细菌检验中PCR检验法的应用价值分析

史 业 成

(尉氏县人民医院检验科 开封 475500)

阴道细菌感染是致阴道炎的常见诱发因素，病情呈进行性发展，甚至会致盆腔感染及腹部感染，使患者出现异位妊娠，或失去生育能力[1]。在阴道炎治疗中，应先了解阴道内细菌感染情况及感染程度，采取针对性治疗方案。另外由于抗菌药物广泛应用，抗菌耐药性不断增强，用药效果欠佳。因此需先了解阴道炎细菌感染状况，细菌培养法是既往检测细菌常用手法。随着医疗技术的不断进步，PCR检验法得到应用日渐广泛，并取得较高检测准确性[2]。笔者就以我院收治的75例阴道炎患者为例，对其分别采取细节培养及PCR检验法行细菌检验，分析其检验结果，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

随机抽取我院在2017年1月～2018年7月期间行细菌检验的阴道炎患者75例，患者知情本次研究，签署同意书。患者均为育龄期女性，精神正常；患者因阴道炎、阴道瘙痒、阴道异味及白带分泌物增加等表现而就诊；患者近2d内未有过性生活；近期阴道未用药。患者年龄20～56岁，平均年龄(36.84±6.82)岁，病程3个月～4年，平均病程(11.36±3.48)个月。

1.2 检验方法

75例阴道炎患者先采集阴道分泌物，取无菌棉签轻轻插入阴道穹隆部位，轻柔旋转，蘸取阴道分泌物，并放置2mL无菌生理盐水保存。

细菌培养：将阴道分泌物置于阴道琼脂培养基接种，在37℃恒温箱中孵育培养48h，至培养基出现菌落后，选择半菌落光滑、灰色透明样、类似露滴状的菌群，生化鉴定。

PCR法检验：先对标本离心15min，12000r/min，丢弃上清液，取碱性裂解液，添加至标本的下层沉淀中。将离心后标本放置60℃水浴中进行加热，时间15min，待充分裂解后，再次进行离心，10min；取上清液作DNA模板，PCR扩增为空白对照，取缓冲液、双蒸馏水、引物、模板，依次加入对照品，随后以PCR仪进行检验。

1.3 观察指标

按照《微生物检验操作规程》行细菌检验，观察细菌培养法及PCR检验对细菌阳性检出率，对比两种检验方法对肠球菌、戛纳杆菌及棒状杆菌检出率。

1.4 统计学分析

采取SPSS20.0统计学软件处理本次研究内相关数据，对等级资料(%)采取秩和检验。P<0.05时，代表差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 两种方法细菌检验阳性率比较

PCR检验法对细菌检验阳性率89.33%，高于细菌培养法的61.33%，差异具有统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1 两种方法对细菌检验阳性率比较[例(%)]

组别阳性率阴性率观察组(n=75)67(89.33%)8(10.67%)对照组(n=75)46(61.33%)19(38.67%)Z7.4277.427P0.0060.006

2.2 两种方法不同致病菌检出率比较

PCR检验法对肠球菌、戛纳杆菌及棒状杆菌检出率分别为20%、34.67%、32%，均高于细菌培养法的12%、28%、21.33%，差异具有统计学意义(P<0.05)，见表2。

表2 两种方法不同致病菌检出率比较[例(%)]

组别肠球菌戛纳杆菌棒状杆菌观察组(n=75)16(20%)27(34.67%)24(32%)对照组(n=75)9(12%)21(28%)16(21.33%)Z4.4914.1035.197P0.0140.0290.013

3 讨论

对阴道炎细菌检验时，多采取阴道分泌物检查，可直接观察阴道炎性感染程度，确定阴道内细菌分布情况[3]，细菌检验具较高的准确性，能准确反映疾病状况。因女性阴道内有大量上皮细胞、阴道杆菌、革兰阳性球菌等多种菌群，而阴道内菌群失调，阴道防御能力降低，细菌侵入性增加，使大量益生菌死亡，影响上皮细胞代谢功能，使阴道内酸碱水平紊乱，致阴道炎发生[4～5]。为此，进一步肯定了细菌检验对阴道炎的判断有积极作用。

细菌培养法是临床病原菌检验的常用方法，具较高的细菌检出率，但细菌培养法操作复杂，检验过程较为繁琐，对实验室环境要求较高，需耗费较长的检验时间，临床应用受到一定限制[6]。

PCR检验法为分子生物学检测范畴，操作简单方便，具较高的诊断灵敏度，其检验灵敏度高达90%；另外PCR检验法结合PCR高敏感性及DNA杂交特点，属于荧光定量检测，无需耗费太长的检验时间，对检验环境无较大要求，更适用于在基层医院的广泛开展[7～8]。本次研究中，PCR检验法对细菌检验阳性率89.33%高于细菌培养法61.33%，对不同致病菌阳检出率也高于细菌培养法，差异具有统计学意义(P<0.05)。因此，与细菌培养法相比，PCR检验法的应用，操作简单，具较高灵敏度及准确性，更利于细菌检验。

在PCR检验法过程中应注意：(1)在采集阴道分泌物时，应避免阴道分泌物被尿液或其他体液干扰，以免影响检验结果；(2)提高检验医生的采集、检验水平，严格控制标本的采集、检验，确保标本的检验质量及检验的准确性。

鉴于此，在细菌检验中，较细菌培养法相比，PCR检验法具有较高的细菌检出率，检验结果准确，操作简单，更具应用效果，值得临床推广应用，并适用于基层医院的开展。