试论体外诊断试剂的稳定性测试

云南省医疗器械检验研究院 云南昆明 650000

在体外诊断试剂的使用当中，试剂的稳定性是非常重要的，也是试剂能够投入使用的重要衡量标准。在医学试剂稳定性测试研究当中，有关于体外诊断试剂的实验测试是比较少的，研究成果屈指可数。在进行体外诊断试剂稳定性测试时可以借鉴的资料也比较少，加强对体外诊断试剂稳定性测试的研究，对提高体外诊断试剂稳定性判别有重要的作用，因而需要对体外诊断试剂稳定性测试的要点进行重点分析。

1 一般资料

1.1 稳定性测试试剂的选择

根据体外诊断试剂的主要特点和稳定性测试研究项目的要求，稳定性测试试剂的选择要保证稳定性测试能够有序的操作，稳定性指标的测量数据变化明显。简单的来说就是要根据稳定性测试的内容，来决定选用同一批次还是不同批次的体外诊断试剂。根据《新生物制品审评办法》当中的规定，设立三组成品稳定性研究测试，（1）长期稳定性研究，选用连续3个批次的体外诊断试剂。（2）使用期间稳定性研究，采用同一批次产品。（3）模拟运输稳定性研究，使用同一批次试剂[1]。

1.2 体外诊断试剂稳定性测试的主要内容

（1）度量指标。度量指标就是指通过对试剂的某一特性或含量值的测量，就可以直接得出试剂稳定性效果，对度量指标的测试是在试剂规定的使用期限内进行的。不同的试剂拥有的特性都是有差异的，因而只要掌握每种试剂的主要特征，就可以通过测量其中一项指标明确试剂的稳定性是否良好。对于体外诊断试剂，度量指标是测量漂移。

（2）置信度。对医学试剂的置信度进行测量，可以对试剂在储存或使用期间的变化进行掌握，从而对试剂的稳定性进行判定。对于体外诊断试剂稳定性测试，一般是选用95%以上的置信区间进行测量，置信区间的百分比选择要根据测试的具体情况而设定，95%是最低百分比值，先要提高测量的精准度，可以适量提高测量置信区间的百分比，如97%或99%都可以[2]。

（3）可接受标准。可接受标准是借鉴与测试试剂有相同之处的试剂稳定性测试的数据，还有测量试剂所标注的一些信息。通过对这些信息的分析，可以对试剂的基本性能有大概的了解，在结合其它的测试数据，综合分析就可以得出试剂稳定性测试的结果。

（4）稳定性研究的种类。

第一种是保存期稳定性的研究，是对体外诊断试剂在储存阶段的一些表征进行测量，体外诊断试剂的储存是有相应的规定的，在这种特定的保存条件下，通过稳定性的测试可以明确测量试剂能够保存的最长期限。

第二种是使用期稳定性研究，就是对体外诊断试剂已经投入使用后，试剂活性能够保持期限的研究，在进行使用期稳定性研究时，可以对同一生产批次，同一型号的试剂进行统一的测试，它们的使用期稳定性都是相对保持一致的。

第三种是运输模拟研究，体外诊断试剂在进行运输的过程中会受到运输方式和运输环境等因素的影响，这些因素影响的作用下，就有可能会引起试剂的变化，因而运输模拟研究方式就是对体外诊断试剂的常用的运输形式进行模拟[3]。对运输过程中试剂产生的变化进行观察和分析，根据研究结果可以对体外诊断试剂的运输方式进行优化。

2 方法

2.1 体外诊断试剂稳定性测试研究设计

本文采用的是稳定性测试研究的经典设计类型，并且使用度量指标：测量漂移作为稳定性性能测试指标。首先，要将要测试的体外诊断试剂样品先放在特定的测试保存环境当中，然后在依次进行各组的实验，得到稳定性测试的结果。经典设计可以在稳定性测试期间的任意时间节点，将待测的体外诊断试剂拿出，进行测试时都可以得到准确的数据结果，在待测期间体外诊断试剂不会受到外界因素的影响，但是在进行测试实验的过程中容易受到一些因素的影响，包括仪器、环境等。

在设计阶段要将稳定性测试需要的三组产品按照批次进行分类保存，要求每一批次的体外诊断试剂都要多准备10%-20%的量，作为实验测试的备用[4]。然后对测试设备进行准备，检查各个设备操作、运行状态是否正常，保证测量精准度。同时实验操作者要研读体外诊断试剂指导原则，保证稳定性测试操作的规范性。最后，根据实验的情况，提前将数据收集方法确定，并做好对失控数据处理的准备。

2.2 体外诊断试剂稳定性测试操作

首先，将三组稳定性测试项目进行分别储存，在一天中从三组实验产品当中，随机挑选几个产品，对每组实验样品当中的被测量漂移进行测量，将测量数据进行记录，根据实验设计每隔一段时间进行重复测量，并将数据进行记录。其次，每天都要采取随机的形式更换产品测试，再进行被测量漂移的数据测量和记录。

最后，实验结束后将实验期间每天的数据测量结果进行对比，要求将三组进行分别的对比，将每组的测试数据进行整理，将对比或存在异常的数据进行标注。另外，经典设计方式在测量期间产品测量值可能会受到外界因素的影响，在试验期间对影响因素进行控制，如果产品受到影响要明确其影响原因，然后针对其原因进行调整，重新选择产品进行测量，作为当天的被测量漂移变化数据。

3 评价指标

3.1 数据分析

绘制一个以观察的分析物平均值（Y轴）对时间（X轴）的线性回归方程。大多数产品在他们的保存期只有轻微的降解（≤10），因此经常采用线性模型，如果图形接近非线性，考虑使用转换公式或非线性模型[5]。

3.2 统计学方法

如果回归图的斜率在统计学上无显著性（P≥0.05），样本的稳定区间测试时间点的最大值。如果回归图的斜率在统计学上有显著性（P＜0.05），通过测量样本被测量漂移得出的稳定区间可认为是可接受标准和线性回归一侧与置信区间相交的区间，这可以由统计软件生成置信区间的线性回归图确定。第二种方法是，置信区间值以由研究期间内的相应的时间点的值估计出的值计算出，然后绘图，得出与可接受标准相交的区间。

4 结果

针对第一组长期稳定性研究，选用连续3个批次的体外诊断试剂，稳定性测试研究时间为400天，本实验每日重复观测数据的次数为5次，对每天提取的不同产品的数据，利用统计学方式进行计算，所有样本以分析结果平均值(Y轴)对测试日期(X轴)做标准线性回归分析，观察t统计的斜率可以看出，测试产品在特定环境当中储存阶段，相对稳定的区间保持的时间为400天，因而实验选择该批次试剂的长期储存保质期在400天之内[6]。

针对第二组使用期间稳定性研究，采用同一批次产品稳定性研究的时间为400天，将同一批次的产品进行使用，对使用期间的产品变化数据进行统计分析，由回归拟合的统计量确定（斜率，Y截距）为：（允许漂移上限-Y截距）/斜率=稳定性估计值[7]将数据套用在上述公式当中，得到的数据结果为450天，第二组研究的目的是确定体外诊断试剂在投入使用时的稳定性区间，在计算的过程中，没有对置信区间进行计算。

针对第三组模拟运输稳定性研究，使用同一批次试剂，使模拟不同运输方式来观察产品稳定性变化，对各种运输方式情况进行分析，发现影响产品稳定性的因素主要有温度、湿度、光照强度和震动强度等，在进行运输时将这些影响因素进行控制，可以延长体外诊断试剂的稳定性。

5 讨论

体外诊断试剂的稳定性性能与体外诊断试剂的质量是成正比的，稳定性越高，质量越好，在进行医疗使用时，才能得出更加准确的诊断结果。体外诊断试剂稳定性的变化就会导致体外诊断试剂的质量变化，例如血型反定型用红细胞，由于稳定性不仅影响红细胞表面抗原的抗原性，而且可能影响其抗原表型[8]。

对体外诊断试剂的储存阶段、使用阶段、运输阶段进行科学的稳定性测试，可以及时掌握体外诊断试剂的稳定性能和影响因素，提前做好应对措施，保证体外诊断试剂使用的效果和质量。但是，目前有关于体外诊断试剂稳定性测试的研究，不光是可参考的资料比较少，在进行试验的过程中也是存在很多问题的，包括研究内容的不完整、研究项目和指标设置不符合研究需要、研究的时间过短、研究结果表述不清晰等。

通过本文对体外诊断试剂的稳定性测试的论述，可以发现如果按照相关的规范进行产品的储存，产品的稳定性是比较好的，在产品使用期间如果使用置信区间，就可以得到更加保守的稳定性评估区间。而针对体外诊断试剂的运输稳定性来说，只要合理的控制影响稳定性的因素，就能避免运输期间产品稳定性下降。