徐俊杰,佘宁
(四川省生猪无抗养殖工程技术研究中心,齐全农牧集团研究院,四川 遂宁 629000)
益生菌被称为活性微生物饲料添加剂,能够维持机体肠道的稳态,也能够显著影响机体的免疫性能。刚出生仔猪的肠道是无菌的,出生之后通过接触母体和外界环境,微生物在7日龄后逐渐定植于肠道[1]。而定植前几天人为添加有益菌将对仔猪的肠道健康发育至关重要。研究发现,乳酸菌能显著促进机体的健康快速生长[2],枯草芽孢杆菌具有增强动物免疫力的作用。前期已有研究表明,给仔猪饲喂益生菌能够显著提高仔猪胃肠道内的微生物群落多样性[3]。本试验通过给初生仔猪饲喂乳酸菌、枯草芽孢杆菌及这两种益生菌的组合,研究其对仔猪生长、抗氧化性能及免疫功能的影响,为益生菌在养殖生产中的推广提供科学依据。
1.1 试验设计 试验在齐全农牧集团股份有限公司的猪场进行。采用全进全出饲养管理模式,半漏缝地面饲养,定时清理粪便,猪舍温度控制在25~30℃,每个圈(1.5×2.0 m2)均配有 2个乳头式饮水器和1个4孔料槽,自由采食和饮水。按照猪场常规程序进行免疫和保健。
试验选用出生两天内的杜×长×大三元杂交仔猪24只,采用完全随机区组设计,分为4个处理(每个处理6只):对照组C,乳酸菌组L(根据产品推荐水平添加约0.2%),枯草芽孢杆菌组B(根据产品推荐水平添加约0.2%),混合组M(乳酸菌+枯草芽孢杆菌),其中乳酸菌制剂的活菌数为8×106CFU/g。仔猪出生2d后开始试验,将活菌制剂与全脂奶粉混合,调制成糊状,用汤勺放入仔猪舌根部,让其吃下,每日2次(上午、下午各一次),14d后每7d测量各组仔猪的采食量和体重。试验共持续28d。
1.2 测定指标 试验结束后屠宰所有仔猪,采集血液,采用黄嘌呤氧化物酶测定超氧化物歧化酶活力,利用T-AOC(HY-60021)试剂盒测定总抗氧化指标活力,采用GSH-PX(HY-60005)试剂盒测定谷胱甘肽过氧化物酶活力。采集仔猪十二指肠的黏膜组织,利用酶联免疫法测定免疫球蛋白G(IgG)和分泌型免疫球蛋白A(SIgA)的含量。
1.3 数据统计 用Excel 2016软件对数据进行整理,用SPSS 21.0软件对不同组别间的含量差异进行分析;采用的数据分析方法是单因素方差分析(ANOVA)中的最小显著差异(LSD)法,结果以“平均值±标准差”表示。
2.1 添加益生菌对仔猪生长性能的影响 依据表1可得,与对照组相比,添加益生菌对仔猪的采食量没有显著影响,但能显著提高仔猪的日增重,且以乳酸菌和枯草芽孢杆菌混合添加组的效果最显著,日增重从226.66g提高到258.66g(P<0.01)。
2.2 添加益生菌对仔猪抗氧化性能的影响 为了更进一步地分析益生菌对仔猪抗氧化性能的影响,我们在试验结束时随意采集了4组仔猪(每组3头)的血清样本进行检测。结果发现,添加益生菌会影响仔猪血清中的超氧化物歧化酶含量和总抗氧化能力,其中总抗氧化能力指标显著提高(P<0.01),但是对血清中的谷胱甘肽过氧化物酶指标无显著影响,除了芽孢杆菌添加组。
2.3 添加益生菌对仔猪免疫性能的影响 为了更清楚地分析仔猪小肠黏膜上的免疫指标变化,我们采集每组仔猪的十二指肠黏膜组织,测定其免疫球蛋白G(IgG)和分泌型免疫球蛋白A(SIgA)的含量。结果发现,试验组(L、B、M)的 IgG 指标显著低于对照组(P<0.01)(图 1),混合组(M)的SIgA指标显著高于对照组(P<0.01)(图2)。由此可见,添加益生菌能够显著提高仔猪机体的免疫能力。
3.1 猪作为单胃动物,肠道微生物主要集中在盲肠和结肠部位,肠道微生物对于机体的营养吸收具有重要作用。仔猪在出生后很容易受外源有害菌的入侵,导致机体出现腹泻等一系列疾病,而添加益生菌对于仔猪抵制有害菌至关重要。前人研究发现,益生菌发酵饲料能够显著提高仔猪的生长性能[4](这与我们的研究结果一致),并能够促进仔猪的肠道发育。李旋亮等[5]用含有乳酸菌和芽孢杆菌的基础日粮饲喂断奶仔猪,发现添加益生菌能够显著提高仔猪肠道的绒毛高度,说明益生菌能够改善仔猪的肠道组织形态,有利于仔猪机体的营养吸收。
表1 添加益生菌对仔猪生长性能的影响g
表2 添加益生菌对仔猪抗氧化性能的影响 U/mL
图1 不同组之间仔猪小肠黏膜免疫球蛋白指标(IgG)的变化
图2 不同组之间仔猪小肠分泌型免疫球蛋白指标(SIgA)的变化
3.2 另外,我们的试验结果还发现,添加益生菌能够显著提高仔猪血清的抗氧化指标。高建忠等[6]给仔猪添加富硒益生菌,结果发现富硒益生菌能够显著改善仔猪的抗氧化能力,与本研究结果一致。就调节机体免疫性能而言,益生菌可作为非特异免疫调节因子,通过细菌本身或细胞壁成分特别是肽聚糖,刺激宿主免疫细胞和吞噬细胞的活力或作为佐剂发挥作用[7]。Che等[8]的前期研究结果表明,给仔猪饲喂益生菌能够增加肠黏膜中IL-4的分泌量和SIgA的分泌量,从而提高仔猪肠道黏膜免疫力,这与本试验的研究结果也基本一致。
3.3 本试验结果表明,给初生仔猪添加一定量的益生菌,对于预防仔猪腹泻具有正面效果,且不同种类益生菌混合添加的效果优于单一添加(以乳酸杆菌和芽孢杆菌混合较好)。添加时间以出生第2 d仔猪开始吃食初乳后为宜,延续添加时间以3~5 d为佳。从理论上讲,初生仔猪48 h内吸食到初乳有利于提升免疫力,因为此时仔猪肠道是以“胞饮”方式直接吸收免疫球蛋白的。
本试验表明,给初生仔猪饲喂饲用益生菌能够显著提高仔猪的日增重,显著提升仔猪的抗氧化能力和肠道免疫功能,尤其以添加复合益生菌(乳酸杆菌+芽孢杆菌)的效果最为明显。