3种软枣猕猴桃的离体快繁技术

韩德伟，关丽霞

（辽宁农业职业技术学院，辽宁营口 115009）

软枣猕猴桃（Kiwi berry），别名：奇异莓、软枣子、圆枣子，是猕猴桃科猕猴桃属多年生木质藤本植物，有“水果之王”的美称，主要分布在我国的华北、西北、东北及长江流域，其它国家也有分布。其中，我国东北南部山区较多见，是珍贵的抗寒果树资源，也是当今世界新兴小浆果类树种之一。目前，丹东地区野生资源最为丰富。软枣猕猴桃果实翠绿无毛，细嫩多汁，酸甜可口，风味独特，营养丰富。软枣猕猴桃享有“水果之王，维C之冠”的美誉。软枣猕猴桃不仅抗病虫害，而且维生素C含量极高，果实无污染、口感好，全株根、茎、叶、果实均可入药。因此，市场对软枣猕猴桃需求量不断增加，但软枣猕猴桃种质资源缺乏，采用播种方式有性繁殖难以区分雌雄株，通过嫁接、扦插等常规无性繁殖方式，繁殖系数低、周期长、繁殖困难，且品种间差异显著，故而影响了优良软枣猕猴桃品种的大面积推广。为了快速满足市场需要，及时提供大量整齐一致、优良的种苗，本文对3种市场深受欢迎的软枣猕猴桃进行了深入的离体快繁技术研究。

1 材料与方法

1.1 试验材料

供试材料为桓优1号、龙成2号、魁绿。上述材料均取自辽宁营口盖洲惠顺果蔬合作社春季当年生枝条。

1.2 试验方法

在春季温室内软枣猕猴桃萌动20d后，剪取直径0.5cm左右、无病虫害、健壮、未木质化的枝条。剪去枝上叶片，留下0.3cm长的叶柄，切割为4～6cm左右长的茎梢，然后置于流水下冲洗0.5～1h，再在无菌操作工作台上，用70%乙醇溶液消毒30s，2.0%NaClO浸泡消毒8～10min，最后用无菌水冲洗3次，沥干水分备用。

1.2.1 初代诱导培养。将备用材料，剪切成1.5～2.5cm长、带1～2节的茎段，接种于初代诱导培养基中，诱导培养基设3个处理：①MS+BA 0.7mg/L+NAA 0.1mg/L（附加蔗糖 30g/L、琼脂 7g/L，pH 值 5.8～6.0，下同），②MS+BA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L，③MS+BA1.5mg/L+NAA 0.1mg/L。3个品种3种培养基各接种30瓶，重复2次。培养条件：温度 18～21℃、光照强度 1800～2300Lx、光照14h/d。

1.2.2 继代增殖培养。将外植体诱导出的腋芽，切割成含1～2节的茎段或茎尖，接种于继代增殖培养基上进行增殖培养。增殖培养基同样设3个处理：①MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.05 mg/L，②MS+6-BA 0.7mg/L+NAA 0.05mg/L，③MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.05mg/L，3个品种3种培养基各接种30瓶，重复2次。培养条件同上。

1.2.3 试管生根及移栽驯化。将要进行生根培养的增殖苗，剪切成高3cm以上的单苗，接种到生根培养基1/2 MS+IBA 0.1mg/L+NAA 0.05mg/L中进行生根培养。培养条件同上：温度18～21℃，光照强度20000～30000 Lx、光照14h/d。生根培养15d后，将根长0.5cm以上的试管苗进行驯化移栽和养护管理。

2 结果与分析

2.1 3种软枣猕猴桃的初代诱导

3种软枣猕猴桃的外植体在初代诱导培养基上培养，7d后，陆续可见茎段叶腋处有芽萌出，随着时间延长，芽逐渐长大，28d后长成5cm高以上新梢。在诱导培养基①MS+BA 0.7mg/L+NA 0.1mg/L上，3个品种软枣猕猴桃均可萌出1～4个不等新梢，在相同培养条件下，新梢生长时间长，生长速度相对较慢；在诱导培养基②MS+BA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L上，3个品种软枣猕猴桃均可萌出3～6个不等新梢，在相同培养条件下，新梢生长时间较短，生长速度相对较快；在诱导培养基MS+BA 1.5mg/L+NAA 0.1mg/L上，3个品种软枣猕猴桃均可萌出4～8个不等新梢，在相同培养条件下，新梢生长时间最长，生长速度相对最慢，且均伴有玻璃化苗产生。但3个品种软枣猕猴桃在相同的初代诱导培养基中差异不明显。所以，MS+BA 1.0 mg/L+NAA 0.1mg/L是3种软枣猕猴桃诱导的最佳培养基。

2.2 3种软枣猕猴桃的增殖培养

转接到增殖培养基中培养的增殖苗，12d后，在基部或叶腋处分化出新的芽苗，随着时间延长，芽苗逐渐长大，30d左右统计各个品种在各培养基上的增殖情况，从而发现桓优1号、魁绿2个品种在增殖培养基MS+6-BA 0.7mg/L+NAA 0.05mg/L上增殖效果最好，增殖系数可达8以上；龙成2号在增殖培养基MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.05mg/L上增殖效果最好，增殖系数在7以上。

2.3 3种软枣猕猴桃的生根培养及驯化移栽

增殖苗转接到生根培养基中培养，7d后，苗基部形成根原基，15d左右，长成具有2～3条、0.5cm长的根，从而形成完整植株。3种软枣猕猴桃试管苗瓶内生根率可达98%以上。此时，将有根试管苗移至温室，上覆遮阳网，闭瓶炼苗3d，然后再开瓶炼苗3d,最后开盖取苗，洗去苗基部培养基，移栽到灭菌过的河沙、中草炭（2∶1）的混合基质中。栽后前期，上边要搭小拱棚，栽培管理条件：空气湿度80%以上，温度20～25℃，光强5000Lx以下。1个月后，有新叶长出，代表成活，成活率在90%以上。

3 小结与讨论

软枣称猴桃果实清香适口、营养丰富、维生素含量较高，同时是制作饮料和食品的美味原料。为满足市场对软枣猕猴桃种苗的需求，选育出了产量高、果实大、品质好的优良单株。为达到短期、规模化增殖，对3个品种的优良单株进行了离体快繁的研究，结果表明：3种软枣猕猴桃的初代诱导最佳培养基为MS+BA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L；桓优1号、魁绿2个品种的最适宜增殖培养基为MS+6-BA 0.7mg/L+NAA 0.05mg/L，龙成2号的最适宜增殖培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+NAA0.05mg/L；3种软枣猕猴桃在培养基1/2 MS+IBA 0.1mg/L+NAA 0.05mg/L中生根率达90%以上。