冯旭
不规则抗体是指除ABO 血型系统(抗-A、抗-B及抗-AB)以外的其他血型系统的抗体,可由妊娠、输血、移植等免疫刺激和某些疾病诱发产生,是引起临床血型鉴定、交叉配血困难、溶血性输血反应以及新生儿溶血病的主要原因[1,2]。因此,输血前对患者进行不规则抗体检测十分必要。本研究对我院2015年1月~2017年12月临床拟输血和备血的4 529 例患者进行不规则抗体检测,探讨其在临床输血安全中的意义。
1.1 一般资料 选择我院2015年1月~2017年12月临床拟输血和备血患者共4 529 例,其中男2 376 例,女2 153 例;既往有输血史1 481 例;既往有妊娠史 1 849 例。采集每例患者静脉血2~3ml,EDTA 抗凝。
1.2 试剂与仪器 不规则抗体检测试剂(人血红细胞)、低离子强度盐溶液抗人球蛋白微柱凝胶检测卡均购自长春博迅生物技术有限公司,低速自动平衡离心机购自湖南迈克尔实验仪器有限公司,血型血清学专用标准化离心机购自珠海贝索,免疫微柱孵育器、卡式离心机购自长春博研科学仪器有限公司,2℃~6℃医用冷藏冰箱购自海尔。
1.3 方法 通过抗人球蛋白微柱凝胶检测卡和不规则抗体检测试剂对4 529 例患者进行不规则抗体初筛试验,操作过程严格按照说明进行:将4%不规则抗体检测试剂用LISS 液稀释到0.8%,各取50μl上述Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ稀释液加入到已标记的凝胶卡的微孔内,再向各微孔内分别加入50μl 患者血浆,置于37℃条件下孵育15min,使用卡式法专用离心机离心5min,根据所提供的不规则抗体检测试剂的反应格局判定结果。将初筛阳性患者的标本送至上级参比实验室进行抗体鉴定。
1.4 统计学方法 使用SPSS 17.0 统计学软件对所有数据进行处理,计数资料的组间比较采用χ2检验,以P<0.05 为差异有统计学意义。
2.1 不规则抗体的筛查情况 4 529 例患者中不规则抗体阳性53 例,总阳性率为1.17%。其中2 376例男性患者中阳性16 例(0.67%);2 153 例女性患者中阳性37 例(1.72%);女性患者不规则抗体阳性率明显高于男性患者(χ2=10.67,P<0.001)。 1 481 例有输血史患者中阳性44 例(2.97%);3 048 例无输血史患者中阳性9 例(0.30%);有输血史患者不规则抗体阳性率明显高于无输血史患者(χ2=61.70,P<0.001)。1 849 例有妊娠史患者中阳性36 例(1.95%);304 例无输血史患者中阳性1 例(0.33%);有妊娠史患者不规则抗体阳性率明显高于无妊娠史患者(χ2=4.05,P<0.05)。
2.2 不规则抗体的特异性分布情况 53 例不规则抗体初筛阳性的患者抗体鉴定结果显示,Rh 系统占62.26%,MNS 系统占9.43%,Lewis 系统占7.55%,Duffy 系统占1.89%,自身抗体占13.21%,冷抗体占5.66%。见表1。
表1 53 例不规则抗体特异性分布
随着科学技术的不断发展和检测手段的不断更新,目前已发现并被国际输血协会认可的血型系统已有36 个[3,4],其中与临床输血安全最为息息相关且意义重大的为ABO 和Rh 血型系统。由于疾病、创伤等一些原因导致患者贫血、失血量过多时临床上常给予输血治疗。交叉配血是保证临床输血安全、及时、有效的重要实验。然而,在实际工作中,常常是仅针对ABO、Rh(D)同型的受、供双方进行交叉配血试验,而对输入的血液是否引入新的稀有抗原以及产生有意义的抗体不得而知,这将在很大程度上影响患者再次输血时的效果。因此,在输血前对患者进行不规则抗体检测显得尤为重要。
此次研究显示,在4 529 例患者中不规则抗体阳性53 例,总阳性率1.17%,与既往报道的不规则抗体阳性率(0.6%~1.8%)一致[1,5],提示我们在日常工作中应引起对不规则抗体检测的重视,避免漏检给交叉配血带来困难,影响及时输血治疗。但差异较大时说明输注抗原不相合的血液并非一定产生不规则抗体,还与抗原的剂量效应有关[6~8]。另外研究结果还显示,不规则抗体的阳性率存在性别差异,即女性高于男性,分析原因可能是女性患者在某些特殊时期(如接受妊娠等免疫刺激),机体产生免疫应答。这一推测在我们此次研究的另一个结果中进一步得以证实,我们发现女性患者中有妊娠史者不规则抗体阳性率明显高于无妊娠史者(1.95% vs 0.33%,P<0.05)。不规则抗体的产生不仅与妊娠、某些免疫性疾病、血液病有关,还与输血史有关,且与输血次数成正相关。有研究结果显示,患者每输入1 个单位的血液制品,体内产生不规则概率为0.8%~1.5%,且随着输血次数的增多,这一概率可增至14%~22%[9]。
对53 例不规则抗体初筛阳性的患者进行抗体鉴定,除7 例为自身抗体,3 例为冷抗体外,其余43例不规则抗体主要分布在Rh、MNS、Lewis、Duffy 血型系统,其中又以Rh 系统最为常见,这一结果可能为基层一些缺乏实验条件的医院带来参考价值。Rh 血型系统的不规则抗体是引起溶血性输血反应最主要的原因。我们发现抗-E 产生的概率最高(41.51%),提示抗-E 应引起输血科工作人员的足够重视。而D 抗原的免疫原性虽然最强,但抗-D出现的频率低(3.77%),可能与D 抗原在我国汉族人群中分布的频率高达99.7%有关[10]。另外联合出现的抗-Ec 和抗-Ce 近年来也逐渐增多,同样应当予以重视。
综上所述,输血前进行不规则抗体的检测十分必要,且在条件允许的情况下应尽可能多的开展多个血型系统的交叉配合试验,以尽可能少地输入新抗原为原则,对不规则抗体阳性的患者选择不含有对应抗原的血液进行输注,减少发生输血不良反应,保证患者安全而又及时有效的输血治疗。