HOTAIR在乳腺癌组织中的表达水平及意义

(青岛大学医学部基础医学院，山东 青岛 266000)

乳腺癌是临床常见的恶性肿瘤之一，若未能及时发现和治疗很容易引起死亡[1]。近年来，有研究认为，长链非编码RNA HOX转录反义RNA(HOTAIR)的表达异常可能会引起乳腺癌的发生与发展[2]。为此，本研究针对HOTAIR在乳腺癌组织中的表达水平及意义进行研究。

1 资料与方法

1.1一般资料 选择2016年5月-2018年5月本院收治的28例乳腺癌患者，均经手术切除后行病理确诊。取其癌组织以及癌旁组织，置于零下80℃中保存。全部患者的样本在术前均未接受放疗以及化疗处理。

1.2方法 采用实时定量PCR的方法测量乳腺癌癌旁组织、癌组织、转移淋巴结中HOTAIR的表达水平，具体如下：从转移性乳腺癌患者手术中获取实体瘤样本，经组织匀浆后提取RNA和蛋白，按照标准的方法将冻存的细胞复苏后，将贴壁培养的MCF-7乳腺癌细胞置于含有胰岛素(40 U/200 ml)、青霉素(100 U/ml)、链霉素(100 U/ml) 和10%小牛血清的RPMI 1640 培养基中，在37℃含5% CO2的环境中培养。细胞初始浓度为1×104/cm2，每2～3 d 更换培养液。RNA提取及定量PCR：用RNA提取试剂盒从保存的备用癌组织中提取总RNA，用反转录试剂盒将提取的总RNA反转录为互补cDNA，反应体系体积为20μl，反应条件：51℃ 2 min，96℃ 10 min预变性，循环40次；96℃10 s变性，60℃持续 30 s退火，以GAPDH作为内参，计算相对mRNA表达水平。

2 结果

癌旁组织中HOTAIR为(0.79±0.14)，转移淋巴结组织中为(1.00±0.13)，癌组织中为(1.04±0.13)。三者HOTAIR比较有统计学意义(F=29.27，P<0.01)，两两比较显示：转移淋巴结及癌组织中HOTAIR的表达水平明显高于癌旁组织(q=8.52,10.03；P<0.05)。

3 讨论

近年来，有研究指出HOTAIR出现了比较高的表达方式时能够对肿瘤转移抑制基因的表达产生非常强的抑制作用，同时还能够帮助增加肿瘤细胞的恶性程度，从而导致肿瘤的形成，加快了肿瘤的发生与发展[3]。有临床资料显示，在针对98例原发性乳腺癌患者进行研究时发现，HOTAIR能够在雌激素受体阳性者中呈现出预测乳腺癌风险转移的独立生物学标志之一[4]。HOTAIR不仅能够在乳腺癌组织中呈现出异常升高的表达水平，同时还能够存在于其他肿瘤组织中，并表现出异常升高的水平，包括了直肠癌、鼻咽癌、肝癌等，另外，HOTAIR的表达水平也与肿瘤的转移、复发以及预后等具有明确的相关性。本研究结果显示，乳腺癌癌组织、转移淋巴结中HOTAIR的表达水平相比无明显差异，但都高于癌旁组织。

总之，HOTAIR的表达水平在乳腺癌癌组织、转移淋巴结中表现出了比较高的水平，体现出了该指标的高表达能够与乳腺癌的增殖、侵袭与转移等密切相关。