2018年河南省郑州市定点监测猪群伪狂犬病gE抗体检测

贾松涛，刘 炜，张 军，周婷婷

（郑州市动物疫病预防控制中心，河南郑州 450052）

伪 狂 犬 病（Pseudorabies，PR；Aujeszky’s disease，AD）是由伪狂犬病病毒（Pseudorabies virus，PRV）引起的多种动物共患传染病，可危害猪、牛、羊、犬等多种动物，呈世界性分布[1]，其中对养猪业危害最为严重。感染PRV后，妊娠母猪出现流产，产死胎或木乃伊胎；15日龄内仔猪出现神经症状，致死率为100%；断奶仔猪出现神经症状和呼吸道症状，致死率为10%～20%；生长猪和育肥猪出现呼吸道症状，增重缓慢，饲料报酬低。此外，种公猪感染后，生产性能会受到严重影响。2011年以前，我国普遍应用Bartha-K61疫苗预防猪PR，取得了较好的控制效果。但2011年以后，我国许多地区疫情复发，一些原本阴性的规模化猪场也纷纷转阳，造成了严重经济损失[2]。此轮PR疫情从黄河以北养殖密集区域开始，逐渐向南蔓延，在华北、华中、华东地区长时间、大面积暴发流行[3]。为了解河南省郑州市猪PRV野毒感染情况，对2018年郑州市疫病控制中心实验室日常监测采集的猪血清样品进行PRV gE抗体（野毒感染抗体）检测，并对部分gE抗体阳性样品，利用荧光PCR方法进行验证。

1 材料

1.1 样品

所有样品均为郑州市一、二、三级动物疫情监测网点猪场送检的血清样品。采样范围涵盖郑州市辖区内5个县（市）的36个不同养殖规模猪场，采集时间为2018年1—12月。每个规模场不定期送检30份样品，总计1 057份，每月检测样品数量为72～103份。所采样品来自只免疫PRV gE基因缺失疫苗的，涵盖母猪、保育猪和育肥猪不同生长阶段的猪群。

1.2 试剂

PRV gE抗体鉴别诊断试剂盒：购自IDEXX公司；荧光PCR检测试剂：购自洛阳莱普生信息科技有限公司。

2 方法

检测方法和结果判定按照相应试剂盒使用说明进行；采用Excel软件，将检测数据按照不同养殖规模、不同生长阶段进行归类统计。

3 结果

3.1 总体情况

2018年1—12月采集的1 057份血清样品中，检出PRV gE阳性样品309份，阳性率为29.2%（309/1 057），具体检测结果见表1。

3.2 不同养殖规模情况

2018年共检测36个不同养殖规模猪场送检的样品，其中存栏3 000头以上的18个、500～3 000头的11个、500头以下的7个，共从27个场送检样品中检出阳性，场群阳性率为75.0%；存栏3 000头以上猪场的样品阳性率为19.1%，500～3 000头的为30.4%，500头以下的为69.8%。不同规模猪场的具体检测结果见表2。

表1 2018年1—12月PRV gE抗体 ELSIA 检测结果

3.3 不同生长阶段情况

2018年共检测母猪样品521份，样品阳性率为21.5%；检测保育猪样品193份，样品阳性率为30.6%；检测育肥猪样品343份，样品阳性率为40.2%（表3）。

3.4 荧光PCR检测

将母猪、保育猪和育肥猪PRV gE抗体阳性样品各30份，进行gE基因荧光PCR检测，共检出阳性32份，阳性检出率为35.6%（31/90）。其中：在母猪样品中检出阳性8份，阳性检出率为26.7%（8/30），保育猪样品中检出阳性10份，阳性率检出为33.3%（10/30），育肥猪样品中检出阳性14份，阳性检出率为46.7%（14/30）。具体PCR检测结果见图1。

4 分析与讨论

检测结果显示，郑州市36个规模场的PRV野毒感染场群阳性率为75.0%，个体阳性率为29.2%，说明郑州市猪群中的PRV野毒感染面较广，流行率较高，存在较高的疫情暴发风险。郑州市PRV野毒感染率较高的原因可能有以下几点：一是病毒存在一定的变异，现有疫苗对PR的免疫保护力有所下降。2012年以来国内流行毒株WY、ZM、HuXT2012、HBBD、HBLF、XiangA 和ZJNB2012之间的同源性较高，达99.8%，而这些毒株与欧洲、美洲毒株及2012年以前的国内毒株同源性较低，表明病毒已发生了一定的变异[4]。二是引种前没有进行PR检测，导致PRV流入阴性场。三是场内生物安全措施不严，人员和物品的流动造成了病毒在场内持续循环传播。四是PEDV“返饲”病料中严重污染PRV，这也是造成母猪感染的重要因素[5]。

表2 不同养殖规模场PRV gE抗体ELSIA检测结果

表3 不同生长阶段猪群PRV gE抗体 ELSIA 检测结果

图1 不同生长阶段猪群PRV gE抗体阳性样品的荧光PCR检测结果

存栏500头以下规模猪场的PRV gE抗体阳性率（69.8%）是存栏3 000头以上的规模场（19.1%）的3.65倍，表明PRV gE抗体阳性率与养殖规模有一定的相关性，养殖规模越大，野毒感染风险越低。该流行特点与解伟涛等[6]调查的河南省母猪群规模大于500头的猪场样本阳性率（20.5%）明显小于100头猪场的样本阳性率（62.4%）基本一致，这可能与较大规模猪场的饲养管理水平和生物安全水平较高有一定的关系。母猪样品阳性率（21.5%）低于保育猪（30.6%）和育肥猪（40.2%），可能与猪场加强了母猪的PR净化有关。

阳性样品的荧光PCR检测结果再次验证了阳性猪群中有35.6%能持续排毒，其中保育猪群和育肥猪群更高，表明保留PRV gE抗体阳性猪是非常危险的，必须将其彻底剔除。规模化养猪场可以免疫gE基因缺失苗，然后检测gE抗体，淘汰阳性猪，同时结合隔离、消毒等综合防控措施，逐步实现PR控制与净化[7]。