～5龄桑螟的校正防效，240g/L虫螨腈悬浮剂320 mg/L显著高于240g/L虫螨腈悬浮剂160 mg/L，两者均极显著高于“敌辛混剂”。喷药后4 d，240g/L虫螨腈悬浮剂320 mg/L极显著高于240g/L虫螨腈悬浮剂160 mg/L，两者均极显著高于“敌辛混剂”。喷药后2 d、4 d、8 d和12 d，3个处理校正防效均持续增高，其中喷药后2～4 d的增幅最大，且喷药后8 d和12 d的防效高于表1中1～3龄桑螟的同期防效，这是因为除了药剂对4～5龄桑螟的直接作用外，对1～3龄桑螟的防效在后期叠加到对4～5龄桑螟的防效上所致。由此可见，在桑螟低龄期防治十分关键。

从表3可见药剂处理对全龄桑螟的防效趋势，240g/L虫螨腈悬浮剂320 mg/L和160 mg/L的校正防效从喷药后2 d到12 d均呈现持续增高，“敌辛混剂”从喷药后4 d到12 d则持续下降，表明240 g/L虫螨腈悬浮剂的药效期明显长于“敌辛混剂”。

2.2 对家蚕的毒性

2.2.1 240 g/L虫螨腈悬浮剂对家蚕的食下毒性

240 g/L虫螨腈悬浮剂对3龄起蚕的食下毒性随着连续添毒时间的延长而增强，见表4。3龄起蚕添毒24 h的LC50＞3750 mg/L（即240 g/L虫螨腈悬浮剂稀释64倍），连续添毒48 h的LC50为1858.2552 mg/L（即240 g/L虫螨腈悬浮剂稀释129倍），连续添毒72 h的LC50为1207.4615 mg/L（即240 g/L虫螨腈悬浮剂稀释99倍）。添毒后24 h内一般仅少量中毒死亡蚕，2～3 d后是死亡高峰，可见240 g/L虫螨腈悬浮剂对家蚕的食下毒性较低，药效作用较慢，随时间延长而表现出累积效应。

参照2014年发布的《化学农药环境安全评价试验准则第11部分：家蚕急性毒性试验》附录A“农药对家蚕的毒性等级划分”［8］，240 g/L虫螨腈悬浮剂对家蚕的毒性等级为低毒（LC50＞200 mg/L）。

2.2.2 240g/L虫螨腈悬浮剂在桑叶上的残留毒性

由于240 g/L虫螨腈悬浮剂在桑叶上的残留毒性试验浓度为320 mg/L和160 mg/L，远低于食下毒性测定的LC50值，因此上述浓度药液喷洒桑叶后饲喂3龄起蚕不表现中毒症状和死亡蚕。农药对照处理“敌辛混剂”喷药后1 d采叶饲喂3龄蚕，死亡率100%，间隔2 d的死亡率为91.11%，间隔3 d后采叶饲喂3龄蚕无中毒症状和死亡蚕（表5）。

表1 240g/L虫螨腈悬浮剂对桑螟1～3龄幼虫的防效Table 1 Effect of 240 g/l Chlorfenapyr Suspension Agent on Controlling 1st～3rd Instar Larvae of Phalidid Caterpillar

表2 240g/L虫螨腈悬浮剂对桑螟4～5龄幼虫的防效Table 2 Effect of 240 g/l Chlorfenapyr Suspension Agent on Controlling 4th～5th Instar Larvae oOf Phalidid Caterpillar

表3 240g/L虫螨腈悬浮剂对桑螟全龄幼虫的防效Table 3 Effect of 240 g/l Chlorfenapyr Suspension Agent on Controlling All Larval Duration of Phalidid Caterpillar

2.2.3 240g/L虫螨腈悬浮剂处理桑叶的饲养成绩

喷药后3 d、5 d、7 d处理区饲养至上蔟结茧，养蚕成绩见表6。3龄起蚕结茧率，240 g/L虫螨腈悬浮剂320 mg/L、160 mg/L不同间隔时间处理组合与清水对照差异均不显著，与“敌辛混剂”喷药后3 d、5 d的差异亦不显著，但“敌辛混剂”喷药后7 d的结茧率最低，可能因试验误差所致。各处理组合的好蛹率指标都很高，处理间差异不显著，表明供试农药对化蛹无不良影响。各处理组合的粒茧重差异不显著，但总体来说数值偏小，主要是因为试验在晚秋蚕期进行，桑叶老化、硬化导致蚕体小，茧形小。茧层率指标，240 g/L虫螨腈悬浮剂160 mg/L喷药后7 d最高，极显著高于240 g/L虫螨腈悬浮剂320 mg/L喷药后3 d和240 g/L虫螨腈悬浮剂160 mg/L喷药后3 d，显著高于240 g/L虫螨腈悬浮剂320 mg/L喷药后5 d和240 g/L虫螨腈悬浮剂160 mg/L喷药后5 d，与240 g/L虫螨腈悬浮剂320 mg/L喷药后7 d差异不显著；240 g/L虫螨腈悬浮剂320 mg/L和160 mg/L喷药后7 d的茧层率与清水对照差异不显著，喷药后5 d和3 d的茧层率显著低于清水对照。可见240 g/L虫螨腈悬浮剂处理的桑叶连续饲蚕对茧层率有一定影响，从养蚕经济性状指标看，240 g/L虫螨腈悬浮剂320 mg/L和160 mg/L喷雾处理的桑叶应当在喷药7 d后采叶养蚕。

3 小结与讨论

试验结果表明，240 g/L虫螨腈悬浮剂对桑螟1～3龄幼虫的防效优于对4～5龄幼虫的防效，应掌握在桑螟低龄期喷药防治；240 g/L虫螨腈悬浮剂320 mg/L的防效显著优于160 mg/L，以及对照农药“敌辛混剂”，生产中可与对照农药交替使用；在桑螟常规虫量防治时可用240 g/L虫螨腈悬浮剂160 mg/L，虫量多或虫龄高时以320 mg/L为宜。虫螨腈药效作用较慢，对桑螟的防效在喷药后3～4 d时最高，须注意不能为了追求速效性而盲目提高使用浓度，与药效快的农药混配使用，则可兼顾速效性和持效，冯世民、朱浩龙等［9～10］报道溴虫腈与辛硫磷混配对桑螟、桑尺蠖防效良好，但在混配比例方面有待进一步优化。

表4 240g/L虫螨腈悬浮剂对3龄起蚕的食下毒性Table 4 Food Toxicity of 240 g/l Chlorfenapyr Suspension Agent pn Newly Exuviated Silkworm Larvae at Third Instar

表5 240g/L虫螨腈悬浮剂喷药后的桑叶对家蚕的残毒期Table 5 Residual toxicity of 240 g/L Chlorfenapyr suspension agent on silkworm larvae

表6 240g/L虫螨腈悬浮剂对结茧率和茧质的影响Table 6 Effects of 240 g/l Chlorfenapyr Suspension Agent on Cocooning Rate and Cocoon Quality

240 g/L虫螨腈悬浮剂对3龄起蚕的急性毒性为低毒，稀释64倍（3750 mg/L）添毒24 h的死亡率低于50%；连续添毒48 h和72 h的LC50分别为1858.2552 mg/L、1207.4615 mg/L，即随着连续添毒时间的延长而毒性作用增强，表明240 g/L虫螨腈悬浮剂对家蚕的食下毒性表现为药效较慢且具有累积效应，添毒后24 h内一般仅少量中毒死亡蚕，2～3 d后是死亡高峰。这与对桑螟防效最高的时间吻合。罗雁婕等［11］测定了溴虫腈对2龄起蚕的毒性，添食毒叶24 h内没有引起明显的死亡，其LC50＞5000 mg/L，添食毒叶96 h的对家蚕的LC50为119.715 mg/L，其毒性累积作用与本试验的趋势相似。不同的试验方法会影响结果，对于毒性较低且药效较慢的溴虫腈，如试验浓度范围窄、调查时间短，其真实中毒结果尚未表现出来。这可能是溴虫腈对家蚕的毒性试验结果差异较大的主要原因［6，12～14］。

240 g/L虫螨腈悬浮剂320 mg/L和160 mg/L喷于桑树后1 d开始采叶，对3龄起蚕均无中毒症状和死亡现象，这与室内急性食下毒性测定结果相符。在喷药后3 d、5 d、7 d采叶饲喂3龄起蚕，直至上蔟结茧，调查养蚕成绩表明，3龄起蚕结茧率、好蛹率、粒茧重与清水对照无显著性差异，但茧层率在喷药后间隔3 d和5 d均显著低于清水对照。因此，240 g/L虫螨腈悬浮剂320 mg/L和160 mg/L喷药的桑叶应当间隔7 d后采叶养蚕，避免影响蚕茧质量。关于溴虫腈在桑叶上的残毒期测定结果，以5～7 d的为多［12，15～16］；谢道燕等［17］的试验结果为 11 d，而佘柳涛等［18］在不同季节测定残毒期，夏季3～5 d，春季＞7 d。由于虫螨腈在不同地区、不同季节喷施后，在桑叶上的残毒期相差较大，生产上推广应用前应经过当地的田间试验。