14C尿素呼气试验固体闪烁法检测幽门螺杆菌感染的安全性及有效性

时 晨 洪汝涛 章礼久 雷江军 许建明

尿素呼气试验(urea breath test,UBT)是检测幽门螺杆菌(helicobacter pylori，HP)感染最受推荐的非侵入性方法[1]，具有准确性较高、操作方便和不受HP在胃内灶性分布影响等优点[2-3]。当前广泛采用的14C尿素呼气试验(14C-UBT)检测方法包括液体闪烁(简称液闪)和卡式检测方法，液体闪烁法探测效率高，重复性好，但操作及保存稍显繁琐，且闪烁液为有毒化学物质，误吸后易导致化学损伤；卡式检测法方便、快速、环保，克服了闪烁液误吸后易导致的化学损伤，但检测效能不如液体闪烁法[4]。新型14C-UBT固体闪烁(简称固闪)检测HP感染的方法，采用干式瓶子采集气体，即呼出气中14C标记的CO2被采样瓶中的吸收片收集固定，后使用光子湮灭探测，从而结合上述两种方法的优点，但目前临床应用较少。因此，本研究采用此新型检测方法，对2017年11月份因上消化道症状门诊就诊100例患者进行14C-UBT HP检测，以14C-UBT液体闪烁法作为“金标准”，评价14C-UBT固体闪烁法检测HP感染的安全性和可靠性，为新型14C-UBT固体闪烁法检测HP感染临床应用提供科学资料。

1 资料与方法

1.1 一般资料 连续纳入2017年11月1～31日因上消化道症状就诊安徽医科大学第一附属医院和安徽医科大学第二附属医院内镜中心的门诊患者100例(两家医院各50例)为研究对象，其中男性63例，女性37例，年龄18～74岁。纳入标准：因上腹不适、腹痛、腹胀等上消化道症状就诊的门诊患者。排除标准：近4周内服用质子泵抑制剂、抗生素及铋剂；胃大部切除术后；急性上消化道大出血；消化道肿瘤、幽门梗阻；严重心、肺、肝、肾等器官功能障碍；近1周内服用抗凝药物；孕妇、儿童、严重精神障碍者等不宜或不能配合检查者。所有纳入对象先后采用14C-UBT液体闪烁法和14C-UBT固体闪烁法检测HP感染。所有患者检查前均知情同意并签署知情同意书。

1.2 方法

1.2.1 检测仪器 采用YH01A型14C液体闪烁计数仪(安徽养和医疗器械设备有限公司提供)进行固闪样本的测量；采用HUBT-01幽门螺杆菌测试仪(深圳市中核海得威生物科技有限公司提供)进行液闪样本的测量。

1.2.2 样本采集 受试者于早上空腹时受试，受试之前漱口，用20 mL凉饮用水送服14C尿素胶囊一粒，静坐等待25 min后采集标本。液闪样本采集：嘱受试者深呼吸后，通过插入捕集液内的吹气管徐徐向瓶内呼气，直至捕集液由紫红色变为无色为止(1～3 min)，若超过3 min褪色不全，亦停止吹气，此时捕集液已吸收饱和，加入4.5 mL稀释闪烁液并摇匀即可。固闪样本采集：在采集液闪样本后，紧接着使用YH10型固体闪烁采样瓶采集固闪样本，嘱受试者深呼吸后，通过吹气管向采样瓶内呼气，重复深呼吸后再次呼气，直至采样瓶内的指示片由蓝色变为白色为止，时间25 min，指示片上容许留有少量蓝色斑点，即为固闪样本。

1.2.3 HP感染检测方法 液闪法：将液闪样本置入测量仪器，测量样本的放射性活度，同时记录样本测量的每分钟衰变率(dpmdisimteyrations per minute,dpm)值，如果样本受到强光照射，避光30 min后再进行测量，测量完毕后，记录和打印样本的测量结果及阴性/阳性判断结果；固闪法：将固闪样本置入测量仪器，测量样本的dpm值，如果样本受到强光照射，避光30 min后再进行测量，测量完毕后，记录和打印样本的测量结果。

1.2.4 评价方法 安全性：操作人员通过感官观察，并使用YH10型固体闪烁采样瓶安全性能评价表评价受试采样瓶在机械损伤、化学损伤、电击损伤、火灾损伤等各方面是否存在不安全的现象，是否对操作人员及患者造成伤害。并与对照组进行比较。

有效性：采用受试固体闪烁采样瓶与对照(以液闪采样瓶的有效性为标准)进行对比，以验证固闪采样瓶与液闪采样瓶是否具有同样的有效性，并用诊断结果符合率来进行评价。诊断结果阳性表示受试者存在HP感染，阴性表示受试者没有感染HP。液闪标本的放射性活度≥100 dpm时判定为阳性；以100 dpm为固闪标本判断阳性和阴性的分界值，最终根据以下公式计算诊断结果符合率。

诊断结果符合率(%)=与对照组判断结果项符合的对象例数/可被纳入统计的总对象例数×100%

2 结果

2.1 YH10型固体闪烁采样瓶安全性能评价 100例患者在采用YH10型固体闪烁采样瓶进行试验过程中，均没有对受试者和操作人员造成机械、化学、电击、火灾等任何方面的伤害。详见表1。

表1 YH10型闪烁采样瓶安全性能评价表

2.2 固闪样本的dpm值分布及与液闪法诊断符合情况比较 100例患者固闪样本的dpm值分布见图1。图1可见，当固闪样本以100 dpm作为判断HP感染的分界值时，100例受试者的固闪样本HP阳性的病例数为59例，阴性的病例数为41例，与液闪样本的判断结果全部符合，即此时诊断结果符合率为100%。

图1 100例固闪样本的dpm值分布

注：形点标记表示液闪样本结果为阴性的病例，其对应固闪标本的dpm值，形点标记表示液闪样本结果为阳性的病例，其对应固闪标本的dpm值。

3 讨论

HP感染与慢性胃炎、消化性溃疡、胃癌、MALT淋巴瘤等上消化道疾病密切相关，并与难治性缺铁性贫血、特发性血小板减少性紫癜等胃外疾病相关，目前我国HP感染率约50%[5-6]，因此，如何快速、价廉、高效、安全的进行HP感染检测，对于诊断HP感染和根除HP后疗效评估尤为重要。UBT是临床最为常用的非侵入性检测HP方法的推广使用[8]。当前广泛应用的是价格相对便宜、操作检测均较为简便的14C-UBT。传统的14C-UBT包括液体闪烁法和卡式检测法，液闪法检测效能高、重复性好，但存在闪烁液误吸致化学损伤风险；卡式法只需向吹气卡中吹气即可，收集、测量均较简便，克服了闪烁液倒吸入口和泼洒风险，但收集时年老患者略有吃力，重复测量误差也略大[4]。新型固体闪烁检测方法，综合了液闪法和卡式法的优势，方便、快速、重复性好，从而为临床HP检测提供更为简单、有效、安全的方法。

本研究中，采用14C-UBT液体采样瓶和YH10型固体闪烁采样瓶分别对100例患者进行HP检测，在使用固闪法对患者检测过程中，均无一例发生机械、化学、电击、火灾等伤害，具有很好的安全性。其原因在于受试产品采用了固体闪烁技术，在操作使用过程中不涉及有毒易燃的液体吸收剂和闪烁剂，完全避免了受试者吸入液体吸收剂的风险，采样后可将样本直接放入仪器进行测量，省去了加入闪烁剂的繁琐过程，完全避免了污染和泼洒的风险，更加便捷和可靠。

本组资料显示，固闪法与液闪法检测HP感染的诊断符合率为100%，表明固闪法检测HP感染与液闪法具有等效性，这与其吸收采纳了液闪法中探测效率高、重复性好且准确度高的光子湮灭探测技术有关，同时提示固闪样本的放射性活度100 dpm作为判断HP感染的分界值科学、可靠。

综上所述，新型固体闪烁检测方法检测HP安全有效，可满足临床诊断的要求，是值得临床推广应用的14C-UBT新型检测方法。