酶标仪检测技术应用的研究进展

杨敬金 天津市静海区疾病预防控制中心 （天津 301600）

内容提要： 酶标仪诞生于上个世纪五十年代，基于其良好的检测性能快速被应用于各个行业，其中在生物医药检测方面得到了广泛应用。酶标仪检测基本原理以及主要构造与分光光度计或者变相光电比色计类似，具有较高的检测精度，同时能够对批量待测样品进行检测，大大提高了检测工作效率。因此酶标仪检测技术受到了人们越来越多的关注，近些年很多专家学者在将其应用于各个领域的检测中，取得了较为理想的检测的效果。本文对近些年关于酶标仪检测技术应用的研究进展进行综述，以期为实际工作中酶标仪的应用提供借鉴。

酶标仪的运行原理以及主要构造与分光光度计或者变相光电比色计类似，光源发的光线经过单色器或者滤光片后变成单色光，通过微孔板照射到待测标本上，部分光线被待测标本吸收，其他光线照射到光电检测器上，基于透光信号不同的强度转换成不同的电信号[1-2]。由电脑对电信号进行处理分析，通过显示器输出计算结果。传统酶标仪检测微孔板主要采用手工移动的方式，随着技术的不断发展，目前酶标仪可以在电脑的控制下实现自动检测，微孔板X方向和Y方向的移动完全由电路控制机械驱动实现，大大提高了酶标仪的自动化程度[3]。

1.酶标仪比色法在血清三酰甘油和总胆固醇检测中的应用

血清三酰甘油和总胆固醇检测方法整体上可以分为色谱法、化学法和酶法。化学法相对来说技术含量高，但是由于操作复杂繁琐，对仪器要求高，难以广泛推广应用[4]。色谱法在参考物质准确制备方面具有很高的应用价值，但是由于样品处理复杂且费用昂贵，限制了其进一步普及[5]。目前基本上所有的血清三酰甘油和总胆固醇检测均采用酶法，其优点在于简单方便、具有高准确度和强特异性。酶标仪比色法检测又可以细分为手工法、半自动法以及全自动法，相对来说手工检测需要大量的试剂，检测成本较高；半自动法和自动法对仪器要求较高，基层医院无法普及[6]。相关研究表明酶标仪比色法检测血清三酰甘油和总胆固醇的精度与全自动生化分析仪检测精度基本一致，均在CLIA'88推荐允许范围之内[7]。

2.酶标仪在细菌溶液浓度检测中的应用

细菌溶液浓度的检测对于微生物发酵过程中控制工艺具有重要作用。传统的细菌溶液浓度检测方法比如比浊法、血球计数板法以及平板计数法等工作量重，且误差精度较低，难以达到实时检测的要求[8]。分光光度法检测细菌溶液浓度具有操作简单方便、精度高等特点，目前在实际工作中得到了普遍应用，但是该方法也存在操作繁琐，耗时长等问题[9]。酶标仪检测细菌溶液浓度的原理与分光光度法基本一致，同样具有检测操作简单方便、精度高的优点，同时该方法可以批量操作，大大提高了检测效率。相关研究分析了大肠杆菌发酵过程中酶标仪和分光光度法检测菌液浓度的效果，结果显示两种方法具有同样的检测精度，但是酶标仪方法可以一次处理多个样本，有效降低了工作量，提高了工作效率[10]。

3.酶标仪在食用菌多糖含量检测中的应用

目前行业内关于食用菌中多糖含量的测量主要采用分光光度计，该方法具有较高的精度。酶标仪检测食用菌多糖含量的原理与分光光度计基本一致，具有同样高的精度，同时具有更好的线性范围和稳定性[11]。除此之外，相比分光光度计方法，酶标仪检测方法操作更加简单方便，有效降低了繁琐的比色皿更换和清洗工作[12]。一般来说酶标仪检测可以在1min内检测十个待测样品，因此比分光光度计检测具有更高的效率。

4.酶标仪三波长比色法在大豆总皂甙检测中的应用

利用水饱和正丁醇对豆粕的乙醇提取物进行萃取纯化，获得大豆总皂甙，然后对大豆总皂甙采用香草醛－高氯酸体系进行显色，再利用酶标仪三波长比色法对吸光值进行测量和校正，进而形成了酶标仪三波长比色法大豆总皂甙检测方法[13]。采用酶标仪三波长比色法在大豆总皂甙检测方法可以有效克服皂甙显色反应不稳定以及OD值随时间降低的问题，消除干扰物质以及本底漂移对测量结果的影响，有效提高了测量精度。

5.酶联免疫吸附法在梅毒检验中的应用

酶联免疫吸附法目前已经在梅毒检验中开始推广应用，并取得了较好的效果。梁服泉等选取500例梅毒标本作为研究对象，分别采用酶联免疫吸附法和甲苯胺红不加热血清试验进行检测，结果显示酶联免疫吸附法检测阳性率要明显高于甲苯胺红不加热血清试验，差异具有统计学意义（P＜0.05），同时酶联免疫吸附法检测结果的敏感性、特异性、阴性预测值以及阳性预测值均明显高于甲苯胺红不加热血清试验，差异具有统计学意义（P＜0.05）[14]。此外，酶联免疫吸附法在梅毒检验中适用于对大样本数据的筛查。

6.酶联免疫吸附试验在丙型肝炎病毒抗体检测中的应用

目前我国抗丙型肝炎病毒检测试剂主要采用酶联免疫吸附试验试剂盒，试剂盒的质量直接影响丙型肝炎病毒的检出率以及输血安全。随着酶联免疫吸附试验试剂盒的不断发展，目前应用的第三代产品具有较高的检测灵敏度和特异性。相关研究表明酶联免疫吸附试验在丙型肝炎病毒抗体检测中的阳性检出率要明显优于胶体金快速吸附法[15]。

7.结束语

基于以上分析，酶标仪目前已经被广泛应用于血清三酰甘油和总胆固醇、细菌溶液浓度、食用菌多糖含量、大豆总皂甙、梅毒以及丙型肝炎病毒抗体检测中，具有良好的应用效果。相信随着技术的不断发展，酶标仪将会在更多领域检测中发挥重要作用。