猪尿中沙丁胺醇残留的检测方法介绍

王錾彧 于世明 李 蕊 江 淼 金慧然 陶 娅

黑龙江省农产品和兽药饲料技术鉴定站，哈尔滨 150001

沙丁胺醇于1975年首次在我国上市，其能快速地松弛气道平滑肌，对因上呼吸道疾病引起的支气管痉挛有良好的治疗效果。当沙丁胺醇作为猪的促生长剂长期添加使用后，猪宰杀后组织中可能有浓度较高的沙丁胺醇残留，人食用后就会出现头晕、头痛、肌肉颤动、恶心、呕吐等中毒症状，对心脏病患者和高血压患者，甚至会危及生命。笔者就猪尿中沙丁胺醇残留的各种检测方法作一总结，以期为食品药品安全部门检测沙丁胺醇提供科学参考。

1 高效液相色谱法

高效液相色谱法是在经典液相柱色谱基础上，采用高压泵、高效填料和高灵敏度检测器，实现了分析速度快，分离效率高和操作自动化。检测样品通过提取和净化后，再使用高效液相色仪进行检测。金雁等[1]报道过高效液相色谱法测定猪肉中沙丁胺醇残留量的研究，猪肉样品中加入EDTA-2Na、磷酸溶液和高氯酸进行提取，提取后的样品再通过C18固相萃取柱进行纯化，纯化后的样品经高效液相色仪检测。检测结果显示，沙丁胺醇的最佳检测波长是196 nm，在0.04～10.0 μg/mL范围内线性关系良好，最低检出限为1 μg/mL，其中1、10、50 μg/mL 的平均回收率分别为 71.5%、82.1%、88.1%，3个回收质量浓度的相对标准偏差均小于10%，这说明该高效液相色谱法对猪肉中沙丁胺醇残留量的测定具有良好的灵敏度和精密度。

2 液相色谱-串联质谱法

质谱分析法是通过对被测样品离子的质荷比的测定来进行分析的一种分析方法，液相色谱串联质谱仪主要由高效液相色谱、接口装置（电离源）、质谱仪组成，高效液相色谱与一般的液相色谱相同，其作用是将混合物样品分离后进入质谱仪。朱英才等[2]报道过使用超高效液相色谱-串联质谱法检测猪尿中沙丁胺醇的残留，猪尿样品先用氢氧化钠溶液和叔丁醇-叔丁基甲醚 (50∶50)溶液进行提取，再用MCX小柱进行净化，净化后的样品过0.22 μm滤膜后供液相色谱-串联质谱仪分析。检测结果表明，沙丁胺醇使用MCX小柱净化后的回收率为93.8%，在1～50 μg/L范围内线性关系良好，最低检出限为0.08 μg/L，最低定量限为0.27 μg/L，其中2、10、50 μg/L的平均回收率分别为89.1%、93.8%、96.6%，3个回收质量浓度的相对标准偏差均小于10%，这表明建立的检测方法适用于猪尿中沙丁胺醇的检测。

谷旭等[3]使用超高压液相色谱-飞行时间质谱法对沙丁胺醇在猪尿液和其代谢产物进行测定，猪尿样品通过乙腈处理，37℃氮气吹干乙睛复溶，过0.22 μm滤膜后供试。试验结果显示，沙丁胺醇的保留时间为1.8 min，在正离子模式下，沙丁胺醇的特征离子的质荷比为240，沙丁胺醇生成较少的脱水碎片离子的质荷比为222。沙丁胺醇给药后0～6 h尿液样本中鉴定出的代谢产物最多，共鉴定出可能的代谢物5个，其中2种代谢产物尚未见报道。

3 酶联免疫吸附法

目前可以使用间接竞争性酶联免疫法和直接竞争性酶联免疫法来测定猪尿中沙丁胺醇残留，本检测方法操作简便，分析时间相对较短，且检出限也在不断降低。郑宏伟等[4]报道过酶联免疫试剂盒对猪尿中沙丁胺醇的含量测定效果和方法。猪尿经过孵育和洗板处理后，通过酶标仪测定并使用RIDAWIN软件计算供试样品中沙丁胺醇的含量。试验结果表明，猪尿中1、2、4和8 ng/mL 4个不同质量浓度的沙丁胺醇的添加回收率分别为86.0%、90.5%、94.5%、93.2%，相对平均偏差为3.9%～11.6%，这表明本方法适合猪尿中沙丁胺醇的含量检测。李建鲲等[5]报道过一种猪尿中的沙丁胺醇ELISA试剂盒检测技术，使用间接竞争ELSA法检测猪尿样样品中的沙丁胺醇的含量，测定结果显示，该测定方法可定量测定猪尿中沙丁胺醇含量的范围为0.1～3.0 ng/mL，且516批猪尿样品测试结果显示，建立的测定方法的灵敏度良好，特别适用于沙丁胺醇低水平残留的检测。

4 胶体金免疫法

胶体金免疫法是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种快速定量检测方法。现在胶体金免疫层析试纸条标记探针的检测灵敏度在不断提高，对检测物的检出率也在不断提升。吴雨豪等[6]报道过使用多枝状胶体金免疫层析试纸条定量检测猪尿中沙丁胺醇，多枝状的胶体金有比传统球形胶体金更高的摩尔消光系数，试验使用65 nm多枝状胶体金，将抗沙丁胺醇单克隆抗体标记在AuNFs上制备检测探针，通过建立了基于T（试纸条检测线）/C（质控线）比值法来定量检测猪尿中沙丁胺醇的含量。试验结果显示，猪尿中沙丁胺醇的定量线性范围为0.05～1.0 ng/mL，最低检出限为0.027 ng/mL，猪尿中0.05、0.15、0.5 ng/mL 3个不同质量浓度的沙丁胺醇的添加回收率分别为 107.74%、101.53%、110.68%，相对平均偏差为1.5%～9.1%，这表明本方法适合猪尿中沙丁胺醇的现场快速筛查检测。

5 结语

随着检测分析技术的不断发展，猪尿中沙丁胺醇的检测方法的灵敏度和精确度也在不断提高。相信将来沙丁胺醇的检测技术会变得更加精确、操作更便捷，各种检测方法都朝着实用方向进发，为消费者的食品安全保驾护航。