孔雀自然感染组织滴虫病例的病理学诊断与防治

胡静 焦凤超 黄文植 何书海

孔雀自然感染组织滴虫病例的病理学诊断与防治

胡静 焦凤超 黄文植 何书海*

（信阳农林学院牧医工程学院 河南 信阳 464000）

信阳双井乡某孔雀养殖厂出现孔雀精神萎靡，头部发绀，排黄色带血稀粪现象，通过病史调查，眼观病变和病理组织学观察方法，对发病孔雀进行病理学诊断。病死孔雀尸体剖检可见肝脏有大小不等淡黄色坏死灶，盲肠肿大出血，内有干酪样内容物；对病死孔雀肝脏和盲肠使用石蜡包埋法制作病理切片，H.E染色后在显微镜下观察，显示肝脏和盲肠中有大量炎性细胞和嗜伊红性组织滴虫浸润。

组织滴虫病是一种禽类急性寄生虫病，主要侵害肝脏和盲肠，故又称盲肠肝炎病，目前发现多种禽类均可感染本病[1]。随着孔雀养殖业的发展，其已经成为威胁孔雀养殖业健康发展的主要寄生虫病之一[2]。2019年5月，信阳双井乡某孔雀养殖场饲养的孔雀陆续发病死亡，根据病史调查、临床症状和病理组织学诊断结果，确诊为孔雀组织滴虫感染，本文对该起孔雀组织滴虫病自然感染病例的发病情况、诊断及防治分析如下。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 病料来源 信阳市平桥区双井乡某孔雀养殖场2月龄病死孔雀。

1.1.2 仪器和设备 石蜡切片机(型号为KD1508 A，购自浙江金华科迪仪器设备有限公司)、熔蜡恒温培养箱(购自重庆万达仪器有限公司)、摊片烤片烘片机(型号为PPTHK-21B，购自襄樊徕克生物电子仪器厂)、试剂与切片制作仪器等实验器材为实验室自备。

1.2 方法

对病死孔雀进行尸体剖检观察病理变化，选取眼观病变明显的肝脏和盲肠，切取大小为1.7cm×0.9cm×0.2cm的组织块并立即放入浓度为10%的甲醛生理盐水液中固定；组织块固定完成后，装入包埋盒中，使用流水冲洗数小时；将冲洗好的装有组织块的包埋盒依次放入浓度为70%、85%、95%I、95%II的酒精溶液中各浸泡2h左右后取出，再依次放入无水乙醇I，无水乙醇II中各浸泡1h左右，之后将组织取出依次置于二甲苯I、二甲苯II中进行透明并观察组织的透明情况；将透明完全的肝脏和盲肠组织块依次放入熔点为52~54℃、56~58℃融化的石蜡中，其中肝脏的浸蜡时间为软蜡3h，硬蜡2h，盲肠的浸蜡时间为软蜡3h，硬蜡1h，将浸蜡后的组织置于温度与组织块本身温度相同的融化石蜡中，待石蜡凝固后，即完成包埋；将制作好的蜡块固定于切片机上，切出厚度为3μm的切片，干燥脱蜡复水后即可使用苏木素伊红染色，再使用酒精和二甲苯使切片透明，最后使用中性树胶进行封固，盖上盖玻片完成切片制作。

2 结果

2.1 病史及症状

该养殖场饲养约60只孔雀，自2017年起，连续两年均有孔雀发生组织滴虫病，2019年5月3日饲养员发现部分孔雀精神沉郁，采食不佳，个别孔雀排黄色带血粪便，使用抗球虫药物和抗生素治疗效果不佳，4d后大部分孔雀都有下痢症状，10只孔雀饮食断绝，头部发绀，卧地不起，排黄绿色带血粪便，5只2月龄孔雀死亡，当天饲养员将死亡孔雀送检。

2.2 眼观病变

眼观可见盲肠肿大增粗有出血现象，盲肠黏膜水肿，肠壁增厚较为明显，内有固体内容物，形似香肠，剪开可见大量栓塞物，呈干酪样；肝脏肿大质脆，表面布满大小不一、分布不均匀的圆形溃疡灶中央凹陷，边缘隆起，其他组织未见明显异常。

2.3 病理组织学观察

（1）肝脏肝脏固有结构破坏，可见坏死灶，外周区域的肝索排列紊乱，肝组织可见大量肝细胞变性、坏死，其间有大量圆形或椭圆形的嗜伊红性组织滴虫和炎性细胞浸润。（2）盲肠盲肠黏膜浆膜肌层出血，固有层充血和出血，黏膜上皮细胞变性坏死脱落，表面出现多种细胞混合的团块。黏膜固有层可见大量大小不一的圆形或椭圆形淡红色的组织滴虫虫体，并有大量炎性细胞浸润。

3 讨论

（1）通过本次病例的病理组织学观察中发现，组织滴虫病主要损害孔雀的肝脏和盲肠，观察到肝脏和盲肠中有大量圆形的红染的组织滴虫虫体。组织滴虫经孔雀口进入体内后，首先经消化道侵入盲肠黏膜，导致黏膜上皮细胞坏死脱落，随着炎症向肠壁深层发展，导致浆膜肌层充血和出血，使盲肠整体受到损伤[3]。寄生于盲肠壁的组织滴虫可通过毛细血管，随门静脉流入肝脏，使肝细胞变性坏死而引起炎症，严重时损伤心肌纤维导致心力衰竭，出现血液循环障碍，引起临床上表现的黑头病[4]。（2）根据临床症状，肝脏和盲肠的典型病变，病理学检查的综合诊断和实验室虫体检查即可确诊该病。需要注意的是，该病和球虫感染症状相似，甚至有混合感染的现象，因此在诊断时需要考虑球虫感染的可能。随着科学技术的发展，组织滴虫的诊断水平也得到了提高，免疫学及生物学诊断方法如PCR技术逐渐被应用到诊断中，诊断速度和准确性得到很大的提升，具有广阔的应用前景[5]。（3）孔雀感染组织滴虫主要是通过采食带有组织滴虫的蚯蚓或异刺线虫，引起感染发病[6]。本次病例中的孔雀散养在一片开阔的树林中，可能会接触到带虫的蚯蚓或异刺线虫，饲养员流动性大，缺乏饲养管理规章制度，饲料主要是小米和玉米，营养不全缺乏维生素，综合以上因素可以判定这是该养殖场连续3年暴发组织滴虫病的原因。因此建议将病情严重的孔雀宰杀淘汰进行无害化处理，治疗前将孔雀分群，饮水中加入多维电解质，发病孔雀饲料里按250mg/kg混入甲硝唑饲喂，未发病孔雀使用阿苯达唑驱虫。使用该方法治疗一周后停药一周，再治疗5d，该场病情得到控制，本次治疗结束后建议养殖户专门开辟一片场地彻底清扫消毒后再饲养孔雀。除此之外，建议养殖户制定标准化饲养管理制度，包括合理的驱虫计划，维护环境卫生工作，定期清洗消毒孔雀用具，及时处理粪便防止蚯蚓和异刺线虫污染饲料，饲喂全价饲料等措施，只有做好日常饲养管理才是预防疾病发生的有效手段。

[1] 彭高辉, 翁亚彪, 朱兴全. 禽组织滴虫病概述[J]. 中国家禽, 2009, 31(12): 42-45.

[2] 郑明学, 霍乃蕊, 董耀丰. 蓝孔雀组织滴虫病的病理学观察[J]. 中国家禽, 1997(7): 38-39.

[3] 张媛, 王丹, 葛晨霞等. 孔雀组织滴虫病的病理学诊断[J]. 中国兽医杂志, 2011, 47(8): 49-50.

[4] 李普霖, 王水琴, 邱震东等. 动物病理学[M]. 长春: 吉林科学技术出版社, 1994: 879-881.

[5] 陆慧君, 贺文琦, 姜宁等. 孔雀组织滴虫病自然感染病例的病理学观察[J]. 中国畜牧兽医, 2010, 37(5): 186-187.

[6] 杨志伟, 潘玲, 刘红梅等. 禽盲肠肝炎临床诊断及病理组织学观察[J]. 黑龙江畜牧兽医, 2016(6): 102-104, 278-279.

河南省科技攻关项目（182102110313）

（2019–08–22）

S858.39

B

1007-1733(2019)11-0034-02