武阿锋,姚树萍,孙 涛, 范军科,王彦斌
(1.铜川市农业科学研究所,陕西 铜川 727031;2.陕西省农药管理检定所,陕西 西安 710003)
菜芙蓉,又名金花葵,是一年生锦葵科秋葵属植物。菜芙蓉含有多种生物活性物质,其生物黄酮含量比目前在生产中广泛应用的银杏、大豆等含量高近百倍,是目前已知植物资源中含量高的。其所含全价蛋白质、高聚糖胶、膳食纤维、微量元素硒、锌、多种不皂化物等,具有显著调节人体内分泌、免疫力,增加人体抗力,改善心脑血管及微循环功能,增强机体抗氧化能力,抗心脑缺血、缺氧、抗炎、镇疼,抗疲劳、抗衰老、抗癌、防癌、降血脂功效[1~6]。是极具开发价值的功能性产品。该研究拟对菜芙蓉植株的不同部位,包括根、茎、叶、花、花蕾、花萼、花托等开展生物黄酮含量测定比较,以为菜芙蓉产业化开发提供数据支撑。
菜芙蓉植株来自铜川市农业科学研究所试验基地,花期喷施碳基营养肥料,植株采集后分为根、茎、叶、花、花蕾、花萼、花托等7个部位。
1.2.1 LC-QQQ测定样品中槲皮素、芦丁和金丝桃苷的含量
菜芙蓉7个样品前处理方法:
(1)将样品用粉碎机打成粉末;
(2)称取样品粉末0.2 g,加入4 mL的75%甲醇水溶液混匀;
(3)将样品放入超声波清洗器中常温萃取30 min;
(4)将超声后的样品过0.22 μm滤膜后准备进样测定。
配置槲皮素、芦丁和金丝桃苷的混标溶液,依次稀释成浓度为500 ng·L-1,200 ng·L-1,100 ng·L-1,50 ng·L-1,20 ng·L-1,10 ng·L-1的标准品,进样5μL检测,绘制标准曲线;将过滤后的样品进样5 μL检测,并代入标准曲线计算样品中槲皮素、芦丁和金丝桃苷的含量。
1.2.2 紫外分光光度法测样品中总黄酮的含量
提取方法:0.5 g样品,25 mL 50%乙醇,超声30 min,过滤,定容至25 mL,取滤液测定。
测定方法:取样品,加入3 mL 30%乙醇,0.3 mL 5% NaNO2(w/v),反应5 min,加入0.3 mL 10% Al(NO3),反应6 min,加入2 mL 4% NaOH,最后加入30%乙醇定容至10 mL,510 nm测定吸光度。
标准曲线的制定:分别取0.1、0.2、0.3、0、5、1、2 mL的0.15 mg·L-1芦丁溶液,按测定方法反应,测定吸光度。
1.2.3 样品中锌、硒的含量测定
锌的含量(mg·kg-1)-检测方法GB/T 5009.14-2003。检测方法:取样品小火碳化后移马弗炉灰化,冷却,定容。 硒的含量(mg·kg-1)-检测方法GB 5009.93-2010。检测方法:取样品加硝酸、高氯酸消解,冷却,加盐酸,定容。
对各部位的总黄酮等指标进行检测,结果如表1所示,生物黄酮含量依次为花、根、叶,其中花的总黄酮含量达到5.995%,远高于根、叶等部位,且槲皮素、芦丁、金丝桃苷以及蛋白质均明显高出根、叶等部位,维生素E的含量在花、叶、根部位较为接近,这也说明了菜芙蓉是比较理想的药用部位。
通过对菜芙蓉花部进行连续检测,由表2可以看出,从9月到12月连续四个月的持续监测,菜芙蓉内总黄酮含量呈现出一定的下降趋势,其中在9月盛花期采摘的鲜花含量最高,达到5.99%,随着储藏时间的延续,花内总黄酮含量递减,在经过2个月后,黄酮含量趋于稳定,含量维持在3.6~3.7之间。仍处于较高水平,充分说明了菜芙蓉产业开发潜力巨大。
表1 菜芙蓉不同部位总黄酮、槲皮素、芦丁、金丝桃苷、维生素及蛋白质含量 (%)
注:“-”表示未检出。
表2 菜芙蓉花不同时期总黄酮、槲皮素、芦丁、金丝桃苷、维生素及蛋白质含量 (%)
通过对菜芙蓉不同部位进行硒及锌含量的测定,植株的花部位的硒含量明显高于其他部位,最高含量达到0.028mg·kg-1,而锌的含量在植物的茎叶部位含量较高,主要因为锌能增强作物的光合作用。它是作物体内碳酸酐酶等一些酶的重要组成成分。含锌的碳酸酐酶主要存在于叶绿体中,催化二氧化碳的水合作用,促进碳水化合物的转化,从而提高光合作用的强度。
表3 菜芙蓉不同部位硒及锌含量
菜芙蓉在200多个秋葵植物中最具食用、药用、保健价值,含有黄酮类、多糖、甘露醇、不饱和脂肪酸、微量元素等活性成分。目前菜芙蓉黄酮类成分药理研究较多,但具体产业开发类研究较少,因此该研究针对不同部位,不同时期对植株体内的生物黄酮,槲皮素、芦丁、金丝桃苷以及蛋白质进行测定,从而确定最具有开发潜力的植株部位。
该研究表明在植物的花中生物黄酮含量达到5.995%,远高于其他部位,说明菜芙蓉的花是总黄酮的来源,同时,菜芙蓉的不同部位的槲皮素、芦丁、金丝桃苷含量从高到低依次为花、叶、根。且在给植株施用硒肥后,菜芙蓉的花部富硒效果明显,因此菜芙蓉花具有较大的开发价值。