胚胎停育绒毛染色体检测及相关治疗研究进展

杨 姝，赵莉萍*

（包头医学院研究生院，包头医学院附属包钢三医院妇产科，内蒙古 包头 014010）

胚胎停育，是妇产科常见的疑难病，其发病主要与遗传、免疫、内分泌等因素相关，但具体的发病机制还不能完全了解，而且治疗效果也不显著，使得胚胎停育成为目前临床上急需解决的难题之一[1]。

遗传因素应该是胚胎停育最主要的病因因素。目前，对基因等微观层面的研究已成为研究胚胎停育病因的热点，这为研究胚胎停育的发病机制提供了新思路，同时也为临床治疗提供了新方向。笔者将列举目前文献报道的几种检测染色体的方法，同时对因遗传因素所导致的胚胎停育的相关治疗进行说明，以期为临床实际工作中阐明胚胎停育相关的遗传机制，降低其发生率，促进妇女生殖健康提供理论依据和指导。

1 概 述

胚胎停育在临床上可以分为两类，一类是受精卵着床后没有发育出胎芽，超声检查孕7周后只可见一空孕囊，另一类是曾有胎芽发育但不久之后胎芽停止发育而死亡，超声结果孕囊中有胎芽但是没有检测出原始心管搏动[2]。

近年来，由于社会、家庭等因素高龄孕妇逐渐增多，胚胎停育的发生率也不断上升，有些患者出现了多次胚胎停育，因此对胚胎停育的病因进行深入的研究，完善各种检测方法有利于进一步阐明胚胎停育的发病机制，从而为临床的诊断和治疗工作奠定一定的基础。

胚胎的绒毛细胞由滋养层细胞以及胚外中胚层细胞组成，它与胎儿组织具有完全一致的遗传性状，通过对胚胎绒毛进行染色体的检测，可以客观地反映出胎儿自身的情况。

2 胚胎停育绒毛染色体检测的几种方法

2.1 细胞培养核型分析技术

对染色体的核型分析是检测绒毛组织染色体异常的首选方法[3]。

陈霞慧等对824例胚胎停育患者绒毛组织的核型分析，结果证实了染色体数目异常是导致胚胎停育染色体异常最主要的原因，而数目异常的原因可能主要是在形成配子或在受精卵形成过程中，某一条染色体没有成功分离，导致了胚胎无法正常发育[5]。

虽然细胞培养核型分析易受到标本污染、培养周期长等的影响，而且它的检测范围也受到限制[4]，但是它依旧是一种值得应用的检测手段。

2.2 荧光原位杂交技术

FISH技术将原位杂交技术与染色体显带技术相结合，利用碱基互补配对原则，在一定条件下用标记探针DNA与目标DNA进行杂交后，在荧光显微镜下对待测DNA进行定性以及定位分析。

FISH省去了细胞培养、染色体制备的时间，可是由于它有限的探针数，不能排除所有可能异常的胚胎染色体非整倍体[5]，而且标记探针的位置受到了限制，在可以明确诊断的异常中，也存在有部分诊断盲区。

2.3 荧光定量PCR技术(QF-PCR)

QF-PCR检测通过扩增短串联的重复序列，对流产标本以及需要产前诊断的标本进行染色体拷贝数异常的诊断[6]。

2.4 多重连接探针扩增技术

先把目的基因复制在依赖探针上，然后将捕获的目的片段用一对通用的引物进行扩增，之后对扩增产物进行毛细管电泳，最后对所获得的目的片段进行分析[3]。

2.5 微阵列技术

以单核苷酸多态性为基础的SNP array以及以比较基因组杂交为基础的array CGH。二者均具有分辨率高、高通量的特点[7]。但它不能对染色体的平衡易位、倒位等作出诊断分析，此外由于它的敏感性高而容易产生过度诊断。

2.6 核型细菌人工染色体标记-微球鉴别/分离法(KLBoBs)

BoBs检测分为Prenatal BoBs和KaryoLite BoBs(KLBoBs)两种，Prenatal BoBs是对染色体非整倍体、9种微缺失进行检测的方法，KL-BoBs可以检测出24条染色体的非整倍体的变化，但是因为探针位置的原因它不能检测出微缺失综合征[8]。

2.7 高通量测序技术

NGS技术能够快速而且准确的检测出染色体异常、全基因组拷贝数变异(copy number variants，CNVs)等情况，它不需要进行细胞培养，也不会受到标本污染等的影响，所以使得检测的结果更加准确和可靠。高通量测序技术目前已经运用到鉴定与不明原因胚胎停育相关的遗传改变中。

绒毛膜绒毛样品的常规核型分析受到细胞培养及其分辨率的限制。Shen等的研究显示，通过阵列CGH和NGS实现了早期自发性流产对CVSs染色体异常的高检测率。具体而言，亚微观重组的检测对于患有复发性流产的夫妇的遗传咨询是重要的。

新兴的高通量测序技术帮助人们进一步揭开了遗传领域的神秘面纱，为之后对微缺失和微重复与致病性的关系研究提供了方法，也为生殖遗传学咨询开辟了新的方向。

3 遗传因素所致胚胎停育相关治疗

在临床上医生通过对胚胎停育患者绒毛组织进行染色体检查和分析，可以帮助此类患者在再次妊娠时进行必要的产前诊断以及遗传咨询，尽可能避免有染色体异常的患儿出生。通过大力开展这项工作，可以避免不必要的保胎、避免畸形儿的出生，并且对更好地普及优生优育也有重要作用。

对于胚胎停育的患者，核型分析应该至少进行一次，因为异常的胚胎核型倾向于重复自身，也是预后良好的预测因子。了解胚胎停育的病因可以澄清复发风险，并有助于确定未来计划生育的适当管理。

据报道，孕前遗传学筛查，包括了虽然没有临床症状但是对某种疾病患病风险增高的携带者的相关检查，以及对可能把某一种临床已知的遗传性疾病的突变传递给了胎儿的女性进行相关检查。但是孕前检查并不能决定胎儿去留，还必须对患者进行一些有创检测，如果发现胎儿确实受累才可以选择终止妊娠。

4 预 防

孕前保健和孕前咨询在女性顺利妊娠方面起到了非常重要的作用，通过了解和改变备孕女性的不良生活方式和不正确的行为习惯来干预这些不良医学状况，然后可以有效地降低相关围生期疾病以及高危妊娠的发生率和孕妇的死亡率。

王晓霜等通过对大样本孕前保健检查结果以及妊娠结局的分析，总结得出了孕前保健检查可以为优生遗传咨询提供客观数据，对备孕育龄女性作出科学的健康指导，提升妊娠期安全以及母婴妊娠结局的质量，因此孕前保健检查对优生优育有重要意义。侯大乔等研究显示浓茶、咖啡、被动吸烟等因素都是导致胚胎停育的相关危险因素；而良好的性格、心情愉悦等也是避免胚胎停育的保护因素。

综上所述，胚胎停育已经受到国内外学者的广泛关注，多种检测方法用于研究胚胎停育染色体相关问题，其中高通量测序技术作为新兴技术可以用作绒毛组织染色体异常检测的首选方法。在防治工作上应大力开展遗传咨询和产前诊断，而孕前检查、孕期产检也是必不可少的。此外，对于胚胎停育患者临床心理干预措施能明显改善其心身健康，缓解不良情绪反应，提高患者的治愈率。