平菇母种培养基优化试验

张玉萍 王 芳 孟丽君 陈 雨 尉敬涛 王 欣 史兴海

（1. 山西省生物研究所，山西 太原 030006；2. 山西省农业科学院作物科学研究所，山西 太原 030031）

平菇是山西省食用菌主栽品种之一。山西省地处华北西部的黄土高原地带，属于暖温带、中温带大陆性气候，夏季炎热多雨，立秋之后，昼夜温差大，平菇出菇变得可行，一直到第二年春季，都是平菇鲜菇的盛产期。立秋时节倒推 60天是平菇制作母种的高峰期，母种质量的优劣直接影响原种和栽培种的质量[1]，因而获得优质母种至关重要。笔者根据多年的制种经验，将成熟原种的培养基煮汁添加到加富 PDA培养基中，取得良好效果。现总结报道如下。

1 试验方法

1.1 供试菌株

平菇早秋615、玉专2号、南京1号、科大杂优、早秋 509，均为山西省生物研究所食用菌研究室保存。

1.2 母种培养基配方

PDAP培养基（对照组）：马铃薯（去皮）200 g，葡萄糖20 g，琼脂粉18 g，蛋白胨2 g，水1 000 mL。

PDAP加富培养基（试验组）：马铃薯（去皮）200 g，葡萄糖20 g，琼脂粉18 g，蛋白胨2 g，原种培养基200 g，水1 000 mL。其中，原种培养基配方为：棉籽壳 84.9%，麸皮 10%，白砂糖 2%，石膏粉2%，磷肥1%，尿素0.1%。

1.3 培养基的制备

（1）PDAP培养基。将马铃薯洗净去皮，切成约1 cm3的小块，称取200 g加水1 000 mL，加热煮沸20～30 min至熟而不烂。用4层纱布过滤取滤液，向其中加入琼脂粉18 g及经温水溶解的2 g蛋白胨，用文火加热，并不断用玻璃棒搅拌，直至琼脂全部溶化。加入葡萄糖 20 g，加蒸馏水定容至1000 mL。采用 30×200（mm）试管分装，无棉盖体试管塞塞口，7支一组，外用牛皮纸包好，棉线绳扎紧，放于高压蒸汽灭菌锅内。120 ℃恒温高压（1.0～1.2 kg/cm2）灭菌30 min，在洁净的培养间内摆好斜面，冷却备用。

（2）PDAP加富培养基。在煮马铃薯的同时将200 g原种培养基用两层纱布包裹后放入容器内煮汁。其他操作同上。

1.4 接种培养

将5个菌株的母种在无菌条件下接种于PDAP培养基试管斜面上，每个菌株接种3支试管，22～25 ℃培养5天。5天后选取生长状况良好的活化菌株，分别转接到PDAP培养基和PDAP加富培养基试管中，每个品种每种培养基转接5支，3次重复。22～25 ℃避光培养。

1.5 测量与统计

母种接种3天后开始定时观察记录各母种菌丝的生长情况。①菌丝长势：观察菌丝浓密度。②菌丝长速：菌丝平均生长速度，每3天划线并测量，重复3次取平均值，计算平均生长速率（mm/d）。③均一性：各管之间的生长速度是否一致。利用Spss21.0数据分析软件，对数据进行整理，对比其平均值大小，初步判断对照组与试验组数据的差别。为了进一步确定检验试验组与对照组数据之间的显著差异性，进行独立样本t检验。以各组数据的标准差，来说明菌丝生长的均一性高低。

2 结果与分析

2.1 菌丝的长势

图1为5个平菇菌株在两种培养基上生长中期的菌丝生长状况。可以看出，试验组（T）PDAP加富培养基的菌丝长势较对照组（C）PDAP培养基的菌丝长势旺盛、浓密，菌丝呈明显的波浪状。

2.2 菌丝的生长速度

由表1可以看出，5个平菇菌株在试验组（T）加富培养基上的菌丝生长速度均大于对照组（C）。经数据分析软件 spss21.0对数据进行的独立样本 t检验结果（表2），早秋615、玉专2号和科大杂优Sig.值小于0.05，试验组（T）PDAP加富培养基中的菌丝生长速度显著快于对照组（C）PDAP培养基中的菌丝生长速度。南京1号和早秋509的Sig.值大于0.05，两种培养基的菌丝长速无显著差异。

表1 不同菌株在不同培养基上菌丝生长速度（单位：cm/d）

2.3 菌丝生长速度的均一性

表1中，各平菇菌株的菌丝生长速度用其平均值加减标准差来表示，标准差是样本数据方差的平方根，用以衡量样本数据的离散程度，数据越大说明样本数据的离散程度越大，均一性越小[2]。由表1可以看出，对照组（C）5个菌株的菌丝生长速度标准差均大于试验组（T），如早秋 615，C0.471＞T0.143，表明试验组加富培养基菌丝生长速度的均一性高于对照组。

图1 5个平菇菌株在两种母种培养基上的生长情况

表2 不同平菇菌株在不同培养基上菌丝生长速度的独立样本检验

3 讨 论

本试验从菌丝的长势、生长速度和均一性3个方面研究5个受市场欢迎的广温型深色硬柄平菇菌株在2种不同培养基上的菌丝生长情况：各菌株菌丝在PDAP加富培养基上表现出明显的生长优势，菌丝生长旺盛，呈波浪状，菌落边缘整齐；生长速度均快于对照组，其中早秋615、玉专2号和科大杂优3个菌株生长速度显著快于对照组；且各菌株在PDAP加富培养基菌丝生长的均一性均高于对照组培养基。试验结果表明，PDAP加富培养基可作为广温型深色硬柄平菇母种的优选培养基。