探究丙泊酚对于II型糖尿病大鼠心肌缺血-再灌注时自噬的影响

赵丽霞，彭俊旭，张怀奇，胡育邦，彭粤，任从才

（中山大学附属第八医院（深圳福田）麻醉科，广东深圳 518000）

近年来，2型糖尿病发病率明显提高，晚期并发心血管疾患者的死亡率最高。体外循环、冠状动脉球囊扩张术以及急性心梗溶栓之后极易出现心肌缺血-再灌注损伤，对患者预后及生存质量产生严重影响[1,2]。本研究在分子水平将丙泊酚对II型糖尿病大鼠心肌缺血-再灌注时自噬的影响进行探讨。

1 材料与方法

1.1 分组 选取84只6周龄-8周龄的健康成年雄性SD大鼠，体质量在200 g-220 g之间，采用随机数字表法分为非糖尿病组与2型糖尿病组，每组42只。采用高糖高脂饲料喂养2型糖尿病组大鼠，8周后，给予其30 mg/kg链脲佐菌素腹腔内注射，对2型糖尿病模型进行诱导。注射完链脲佐菌素之后，每周均空腹12 h，采集尾静脉血，对空腹血糖进行测定，连续4周，大鼠2型糖尿病模型诱导成功的标准为血糖高于14 mmol/L，同时有明显的胰岛素抵抗、多饮、多尿现象出现。

1.2 具体实验方式 六组大鼠均给予50 mg/kg 10%的水合氯醛腹腔内注射，麻醉大鼠之后，再行气管插管操作，将小动物呼吸机连接起来，对其行机械通气；采用股静脉穿刺微量输液泵对生理盐水或者丙泊酚进行输注，将三导联心电监测连接，在右侧颈动脉行穿刺置管操作，将压力换能装置连接起来，对左心室压力进行监测。等到大鼠心率以及血压处于稳定状态之后，采用右侧卧位，在第3-第5肋间行开胸操作，将心包剪开，在冠状动脉左前降支走行下方穿6-0丝线，将聚乙烯硬管垫在结扎线以及心肌之间，将结扎线收紧之后，能发现结扎部位之下的心肌变暗，心电图显示出ST段明显抬高，则说明成功缺血；将结扎线剪开置换后，如果心脏表面呈现为红色，抬高ST段下降50%以上，则表示成功完成再灌注，缺血时间以及再灌注时间分别为30 min、2 h；于缺血之前的10 min，DI+P组以及CI+P组均给予6 mg·kg-1·h-1丙泊酚静脉持续泵注，其他各组均给予生理盐水静脉持续输注，DC组以及CC组均只穿线，不需要行结扎处理。

1.3 统计学分析 采用SPSS 19.0处理数据，各项指标测定将结果均行t检验，以均数±标准差（Mean±SD）表示，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

各组大鼠电镜下观察情况分析。再灌注120 min末，电镜下观察到各组大鼠心肌组织有超微结构改变出现；CC组心肌细胞呈现为整齐排列现象，没有水肿现象出现，具有完整的线粒体膜；DC组与CC组对比，细胞胞排列更加紊乱，水肿轻度，线粒体出现轻度膜、嵴融合不清现象；DI+P组、CI+P组相较于DI组与CI组，心肌细胞损伤更轻；DI组与CI组心肌细胞紊乱排列，有高度水肿现象出现，存在空泡样改变，线粒体嵴和膜断裂溶解完全消失。

3 讨论

cTnT是心肌细胞特异性抗原，心肌结构蛋白的破坏情况可通过其在血液中的浓度进行反映，且和心肌细胞损伤之间有密切相关性。ET是对心血管功能进行调节的因子，能对心血管系统稳态以及基础血管张力进行有效维持，研究中显示丙泊酚能促使糖尿病血管内皮细胞功能得到改善[3]。目前临床上鲜有关于丙泊酚对2型糖尿病心肌缺血-再灌注时自噬产生影响的报道，本研究结果显示，丙泊酚可通过将自噬抑制蛋白p-mTOR表达增加，进而对心肌过度自噬进行抑制，促使正常大鼠心肌缺血-再灌注损伤减轻；除此之外，丙泊酚还可以通过对心肌过度自噬进行抑制，进而将2型糖尿病大鼠心肌缺血-再灌注损伤减轻。

综上所述，丙泊酚能将2型糖尿病大鼠以及正常大鼠的心肌缺血-再灌注损伤减轻，为临床实践提供了一定的理论基础。但是分子机制浅显，今后我们将从自噬通路的上游如LncRNA-miR调控自噬方面研究丙泊酚对缺血再灌注损伤保护的分子作用机制。