基质金属蛋白酶11在子宫内膜样癌中的表达及意义

(大同市第三人民医院，山西 大同 037000)

子宫内膜癌是女性生殖系统最常见的恶性肿瘤之一，分为两种类型，即雌激素依赖型(子宫内膜样癌，I型)和非雌激素依赖型(非子宫内膜样癌，II型)[1]。子宫内膜样癌占子宫内膜癌的大多数，好发于年轻女性，多为高分化的腺癌，发病早，5年生存率一般都在80%及以上，但是仍有25．0%的患者在随诊过程中复发、转移[2]。基质金属蛋白酶11(matrix metalloproteinase 11，MMP11)是基质金属蛋白酶家族中的一员，能降解细胞外基质成分，在增强肿瘤血管生成、细胞迁移、增殖、凋亡和结缔组织退化等方面起着重要作用[3]。本研究采用免疫组化法检测MMP11在子宫内膜样癌组织中的表达，并分析其与临床病理特征及预后指标间(ER、PR、ki-67、2年内复发/转移/死亡)间的关系，揭示MMP11过表达对子宫内膜样癌预后判断的指导意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2014年1月～2016年月6在大同市第三人民医院手术后存档且临床病理资料完整的石蜡包埋组织标本子宫内膜样癌128例，年龄44～76岁，平均59岁；取子宫内膜简单型增生40例、复杂型增生45例、非典型增生64例，年龄36～62岁，平均54岁；取因宫颈病变或子宫平滑肌瘤切除子宫而无其他妇科肿瘤性疾病的正常增殖期内膜石蜡包埋组织标本35例为对照组，年龄38～56岁，平均46岁。所有患者术前均未行激素及放、化疗等治疗。子宫内膜癌手术病理分型见表1。

1.2 方法

免疫组织化学En Vision法 将蜡块标本切成4μm厚，经二甲苯脱蜡，梯度乙醇脱水，3%H2O2去除内源性酶，高压处理热修复抗原，加一抗(兔单克隆抗体MMP11，ER，PR，ki-67，北京中杉金桥)后4℃过夜，PBS冲洗后滴加二抗，室温条件下DAB显色，中性树胶封片。PBS液做阴性对照。

1.3 结果判定标准

MMP11在肿瘤细胞和肿瘤周围间质中均有表达，阳性部位均定于细胞浆，ER、PR、ki-67阳性部位定于细胞核[4]。MMP11根据染色程度和染色细胞百分率进行组织学评分：深棕黄色为3分，棕黄色为2分，淡棕黄色为1分，细胞基本不着色为0分；阳性细胞率≥51%为3分、26%～50%为2分、6%～25%为1分、≤5%为0分。阳性细胞率评分与每张切片着色程度的乘积为最后得分：0～1分为阴性(-)，2～3分为弱阳性(+)，4～6分为阳性(++)，6分以上为强阳性(+++)；ER、PR、ki-67细胞出现棕黄色颗粒且范围≥10%计为阳性，范围<10%计为阴性。 在双盲条件下，每张切片由2名病理医师分别计数并进行结果判断。

1.4 统计学方法

应用SPSS21.0统计软件进行数据分析。 采用χ2检验、Spearman秩和检验等方法进行数据处理，P<0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 MMP11在各种病变组织中的表达

MMP11蛋白在子宫内膜样癌组织中阳性率71.09%(91/128)、在子宫内膜不典型增生组织中的阳性率65.62%(42/64)均高于正常增殖期子宫内膜11.43%(4/35)、子宫内膜简单型增生20.00%(8/40)、子宫内膜复杂型增生31.11%(14/45)及子宫内膜不典型增生65.63%(42/62)，差异有统计学意义(P<0.05)；其他各组两两之间比较，差异无统计学意义(P>0.05)。见图1。

2.2 MMP11与子宫内膜样癌患者临床病理特征的关系(见表1)

2.3 MMP11与子宫内膜样癌临床预后指标的相关性

免疫组化结果显示，MMP11高表达的子宫内膜样癌组织中，ki-67的表达也相对较高(见图2)。Spearman相关性分析结果表明在子宫内膜样癌中MMP11与ki-67的表达显著呈正相关(r=0.21，P=0.02)，MMP11的表达与2年内复发/转移/死亡呈正相关(r=0.19，P=0.03)，而MMP11的表达与ER、PR的表达无明显相关性，但29例ER阴性的子宫内膜样癌中24例MMP11均呈高表达82.76%，34例PR阴性的子宫内膜样癌中26例MMP11均呈高表达76.47%。见图3，表2。

图1 A：子宫内膜样癌 HE ×100； B：MMP11在子宫内膜样癌表达阳性，En vision法 ×100；

图2 A：ki-67在子宫内膜样癌中的表达，En vision法 ×100； B：同一病例MMP11在子宫内膜样癌表达阳性，En vision法 ×100；

图3 A：ER在子宫内膜样癌中的表达阴性，En vision法 ×100； B：同一病例MMP11在子宫内膜样癌表达阳性，En vision法 ×100；

临床病理特征例数MMP11阴性阳性P值年龄≤60岁701852>60岁5819390.38肿瘤最大径≤2.5 cm682444>2.5 cm6013470.09FIGO分期(浸润肌层<1/2)(浸润肌层≥1/2)Ⅰa682840Ⅰb34727Ⅱ16214Ⅲa100100.01组织分级G1281216G2742054G3265210.14盆腔淋巴结转移无823052有467390.01血管侵犯无742846有549450.01

表2 MMP11与ER表达的相关性

3 讨论

一些研究表明MMP-11在某些早期肿瘤发生中起着重要作用，提示其可能成为一种新的癌症早期生物标志物[5，6]。但MMP11在子宫内膜样癌中的表达研究较少，本研究显示，MMP11蛋白在子宫内膜样癌及子宫内膜不典型增生组织中的阳性率均高于正常增殖期子宫内膜、子宫内膜简单型增生、子宫内膜复杂型增生组织中的阳性率，提示MMP11可能成为预测子宫内膜癌前病变的一个重要标志物。

本研究显示，MMP11蛋白阳性率随着患者FIGO分期的升高而升高，与盆腔淋巴结转移及血管侵犯显著相关；这提示MMP11可能参与子宫内膜样癌的发生、转移。MMP11高表达的子宫内膜样癌组织中，ki-67的表达也相对较高，MMP11的表达与2年内复发/转移/死亡相关，而MMP11的表达与ER、PR的表达虽然无统计学相关性(P>0.05)，但29例ER阴性的子宫内膜样癌中24例MMP11均呈高表达82.76%，34例PR阴性的子宫内膜样癌中26例MMP11均呈高表达76.47%，提示MMP11可作为预测子宫内膜癌的预后的分子标志物。