氯苯胺灵原药高效液相色谱分析方法研究

(国家危险化学品质量监督检验中心，四川成都，610021)

氯苯胺灵 (中文别名：3-氯氨基甲酸异丙基酯；间氯苯氨基甲酸异丙酯，分子式：C10H12ClNO2分子量：213.66)，纯品为晶体，具有轻微的特殊气味，熔点41°C，25°C时蒸气压0.000173mmHg。25℃时在水中的溶解度为89mg/L，在石油中熔解度中等(在煤油中l0%)，可与低级醇、芳烃和大多数有机溶剂混溶。氯苯胺灵是除草剂也是植物生长调节剂，氯苯胺灵用作一种高度选择性苗前或苗后早期除草剂，药剂被禾本科杂草芽鞘吸收，以植物的根部吸收为主，也可被叶片吸收，在体内向上、向下双向传导，作为植物生长调节剂用来抑制马铃薯发芽等。

随着氯苯胺灵的日益推广，急需研究出一种简便、快速、分离效果好的分析方法，笔者经过大量实验后，采用反相高效液相色谱法分离，外标法测定氯苯胺灵原药含量，满足企业的产品质量控制，检测效率高，结果重现性好，是理想的检验方法。

1 实验部分

1.1 试剂和溶液

标准品：99.0%；甲醇：(色谱纯，美国Mreda Technologyinc Inc)；水：(二次蒸馏水，自制)。

1.2 仪器

Agilent1260：(具有二极管阵列紫外检测器和自动进样器，安捷伦)；色谱柱：(150mm×4.6mm(i.d.)不锈钢柱，内装ZORBAXC18、5μm填充物，安捷伦)。

1.3 操作条件

流动相：ψ(甲醇：水)=80：20(V：V)；流速：1.0mL/min；柱温：30℃±1℃；检测波长：235nm；进样体积：20μL；保留时间：约3.5min。

典型的氯苯胺灵原药液相色谱图(见图1)。

图1 氯苯胺灵原药液相色谱图

1.4 测定步骤

1.4.1 标样溶液的制备

称取0.05g(精确至0.0002g)氯苯胺灵标准品，置于50mL容量瓶中，用甲醇溶解，稀释到刻度，吸5mL于50mL容量瓶中，用甲醇溶解，稀释到刻度,冷却，备用。

1.4.2 试样溶液的制备

称取约含0.05g(精确至0.0002g)氯苯胺灵原药的样品，置于50mL容量瓶中，用甲醇溶解，稀释到刻度，吸5mL于50mL容量瓶中，用甲醇溶解，稀释到刻度,冷却，备用。

1.4.3 测定

在上述操作条件下，仪器稳定后，连续进入氯苯胺灵标品溶液，至相邻2针氯苯胺灵标品溶液的峰面积相对变化<1.0%后，按照标样、试样、试样和标样的顺序测定。

1.5 计算

样品中氯苯胺灵的质量分数x(%)，按下式计算：

式中：A1——标样溶液中，氯苯胺灵峰面积的平均值；

A2——试样溶液中，氯苯胺灵峰面积的平均值；

m1——标样的质量，单位为克(g)；

m2——试样的质量，单位为克(g)；

ω——标准品中氯苯胺灵的质量分数，以%表示。

2 结果和讨论

2.1 吸收波长的选择

利用通过Agilent1260高效液相色谱仪二极管阵列检测器进行扫描，得到氯苯胺灵原药紫外波长扫描图(图2)。从图2中可以看到氯苯胺灵最大吸收波长在235nm附近，此处溶剂干扰较小，因此将检测波长定为235nm。

2.2 流动相和溶剂的选择

一般情况下，水和与水互溶的有机溶剂是反相液相色谱的流动相的最佳选择。通常，大多数的样品都可以用一定比例的甲醇和水作为流动相来分离，甲醇和水都经济便宜、且环境污染较小，毒性相对低。笔者以不同的比例进行比较，当甲醇+水=80+20时，基线稳定，样品分离快、效果好，最终选定甲醇+水=80+20为流动相。

图2 氯苯胺灵原药紫外波长扫描图

由于氯苯胺灵能和大多数有机溶剂混溶，选择了三种不同溶剂进行比较：甲醇，乙腈，流动相。从峰的面积和分离度及拖尾因子和环保因素考虑，最终选定甲醇为溶剂。

2.3 线性相关性

称取0.01g、0.02g、0.05g、0.08g、0.10g标准品按本方法1.4.1进行处理后测定，以氯苯胺灵峰面积为纵坐标，氯苯胺灵浓度为横坐标绘制标准曲线，得线性回归方程为y = 217731x + 13.973，其线性相关系数R2为0.9999。见图3。

图3 线性关系图

2.4 精密度

对同一氯苯胺灵原药样品在该液相色谱条件下，5次重复测定，测得变异系数为0.24%。见表1。

表1 氯苯胺灵精密度试验

2.5 回收率

已知含量的原药样品按1.4.2

处理，稀释成相同浓度的5份，分别添加质量为0.8 、2.0 、4.0 、6.0 、8.0mg氯苯胺灵的标准品，按上述方法测定标准品的含量，计算得回收率在98.2%～101.6%之间。

3 结论

综上所述，该方法测定氯苯胺灵原药的含量，具有操作简便、快捷的优点，并且重现性、稳定性、分离效果都好，能满足氯苯胺灵原药的检验要求，是一种较为理想的检测方法。