5种常用消毒剂对锦鲤幼鱼的急性毒性试验

刘银华，何国森，钱 毅，刘路遥

(1.福建省淡水水产研究所，福建 福州 350002； 2.福建农林大学，福建 福州 350002)

锦鲤(Cyprinuscarpio)，属鲤科，杂食性，性情温和，喜结群而游，在2～30℃条件下均可生存，适宜生长温度为20～26℃，对温度突变敏感[1]。锦鲤是一种寓意吉祥的观赏鱼类，在中国有一千多年的养殖历史，一直深受人们的喜爱。随着锦鲤养殖规模的扩大及水环境污染的加剧等，各种病害问题不断发生[2-3]，使用消毒剂来防治病害就必不可少。因过量使用消毒剂产生副作用导致养殖生物大量死亡的现象时有发生，为避免养殖动物的中毒死亡，需要把握好消毒剂的毒性及安全浓度范围。目前，关于消毒剂对锦鲤的急性毒性的研究并不多[4-7]。而且，我国水产养殖面积广阔，品种繁多，不同种类消毒剂对不同品种、不同规格水产动物的毒性差异较大。文章通过探讨5种常见消毒剂对锦鲤幼鱼的急性毒性反应，得出该5种药物在锦鲤幼鱼时期的半致死浓度和安全用药浓度范围，意在给养殖中这几种消毒剂的使用提供理论参考，能在实际应用中减少相应的损失。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 试验鱼

试验鱼来自福建省淡水水产研究所榕桥中试基地锦鲤苗种培育池，选择正常养殖，无病无伤，规格均匀的锦鲤幼鱼作为试验对象，平均全长(4.73±0.82)cm，平均体重(1.83±0.35)g。在相同室内环境下暂养48 h，试验开始前24 h停止投喂。

1.1.2 试验渔药

试验选用溴氯海因、三氯异氰尿酸、聚维酮碘、二氧化氯、高锰酸钾5种市面上常见消毒剂，详见表1。

表1 试验用消毒剂

试验用药品现配现用，先配成一定浓度的母液，再根据试验需要按比例稀释，试验前药液用水稀释，混匀。

1.1.3 试验条件

试验在福建省淡水水产研究所榕桥中试基地养殖车间内进行。试验用水为经过滤并曝气48 h的养殖用山溪水，水温26～28℃，pH值约为7.5，溶氧大于5 mg/L。试验器材为容积5 L的塑料桶，每桶盛水3 L。

1.2 试验方法

先经过48 h预试验，分别得到5种药物对锦鲤幼鱼的48 h无死亡浓度和24 h全部致死浓度。根据预试验，每种药物分别设置5个浓度梯度组(表2)、1个对照组，每组2个平行，每组10尾鱼。试验采用静水试验法，在试验过程中，为保证试验环境稳定，不换水，不增氧，不投喂。前1 h连续观察，至第6 h再次观察并记录试验鱼的活动和死亡情况，之后每6 h观察一次并记录，及时捞出死鱼，以针刺无反应判断为死亡。

表2 各种试验药物的浓度

1.3 数据处理

采用Karber氏法[8]计算半致死浓度(LC50)，计算公式：lgLC50= Xm-i(Σp-0.5)。式中，Xm为最大剂量的对数；i为相邻组浓度对数差；P为各浓度组死亡率，∑p为各浓度组死亡率之和，半数致死浓度LC50为96 h内引起试验动物死亡一半时的浓度。

安全浓度SC= 96 h LC50×0.1。

2 结果与分析

2.1 锦鲤幼鱼中毒症状

试验开始时，低浓度组的锦鲤幼鱼与未加药品的空白对照组相比，并无明显区别，处于正常活动状态；高浓度组的幼鱼在初入试验容器时反应明显，在桶内快速窜游、打转，甚至有些会跳出水面，或撞向桶壁。一段时间后，低浓度组的幼鱼并没有发生太大变化，少部分会有游动缓慢的表现，其活力与对照组比较稍微减弱；而高浓度组的幼鱼，活力明显降低，表现出游动迟缓，一些出现僵直、平躺在水底的情况，而且体表黏液增多，对刺激反应迟钝。

高浓度溴氯海因试验组，锦鲤表现呼吸急促，伏于底部，直至死亡。高浓度三氯异氰尿酸试验组，锦鲤在50 s的时候就出现个体下沉，6 min便出现个体死亡，针刺无反应，2.10 mg/L浓度组在3 h便已死亡过半，12 h全部死亡；而低浓度的三氯异氰尿酸试验组，随着时间的推移，表现也越来越激烈不安，个体体表黏液增多，直至死亡。二氧化氯试验组与三氯异氰尿酸试验组幼鱼反应症状相近，高浓度组幼鱼游动迅速，75 mg/L浓度组在20 min左右出现死亡，死亡个体体表大量黏液，18 h全部死亡。高浓度聚维酮碘试验组在进入药液后，幼鱼呼吸明显减弱，身体失去平衡侧翻，在桶底抽动摇摆，死亡个体僵硬，1.00 mg/L试验组在15 min左右出现死亡，12 h死亡率达到95%，0.85 mg/L试验组在45 min左右出现死亡，6 h死亡率达到60%。低浓度高锰酸钾试验组，症状不明显，与空白对照组无差异，但随着时间的延长，鱼缺氧加重，鳃盖开合速度加快。

2.2 半数致死浓度和安全浓度

根据各个试验组的试验鱼死亡情况统计5种试验药物对锦鲤幼鱼的影响，得出 24 h、48 h、72 h、96 h半数致死浓度(LC50)及安全质量浓度(SC )结果，见表3。

表3 5种药物对锦鲤幼鱼的半数致死浓度和安全浓度

3 讨论

3.1 溴氯海因对锦鲤幼鱼的安全性

溴氯海因溶于水后，分解成游离态的活性氯、活性溴和新生态氧，可以氧化微生物体内的磷酸脱氢酶，从而杀灭该微生物[9]。溴氯海因是一种广谱消毒剂，可作为多种鱼、贝、虾的杀菌消毒药物。试验所得溴氯海因对锦鲤幼鱼的安全浓度是0.29 mg/L，远低于双齿围沙蚕(Perinereisaibuhitensis)的21.6 mg/L[10]，也低于鲶鱼(Silurusasotus)的0.56 mg/L[11]，甚至低于水产生产上杀菌消毒常用量(0.3～0.4 mg/L)[9]，说明锦鲤对溴氯海因敏感，在生产中要注意使用剂量。

3.2 三氯异氰尿酸对锦鲤幼鱼的安全性

三氯异氰尿酸，又叫强氯精，遇水溶解后，产生次氯酸，而次氯酸可释放活性氯和新生态氧，抑制细菌各种硫基酶活性，从而杀灭细菌[9]。三氯异氰尿酸为广谱型杀菌剂，对细菌、真菌和病毒均有高于一般消毒剂的杀灭效果[12]。试验所得三氯异氰尿酸对锦鲤幼鱼的安全浓度为0.057 mg/L，远远低于泥鳅(Orientalweatherfish)的2.27 mg/L和草鱼(Ctenopharyngodonidellus)鱼苗的0.44 mg/L，也远低于水产生产中的常用全池泼洒浓度(0.1～0.3 mg/L)[9]，说明锦鲤对三氯异氰尿酸比较敏感，在锦鲤养殖生产中，应该慎用或者禁用。

3.3 二氧化氯对锦鲤幼鱼的安全性

二氧化氯又称百毒清，是一种强氧化剂，作用机理有别于一般氯制剂，活化后的二氧化氯会产生新生态氧，具有极强的氧化作用，可使微生物蛋白质失活，快速杀灭微生物[12-13]。二氧化氯对细菌、芽孢、病毒、原生动物和藻类等都有很好的杀灭效果，如大肠杆菌(Escherichiacoli)在消毒剂浓度为100 mg/L的条件下，10 min就能被100%杀灭[14]。二氧化氯对锦鲤幼鱼的安全浓度(4.960 mg/L)远远高于生产中常用的泼洒浓度(0.1～0.3 mg/L)[13]，与湘云鲫的试验结果(3.24 mg/L)一致[15]。且经急性毒性试验后幸存的锦鲤又能存活数天，表明二氧化氯可以在锦鲤的养殖生产中安全使用。

3.4 聚维酮碘对锦鲤幼鱼的安全性

聚维酮碘，是聚乙烯吡咯烷酮(PVP)与分子碘形成的高分子络合物，对菌膜亲和的PVP运载的碘与胞膜、胞质结合，使蛋白质、酶、脂质等失活[12]。聚维酮碘在水产养殖中应用较早，其高效、低毒，可抑制多数的细菌、真菌及病毒的生长繁殖，甚至将其杀死。试验得出聚维酮碘对锦鲤幼鱼的安全质量浓度(0.071 mg/L)远低于聚维酮碘在养殖生产中常用的泼洒消毒质量浓度(0.2～0.5 mg/L)，且与双齿围沙蚕(89.1 mg/L)[10]和暗纹东方鲀(Takifuguobscurus)稚鱼(32.97 mg/L)[16]的试验结果相差甚远，却与刺参(OplopanaxelatusNakai)幼参(0.09 mg/L)[17]试验结果相近，可见锦鲤对聚维酮碘的敏感性较强。

3.5 高锰酸钾对锦鲤幼鱼的安全性

高锰酸钾为黑紫色长棱形结晶，味甜无臭。高锰酸钾是一种强氧化剂，易溶于水，产生新生态氧，快速氧化蛋白使其失活，从而杀灭细菌。高锰酸钾对治疗草鱼三代虫(Gyrodactylus)、车轮虫(Trichodina)、锦鲤的锚头蚤(Lernaeacyprinacea)等有很好的效果。试验得出高锰酸钾对锦鲤幼鱼的安全浓度为0.773 mg/L，高于席敏等的试验结果(0.495 mg/L)[18]，这可能与试验用鱼的大小差异有关，但两个试验所得高锰酸钾安全浓度都与生产上常用预防剂量(2～5 mg/L)差距较远[19]。试验结果显示，高锰酸钾对锦鲤的24 h LC50和48 h LC50差别不大，而与72 h LC50和96 h LC50差异明显，这也再次说明高锰酸钾与鱼鳃分泌物作用，会形成二氧化锰沉淀造成缺氧，随着时间的增加，沉淀也越积越多[20]。所以，在锦鲤养殖生产中，高锰酸钾的使用要非常谨慎，要特别注意增氧。

4 结论

通过试验，得到5种消毒剂对锦鲤幼鱼的安全浓度值为二氧化氯>高锰酸钾>溴氯海因>聚维酮碘>三氯异氰尿酸，因此其毒性大小依次为三氯异氰尿酸>聚维酮碘>溴氯海因>高锰酸钾>二氧化氯。