HCT值实时修正全血CRP测定结果的评估

马继荣，周景艺，顾 怡，沈文艳，沈 薇

（上海交通大学医学院附属仁济医院检验科，上海 200127）

C反应蛋白（C-reactive protein，CRP）是一种急性时相反应蛋白，在机体受到感染或组织损伤时可急剧升高，是一种非特异性炎症标志物。对CRP的研究已有近80年历史，各临床实验室开展普遍，免疫比浊法为最常见的检测方法。按标本选择，有血清和全血2种模式，前者多在生化或免疫特定蛋白分析仪上开展，后者多用于门、急诊检测，快速简便。全血模式检测CRP，各厂商按照血细胞比容（hematocrit，HCT）40%左右进行换算，这种换算方法对正常人群（HCT为35%～45%）没有太大影响，对异常标本应予以纠正[1-2]，但实际工作中往往难以做到。本研究拟评价采用HCT值实时修正全血CRP测定结果的价值。

1 材料和方法

1.1 研究对象

选取2017年8月患者血常规标本222例，其中5例标本低于检测限，统计时剔除，最后入组标本217例，其中37例HCT＜35%、128例HCT为35%～45%，52例HCT＞45%。部分血常规标本采取人工弃去部分血浆方式，以提高HCT结果准确性。

1.2 方法

1.2.1 标本采集与测定 采集患者4 mL静脉血，乙二胺四乙酸二钾抗凝，所有标本采集后2 h内完成全血模式下血常规和CRP检测。标本经800×g离心15 min后，分离血浆，用BN Ⅱ特定蛋白分析仪（德国西门子公司）检测CRP。

1.2.2 仪器及试剂 XN 2800血常规CRP流水线（日本希森美康公司），流水线包含2台XN-B4全自动血液分析仪（日本希森美康公司）和1台PA 990特定蛋白分析仪（深圳普门公司）。血常规试剂及CRP试剂（散射比浊法）均为原装配套试剂。BN Ⅱ特定蛋白分析仪及配套CRP试剂盒（散射比浊法）。所有仪器在检测标本前均进行了校准和性能验证。

1.3 根据HCT值实时纠正CRP结果

在临床上CRP浓度均是指该标本的血清CRP浓度值，为了与临床上相统一，当使用全血标本进行检测时，需要将其直接测得的结果（浓度值）进行换算，才能得到该标本的血清CRP浓度值。换算公式为：

式中C全血标本为全血标本测试时，经过HCT校正后的CRP浓度值；C直接测得为全血标本直接测试，在标准曲线中回归计算得到的CRP浓度值；HCT真实为全血标本真实的HCT值。

当HCT固定为40%时，为了实时纠正CRP的结果，减少HCT对测试结果的影响，应对其结果进行实时修正，其修正公式为：

式中C修正后为全血标本测试时，经过真实的HCT校正后的CRP浓度值；C测得为全血标本测试，使用默认40%的HCT值得到的CRP浓度值；HCT真实为全血标本真实的HCT值。

1.4 统计学方法

采用SPSS 11.0软件进行统计分析。以BN Ⅱ特定蛋白分析仪的测定结果为靶值进行比较分析。

2 结果

HCT＜35%，HCT为35%～45%和HCT＞45%的标本的不同分组间全血模式CRP结果用HCT固定40%和HCT实时纠正后，与血浆模式BNⅡ特定蛋白分析仪CRP结果的相关性见图1～图3。

HCT＜35%，HCT为35%～45%和HCT＞45%的标本的全血模式CRP结果用HCT固定40%与实时纠正之间结果的偏差比较见表1、表2。

图1 HCT＜35%的标本用HCT纠正CRP前后与BN Ⅱ特定蛋白分析仪结果的比对

图2 HCT为35%～45%的标本用HCT纠正CRP前后与BN Ⅱ特定蛋白分析仪结果的比对

图3 HCT＞45%的标本用HCT纠正CRP前后与BN Ⅱ特定蛋白分析仪结果的比对

表1 HCT值最低和最高的标本CRP检测结果的比较

表2 固定HCT为40%与HCT实时纠正之间CRP结果的比较

3 讨论

CRP主要用于评估炎症，在细菌性疾病以及心血管疾病诊断中有较为广泛的应用。在门诊和急诊，CRP通常和血常规联合检测，用于快速鉴别诊断是细菌性炎症还是病毒性炎症，为治疗提供依据。为了快速检测，门诊和急诊CRP检测一般使用乙二胺四乙酸抗凝全血，按HCT 40%左右进行换算，使之与特定蛋白仪上血清CRP结果间有可比性，但这种换算方法对HCT为35%～45%的标本基本可行，对HCT异常的标本应予以纠正[1-2]。众所周知，门诊和急诊是检验科中对时间要求最严格的科室，为了方便，纠正CRP的工作难以开展。本研究使用的XN 2800血常规CRP流水线可利用HCT值对全血CRP测定结果进行实时纠正，理论上更为准确。

通过对217份标本进行分析，本研究发现HCT＜35%和＞45%的标本，通过利用HCT值实时纠正后的CRP结果与BN Ⅱ特定蛋白分析仪的相关性明显提升；而HCT为35%～45%的标本，修正与否无明显差异。对于HCT＜35%的37份标本，HCT未纠正的CRP结果与BN Ⅱ特定蛋白分析仪的相关方程为Y=1.191 9X+1.660 7（r2=0.9743）；HCT纠正后的相关方程为Y=1.047 9X+0.224 9（r2=0.982 6）。对于HCT为35%～45%的128份标本，HCT未纠正的CRP结果与BN Ⅱ特定蛋白分析仪的相关方程为Y=1.152 7X-1.880 8（r2=0.985 7）；HCT纠正后的相关方程为Y=1.132 7X-1.288 2（r2=0.983）。对于HCT＞45%的52份标本，HCT未纠正的CRP结果与BN Ⅱ特定蛋白分析仪相关方程为Y=0.580 7X+5.740 4（r2=0.949 8）；HCT纠正后的相关方程为Y=0.900 0X+2.839 1（r2=0.984 2）。同时对3个组的CRP结果与BN Ⅱ特定蛋白分析仪CRP结果之间的偏差进行分析，结果显示HCT＜35%的标本，纠正后平均偏差从11.77 mg/L减少为2.75 mg/ L；HCT＞45%的标本，纠正后的平均偏差从-11.84 mg/L减少到-1.35 mg/L，纠正前后数据比较差异有统计学意义（P＜0.01）。显而易见，利用HCT值纠正CRP能提高结果准确性。

当然，仅从相关性比较，虽然纠正后的相关性有所提高，但分析纠正前固定HCT为40%的CRP结果与BN Ⅱ特定蛋白分析仪之间的相关性，HCT＜35%和＞45%的标本r2值分别达到了0.974 3和0.949 8，也能基本满足临床需求，因此我们重点关注了HCT最低和最高的标本，对于HCT降低的标本，偏差大小与HCT值降低呈负相关，对HCT升高的标本，偏差大小与HCT值降低呈正相关。可见这些极端标本使用未纠正结果偏差很大，甚至影响到临床治疗，提醒无论有没有全自动仪器，检验人员一定要有充分认识，予以纠正。

综上所述，本研究通过流水线将血常规与CRP检测整合，证实了利用HCT值纠正CRP结果与BN Ⅱ特定蛋白分析仪的CRP结果有很好的符合性，尤其对HCT特别低或特别高的标本有比较高的应用价值。