幽门螺杆菌感染与人胃黏膜组织miRNA584 和miRNA1290表达相关性分析

2018-12-27 01:51任于晗王亚娟王金钢
浙江中西医结合杂志 2018年12期
关键词:化生幽门试剂

叶 彬 任于晗 王亚娟 俞 珊 王金钢 郭 妮

作者单位:浙江省嵊州市人民医院(浙江大学附属一院嵊州分院)消化内科(嵊州312400)

幽门螺杆菌(helieobacter pylori,Hp)感染被认为与慢性胃炎、胃黏膜肠化生、胃癌等疾病的发生密切相关,Hp 感染增加了胃黏膜肠化生、胃癌发生的几率[1-2]。miRNAs(microRNA,微小RNA)是一类在转录后水平调控基因表达的小的内源性非编码RNA分子,其在癌症的发生发展中可能发挥重要功能[3-4]。研究表明,miRNA584 和miRNA1290 是胃黏膜发生肠化生机制中的一个重要通路[5-9]。本研究观察Hp 感染与人胃黏膜组织miRNA584 和miRNA1290 表达情况,探究Hp 感染与miRNA584 和miRNA1290 表达的相关性。

1 材料与方法

1.1 临床资料 选取2013 年6 月—2014 年12 月在嵊州市人民医院行胃镜检查的慢性胃炎患者80例,其中男性46 例,女性34 例。平均年龄(52.37±11.47)岁。所有患者均进行14C-尿素呼气试验检查,检查结果Hp 阳性患者40 例,Hp 阴性患者40 例。胃镜检查分别于胃体中部大弯、小弯侧及胃窦距幽门3cm 大弯、小弯侧各活检1 块组织行光镜检查,所有活检组织必须为黏膜全层,包括黏膜肌层。

1.2 试 剂 单克隆抗体购自Santa Cruz 公司,二甲苯等试剂购自华东试剂公司,醋酸酐等试剂购自武汉博士德公司,三乙醇胺等试剂购自上海化学试剂公司,预杂交液及杂交液购自丹麦Exiqon 公司。

1.3 原位杂交方法 对收集的四块胃黏膜组织石蜡标本,依照脱蜡、水化、染色、水洗残液、脱水、封片等流程进行原位杂交,miRNA584 和miRNA1290 以细胞质中出现明显的蓝色颗粒为阳性染色,采用半定量积分法[10]判断结果。染色强度分级:1 分,无染色或弱染色;2 分,中等强度染色;3 分,强染色。阳性细胞数分级:1 分,阳性表达率<10%;2 分,阳性表达率10%~50%;3 分,阳性表达率>50%。以上两项分数相乘,得分0~3 分者为低表达,>3 分为高表达。

1.4 统计学方法 应用SPSS17.0 统计软件进行数据处理,计数资料比较采用χ2检验。P<0.05 为差异有统计学意义。

2 结 果

检测样本中miRNA584 和miRNA1290 的阳性染色主要出现在胞质中,胞膜和胞核无表达。Hp 阳性患者胃黏膜组织miRNA584 无染色或弱染色14例,中等强度染色17 例,强染色9 例;miRNA1290 无染色或弱染色16 例,中等强度染色13 例,强染色11例。Hp 阴性患者胃黏膜组织miRNA584 无染色或弱染色23 例,中等强度染色13 例,强染色4 例;miRNA1290 无染色或弱染色27 例,中等强度染色7 例,强染色6 例。与Hp 阴性患者胃黏膜组织比较,Hp 阳性患者胃黏膜组织miRNA584 和miRNA1290 表达均增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 Hp 感染与胃黏膜组织miRNA584、miRNA1290 表达[例(%)]

3 讨 论

Hp 在胃黏膜肠化及胃癌发生发展中起重要的作用,Hp 感染增加了胃癌的发生风险[1-2],已经被WHO 正式列为Ⅰ类致癌因子。

研究表明,miRNAs 在胃癌的发生、发展以及转移的过程中起到了重要的作用[11-12],在萎缩性胃炎及胃黏膜肠化生等胃癌前状态中,存在大量表达异常的miRNAs[13-14]。研究表明,miRNA584 和miRNA 1290 在体外培养的胃黏膜上皮细胞感染Hp 后发生肠化生改变中起到重要的作用,在Hp 毒力因子CagA 作用下miRNA584 和miRNA1290 表达升高,促进了肠化生的发生,其中miRNA584 通过Erk1/2 途径上调,miRNA1290 通过NF-κB 通路激活,miRNA584 和miRNA1290 的共同靶基因是Foxa1,该实验表明,miRNA584 和miRNA1290 是CagA 诱导胃黏膜肠化生机制中的一个重要通路[10]。体外实验表明,miRNA1290 在胃癌细胞表达升高,而使用miRNA1290 抑制物后,胃癌细胞的增殖也受到抑制[15]。

本研究发现,与Hp 阴性患者比较,Hp 阳性患者胃黏膜组织miRNA584 和miRNA1290 表达均增加,提示Hp 感染可能导致miRNA584 和miRNA1290 表达上调。根据已有研究,我们推测miRNA584 和miRNA1290 可能在Hp 诱导胃黏膜细胞肠化生中起重要作用,但具体机制需要进一步深入研究。

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