老年颈动脉粥样硬化叶酸、VitB12治疗患者血清HIF-1α，CD62p和hsCRP水平表达的变化*

王 艳，张 华，阮华玲，向 双，徐成伟，徐凤霞

(1.湖北医药学院附属东风医院，湖北十堰 442008；2.上海市浦东新区公利医院检验科，上海 200135)

有研究显示，高同型半胱氨酸(Hcy)血症是颈动脉粥样硬化发生的独立危险因素，补充维生素B12(VitB12)能够降低血清Hcy水平[1，2]。叶酸(FA)是Hcy生化转化过程中的一碳单位传递体。目前对VitB12或叶酸对Hcy的影响研究有所报道，但对叶酸与VitB12联合用于治疗老年高Hcy血症颈动脉粥样硬化患者疗效的报道较少。本文主要研究叶酸、VitB12联合治疗对老年高Hcy血症颈动脉粥样硬化患者的效果，通过观察治疗前后血清低氧诱导因子-1α(HIF-α)、P-选择素(CD62p)、超敏C-反应蛋白(hs-CRP)等指标变化来判断干预效果，进而为临床预防诊疗提供依据。

1 材料与方法

1.1 研究对象 选取2016年1月～2017年3月期间在湖北医药学院附属东风医院收治的老年高Hcy血症伴颈动脉粥样硬化患者140例，其中，男性80例，女性60例；年龄62～89岁，平均年龄75.3±2.4岁。

1.3 试剂和仪器 患者血清Hcy采用雅培ARCHITECT c16000仪器及原装配套试剂检测；叶酸，VitB12采用雅培i2000化学发光分析仪及原装配套试剂检测；HIF-1α，CD62p采用酶联免疫吸附法及上海酶联生物科技有限公司的试剂检测；hsCRP采用雅培ARCHITECT c16000仪器及武汉中雅公司提供试剂检测；叶酸采用江苏联环药业股份有限公司产品(国药准字号H20044917)，VitB12采用华北制药股份有限公司产品(国药准字号H13020514)。

1.4 检测方法

1.4.1 对两组患者的病情进行控制血压、血糖、血脂等药物的常规治疗，在病情得到有效控制的基础上，仅对观察组按照叶酸口服5 mg/天，VitB12 500 μg/天进行连续4周干预治疗。同时，分别在入院时及治疗4周后测定两组患者血清Hcy，叶酸，VitB12浓度及血清HIF-1α，CD62p，hsCRP水平。

1.4.2 患者血清样本采集：采集所有研究对象早晨空腹肘静脉血4～5 ml，0.5 h内送检，各检测指标严格按照相关项目试剂说明书、仪器操作规程及质量控制进行检测。

1.4.3 颈动脉斑块检测：采用美国GE E9超声仪测量并计算颈动脉斑块厚度，患者按仰卧位检查双侧颈动脉，寻找所有斑块，测量每个斑块最大厚度，然后将所有斑块测量值相加得到颈动脉斑块Crouse积分，具体由主管以上有丰富经验的专业超声医师进行分析。

1.4.4 对患者血清HIF-1α，CD62p，hsCRP表达水平与颈动脉粥样硬化Crouse积分进行相关性分析，进而判断其斑块厚度。

1.5 统计学分析 采用SPSS 20.0软件进行统计学分析，计数资料各组间阳性率比较采用χ2检验；计量资料组间比较采用t检验，相关性采用 Pearson 直线相关分析，检验水准α=0.05。

2 结果

2.1 治疗前后两组Hcy，叶酸，VitB12的检测结果比较 见表1。两组治疗前血清Hcy，叶酸，VitB12水平无明显变化，经t检验差异无统计学意义(t=0.436，0.124，0.044，均P>0.05)；而观察组治疗后，Hcy水平明显低于对照组，叶酸，VitB12检测水平明显高于对照组，差异均有统计学意义(t=7.847，18.952，8.740，allP<0.05)；观察组治疗前后Hcy，叶酸，VitB12变化明显，差异均有统计学意义(P<0.05)。

表1 治疗前后各组Hcy，叶酸，VitB12的检测结果比较

2.2 两组治疗前后血清HIF-1α，CD62p和hsCRP结果比较 见表2。两组患者治疗前后及对照组治疗前后血清HIF-1α，CD62p，hsCRP结果比较差异均无统计学意义(P>0.05)，但观察组治疗后，其检测水平明显低于对照组治疗前后以及治疗前，差异均有统计学意义(P<0.05)。

表2 两组治疗前后HIF-1α，CD62p，hsCRP的检测结果比较

2.3 治疗前后两组颈动脉粥样硬化斑块积分比较 两组治疗前颈动脉粥样硬化斑块积分差异无统计学意义(t=0.051，P>0.05)，治疗后，观察组硬化斑块积分(4.13±2.04mm)较治疗前(4.83±2.13mm)明显减少。对照组治疗后斑块积分(5.11±2.07mm)较治疗前(4.85±2.46mm)增加。观察组治疗前后，及两组治疗后颈动脉粥样硬化斑块积分差异均有统计学意义(t=5.529，P<0.05)。

2.4 血清HIF-1α，CD62p，hsCRP表达水平与颈动脉粥样硬化相关性分析 患者血清HIF-1α，CD62p和hsCRP的表达水平与颈动脉粥样硬化程度呈正相关性(r=0.683，0.588，0.501，P<0.05)。HIF-1α，CD62p与hsCRP间表达水平也呈正相关性(r=0.606，0.615，P<0.05)。但HIF-1α与CD62p表达无相关性(r=0.112，P>0.05)。

3 讨论

脑梗死是由于脑血液供应发生障碍而诱发的脑部病变疾病[3]，而颈动脉是动脉粥样硬化好发部位[4]。越来越多的研究证实，高Hcy血症不仅是脑梗死发病的独立致病因素，也可以用来评估其严重程度及其预后。血清叶酸、VitB12和Hcy水平呈密切相关性[5]，提高B族维生素的摄入能够减少血清Hcy的水平[6，7]。而血清Hcy水平上升会促进动脉粥样硬化的发生和发展，但具体机制尚不明确[8，9]。本研究结果也证实了用叶酸和VitB12对老年颈动脉粥样硬化伴高Hcy血症患者联合治疗后，观察组血清叶酸、VitB12水平明显高于对照组，Hcy水平明显低于对照组，没有服用叶酸和VitB12的对照组血清Hcy浓度没有明显变化。这与以往用叶酸、VitB12联合应用能够降低老年高Hcy血症脑梗死颈动脉粥样硬化患者的Hcy水平[10～12]的报道一致。但国内针对叶酸与VitB12是否可以预防颈动脉粥样硬化，缓解其硬化程度的进展这一问题的研究报道尚不多见。本研究通过超声仪测量并计算颈动脉斑块厚度结果显示，对老年高Hcy血症伴颈动脉粥样硬化患者补充叶酸与VitB12是可以降低颈动脉粥样硬化斑块积分，观察组经过联合治疗后颈动脉粥样硬化斑块积分明显减少，而对照组的硬化斑块积分不降反而升高。由此可见，补充叶酸与VitB12对颈动脉粥样硬化斑块的进展具有一定的预防效果[13，14]。

另外，颈动脉粥样硬化斑块的形成与炎性反应密切相关[15]，但其在颈动脉粥样硬化斑块发生及发展中扮演的角色尚不是很清楚。Baradaran H等[16]人研究认为，颈动脉粥样硬化斑块形成的始动环节是血管内皮细胞出现损伤，血管通透性上升，内皮细胞生理功能不能正常运行，从而释放HIF-1α，CD62p，hsCRP等大量炎性介质因子。HIF-1α可以促进生理及病理性新生微血管的生成，但此类新生血管并不是功能性血管，反而会诱发斑块内出血甚至发生破裂或产生血栓，促进颈动脉粥样硬化狭窄的发展及恶化；CD62p是可以介导血小板、血管内皮细胞与中性粒细胞间的黏附作用，并加重炎症反应及微循环障碍，最终促使血栓组织的形成和发展的因子；而HsCRP常作为一种炎症急性时相反应的敏感性标志物[17]，且在颈动脉粥样硬化斑块破裂与血管内血栓形成环节扮演十分重要的角色，可用于脑梗死颈动脉粥样硬化斑块的严重程度及预后判断[18]。本研究发现，在老年高Hcy血症伴颈动脉粥样硬化患者的血清中，HIF-1α，CD62p表达水平与hsCRP呈正相关性，经叶酸、VitB12联合治疗后该指标下降非常明显，充分说明血清HIF-1α，CD62p和hsCRP均参与了该病的发生发展过程，故笔者认为对此类指标进行监测可以很好反映该类患者病情的严重程度及预后情况。

综上所述，对老年高Hcy血症伴颈动脉粥样硬化患者进行叶酸、VitB12联合治疗的同时，监测血清 Hcy，HIF-1α，CD62p和hsCRP水平，对有效评估颈动脉粥样硬化程度的防控和治疗，具有良好的临床实用价值。