DPS分析厚朴酚类提取物对四种植物病原真菌的抑制效果

于洋 李梦婷 苏耀华

摘  要：为了解厚朴提取物对4种病原真菌的抑制作用，本研究采用生长速率法测定了厚朴提取物对葡萄座腔菌（Botryosphaeria berengeriana）、细交链孢菌（Alternaria alternate）、污斑拟盘多毛孢菌（Pestalotiopsis foedans）、香蕉褐缘灰病菌（Pseudocercospora musae）的抑制作用并利用数据处理软件DPS分析了相关数据，结果表明厚朴乙醇提取物对4种病原真菌都有一定程度的抑制，其中对污斑拟盘多毛孢菌（Pestalotiopsis foedans）的抑制作用最好，EC50值为0.0000069mg/mL，其次为细交链孢菌（Alternaria alternate）、葡萄座腔菌（Botryosphaeria berengeriana），EC50值分别为0.0009、0.0208，抑制效果最差的为香蕉褐缘灰病菌（Pseudocercospora musae），EC50值为0.1327 mg/mL;另外比较不同真菌毒力方程斜率，发现香蕉褐缘灰病菌（Pseudocercospora musae）、葡萄座腔菌（Botryosphaeria berengeriana）对厚朴提取物敏感性较好，污斑拟盘多毛孢菌（Pestalotiopsis foedans）、细交链孢菌（Alternaria alternate）敏感性较差。

关键词： 厚朴;抑制作用;DPS;敏感性

中图分类号：Q939.95                                        文献标识码：A                                  DOI：10.11974/nyyjs.20181032016

厚朴属于木兰科的一种乔木，主要分布地是在陕西、甘肃、四川、贵州等，生在大山跟路边的杂草丛中，厚朴全身都是宝，全身每个部位几乎都可以入药[1-3]。厚朴中的活性成分丰富多样，厚朴中含酚类、生物碱类和挥发油类等成分，厚朴酚是其主要活性成分[4]。现在人们对厚朴的研究不断深入，发现了很多有用的成分，厚朴中活性物质的提取研究非常之多[5，6]，可以为厚朴活性物质的不断发掘充分充分利用给予帮助。

DPS数据处理系统是由我国独立开发的集数据处理，制表绘图等多种功能的数据处理系统。常用的数据处理软件有EXCEL、SPSS等，这些处理软件只具有基础的分析功能，SPSS进行方差分析时，得出的结果不够直观，另外有好多英文版本，使用时多有不便，而DPS很好的克服了这些问题，既能够处理基础数据，又能进行专业的分析，得出的结果让人一目了然。DPS被很多科研工作者所喜爱，如孟艺玮等[7]采用DPS分析玉米秸秆的传热系数，徐伟等[8]利用DPS完美的实现了对隔异常值数据的检测。

目前，植物病害的预防大部分还得靠化学药物[9]。然而，长期大量施用化学农药导致农药残留及环境污染，危害人类健康并破坏生态平衡，同时也使病原菌产生了严重的抗药性。因此，探寻其他环保、环境友好型防治方法已刻不容缓，还有待加大植物性抗菌活性物质的基础研究，以便于能够研发更多具有植物性杀菌剂的品种。鉴于此，本试验对厚朴植物进行提取，测定厚朴活性成分对不同真菌的抑菌活性，并用DPS分析了相关数据，旨为开发针对植物有害真菌的植物源农药提供科学依据。

1      材料与方法

1.1     材料

供试病原菌：葡萄座腔菌（Botryosphaeria berenger-iana）、细交链孢菌（Alternaria alternate）、污斑拟盘多毛孢菌（Pestalotiopsis foedans）、香蕉褐缘灰病菌（Pseudocercospora musae）。

1.2     方法

1.2.1     抑菌活性成分的提取

采用高雯等[10]厚朴酚类的提取方法浓缩后获得浓度为1g/mL的母液，再将母液稀释为5种不同浓度梯度，分别为0.05、0.1、0.2、0.4、0.8 g/mL。

1.2.2     抑菌活性测定

在這里测定厚朴乙醇提取物对4种病原真菌的抑菌活性使用了生长速率法[11]。

1.2.3     数据处理与分析

通过DPS 7.05进行统计分析并求得毒力回归方程及EC50。

以葡萄座腔菌（Botryosphaeria berengeriana）数据为例对软件进行操作，将数据按照图1方式输入DPS中，对数据进行选定，然后按照流程进行操作，选择专业统计→生物测定→数量型数据机值分析，即可得到图2所示结果，关闭图形可得到EC50数值。

2     结果与分析

从图3和表1可以看出厚朴乙醇提取物对4种植物病原真菌都有一定的抑制作用，随着浓度的增加对4种病原真菌的抑制作用也在增强。其中对污斑拟盘多毛孢菌（Pestalotiopsis foedans）的抑制作用最好，在5种浓度下其抑菌率都在90%以上，EC50值为0.0000069mg/mL，

其次为细交链孢菌（Alternaria alternate）、葡萄座腔菌（Botryosphaeria berengeriana）、香蕉褐缘灰病菌（Pseudocercospora musae），EC50值分别为0.0009、0.0208、0.1327mg/mL。

在毒力方程中斜率取决于厚朴提取物作用于病原真菌的敏感性的大小，两者呈正比关系，按照此原理可判断病原真菌对厚朴提取物的敏感性大小。可以看出香蕉褐缘灰病菌（Pseudocercospora musae）和葡萄座腔菌（Botryosphaeria berengeriana）的斜率较大分别为0.8501、0.7655，表明这2种病原真菌对厚朴提取物较敏感;其次污斑拟盘多毛孢菌（Pestalotiopsis foedans）、细交链孢菌（Alternaria alternate）其毒力方程斜率较小，表明这2种病原真菌对厚朴提取物敏感性低。

3    讨论

研究表明厚朴乙醇提取液对葡萄座腔菌（Botryosphaeria berengeriana）、细交链孢菌（Alternaria alternate）、污斑拟盘多毛孢菌（Pestalotiopsis foedans）、香蕉褐缘灰病菌（Pseudocercospora musae）具有不同程度的抑制作用，其中抑制效果最好的是污斑拟盘多毛孢菌（Pestalotiopsis foedans），最差的是香蕉褐缘灰病菌（Pseudocercospora musae），通过比较不同真菌毒力方程中斜率大小，得出香蕉褐缘灰病菌（Pseudocercospora musae）、葡萄座腔菌（Botryosphaeria berengeriana）对厚朴提取物敏感性较好，出污斑拟盘多毛孢菌（Pestalotiopsis foedans）、细交链孢菌（Alternaria alternate）敏感性较差。本试验主要是采用药用植物提取物来抑制几种近期以来发生的特别严重的植物病害，为生物性药物的进一步研发和推广提供基本的理论依据根本目的是用生物性药物代替化学农药。另外有研究表明茶多酚与茶皂素混合可以明显提高抑菌效果[12]，是否厚朴提取物与另一种抗菌物质混用具有更好的抑菌效果有待进一步研究。本文实验结果也主要是在实验室当中测定的理论数据，厚朴提取物在田间对真菌性病害的作用还有待进一步的研究。

本实验中利用DPS软件快速简单的分析了相关的数据，形象生动的得出实验结果。另外DPS在方差分析，水文分析，生物进化分质分类分析，地理分析方面具有很不错的表现，与国外其他软件相比更加符合中国人的习惯，是科研工作者进行数据统计与分析的一款十分强大的软件。

参考文献

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典（第1部）[M].北京：中国医药科技出版社，2010：235.

[2]初敏，丁立文，刘红，等.厚朴商品资源概述[J].中草药，2003（06）：111-112.

[3]中国科学院西北植物研究所.秦岭植物志（第1卷）[M].北京：科学出版社，1974：337.

[4]王颖，陈文强，邓百万，彭浩，解修超，王梦姣.厚朴酚与和厚朴酚的药理作用及提取合成研究进展[J].陕西理工大学学报（自然科学版），2018，34（02）：58-64，78.

[5]李文惠，翁德会.厚朴饮片不同浓度乙醇浸出物的研究[J].山东化工，2018，47（01）：8-10.

[6]高雯，徐文，龚伟玲，等.厚朴提取物对人肝微粒5种药物代谢酶活性的影响[J].青岛大学医学院学报，2014，50（02）：

127-129，132.

[7]孟艺玮，陈丽梅，张程.DPS分析玉米秸秆传热系数[J].農业与技术，2018，38（13）：7-10，62.

[8]徐伟，季索菲.DPS数据处理系统在生物统计分析中的应用[J].榆林学院学报，2014，24（04）：24-27.

[9]温康林.论植物保护与农业可持续发展关系的研究[J].中国园艺文摘，2018，34（06）：224，226.

[10]方中达.植病研究方法（第3版）[M].北京：中国农业出版社，1998.

[11]张莉，冯晓元，王政军，等.采后厚朴提取物处理对桃果实抗病性的影响[J].食品工业科技，2010，31（10）：136-138.

[12]晏秀梅，魏静，许靖逸，等.茶多酚与茶皂素及其复配液的抑菌作用研究[J].食品工业科技，2014，35（22）：159-161，171.