多花素馨总生物碱模拟胃液条件下清除亚硝酸盐及阻断亚硝胺合成

吕祎彤，罗琨映，麻燕琴，张 岚，何婷婷

(西北民族大学 化工学院，甘肃 兰州 730124)

多花素馨(Jasminum polyanthum Franch)为木犀科(Oleaceae)素馨属(Jasminum)植物[1]，又名素兴花、鸡爪花、狗牙花。多花素馨主产于中国四川、贵州、云南等地[2]，其气味芳香，有舒肝解郁、行气止痛、生津益气、养肝明目、排毒养颜及健胃消积之功效[3]。

1 仪器与材料

1.1 仪器

紫外-可见分光光度计(SPECORD-50型，美国安捷伦公司)、旋转蒸发仪(RE-52AA，上海亚荣生化仪器厂)、超声清洗仪(SK8200LH，上海科导超声仪器有限公司)。

1.2 材料

多花素馨(购自安国市涵博堂中药材销售有限公司)，盐酸小檗碱对照品(上海源叶生物科技有限公司)1-萘胺(上海展云化工有限公司)，无水对氨基苯磺酸(上海中秦化学试剂有限公司)，N-1-萘乙二胺盐酸盐(天津光复精细化工研究所)，二甲胺(天津光复精细化工研究所)，其他均为国产市售分析纯。

2 方法

2.1 标准曲线的建立

精密称取盐酸小檗碱对照品0.0050g，用适量盐酸-甲醇溶液(1∶/100)溶解至25mL容量瓶中，待完全溶解后定容，摇匀，配置成浓度为0.2000mg/mL的盐酸小檗碱对照品贮备液。将对照品贮备液分别稀释成浓度为0.0010mg/mL、0.0020mg/mL、0.0040mg/mL、0.0060mg/mL、0.0080mg/mL、0.0100mg/mL、0.0200mg/mL的溶液，在358nm出测各溶液的吸光度。

2.2 多花素馨总生物碱的提取

精密称取多花素馨0.5000g，按料液比为1∶30的比例加入体积分数为85%的乙醇，超声提取45min后，在70℃的条件下水浴提取90min，得到多花素馨总生物碱的提取液。

2.3 模拟胃液的制备

模拟胃液A：称取2gNaCl，加去离子水溶解，加入7mL浓盐酸，加去离子水定容至1000mL。

2.4 亚硝酸盐清除率的测定-盐酸萘乙二胺法[4]

取5支25mL比色管加入模拟胃液A10mL，37℃下水浴10min后取出，分别加入浓度为0.0004mg/mL、0.0008mg/mL、0.0012mg/mL、0.0016mg/mL、0.0020mg/mL的样液2.0mL，加入5ug/mL的亚硝酸钠溶液2mL，分别37℃下水浴30min取出，立即加入0.4%对氨基苯磺酸2mL混匀，静置3～5min后分别加入1mL 0.2%的盐酸萘乙二胺溶液，加蒸馏水至刻度混匀，静置15min，在538nm下测吸光度A1，以去离子水代替亚硝酸钠做空白对照试验测吸光度A01，以去离子水代替生物碱溶液做空白对照试验测吸光度A02，亚硝酸盐清除率(%)=(A02+A01-A1)/A02。

2.5 亚硝胺阻断能力测定[5]

取5支25mL比色管加入模拟胃液A10mL，37℃下水浴10min后取出加入浓度为0.0004mg/mL、0.0008mg/mL、0.0012mg/mL、0.0016mg/mL、0.0020mg/mL的样液2mL，再加入1mmol/mL二甲胺溶液1mL，1mmol/mLNaNO21mL，蒸馏水稀释至刻度， 37℃下水浴1h，移液管移取1mL上述溶液加入到试管中，加入质量分数为0.5%的Na2CO3溶液0.5mL,于紫外分析仪上照15min,取出后加入质量分数为质量分数1.0%对氨基苯磺酸1.5mL，再加入质量分数为0.1%α-萘胺1.5mL，去离子水0.5mL，摇匀静置15min，在波长525nm波长下测吸光度A1，以去离子水代替亚硝酸钠做空白对照试验测吸光度A01，以去离子水代替生物碱溶液做空白对照试验测吸光度A02，亚硝胺阻断率(%)=(A02+A01- A1)/A02。

3 结果与讨论

3.1 标准曲线方程

建立的标准曲线方程为Y = 60.883X- 0.0039，R2= 0.9999(n=7)，盐酸小檗碱在0.0010～0.0200mg/mL范围内呈良好的线性关系。

3.2 亚硝酸盐清除率结果

图1 亚硝酸盐清除率结果

由图1可知，在浓度范围为0.0004～0.0020mg/mL时，浓度为0.0016mg/mL时，多花素馨生物碱，维生素C在模拟胃液A条件下对亚硝酸盐清除率达到最大，并且在模拟胃液A中多花素馨总生物碱对亚硝酸盐清除能力稍弱于维生素C。

3.3 阻断亚硝胺合成结果

由图2可知，在浓度范围为0.0004～0.0020mg/mL时，浓度为0.0012mg/mL时，多花素馨总生物碱在模拟胃液A中对亚硝胺阻断能力最大，浓度为0.0016mg/mL时，维生素 C在模拟胃液A中对亚硝胺合成阻断能力最大。

图2 阻断亚硝胺合成结果

[1] 张正付,边宝林,田秀峰.素馨属植物化学成分及药理活性研究进展[J].中国中药杂志,2004,29(12):1209-1212.

[2] 林善远.素馨花药材质量标准的研究[J].世界中医药,2013,8(6):667-668.

[3] 罗塞塞,郝婷,赵桂琴.素馨花总环烯醚萜苷的大孔树脂富集纯化工艺优选[J].中国实验方剂学杂志,2013,19(15):13-16.

[4] 梁英跃,傅 亮,孙颖莺,等.模拟胃液条件下红豆多肽清除亚硝酸盐及阻断亚硝胺合成的研究[J].食品与发酵工业,2010,36(4):40-44.

[5] 吕 娜,任利江.模拟胃酸条件下冬枣和青枣清除亚硝酸盐及阻断亚硝胺合成的比较研究[J].毒理学杂志,2016,30(5):378-380.