川中南地区儿童下呼吸道感染病原菌分布及药物敏感性特征

胡 容，聂 滨，向小节，丁贵梅，刘能英，杨学强

（宜宾市第二人民医院检验科，四川 宜宾 644000）

下呼吸道感染（lower respiratory tract infection，LRI）是儿童最常见的感染性疾病，是＜5岁儿童死亡的首要原因[1]。及时、准确地进行病原菌检测和合理的抗菌药物治疗对减少死亡起至关重要的作用。由于病原菌的培养与鉴定及药物敏感性试验需要几小时甚至几天的时间，对于儿童病情发展迅速的实际情况，经验用药就显得尤为重要。本研究对宜宾市第二人民医院2014—2016年收治的6 205例LRI患儿的病原菌分布及耐药性进行分析，以期为川中南地区儿童LRI预防方案的制定和临床医师的经验治疗提供科学依据。

1 材料和方法

1.1 一般资料

选取2014—2016年宜宾市第二人民医院LRI住院患儿6 205例，其中男3 282例、女2 923例，年龄（5.3±3.6）岁。

1.2 样本采集

采集所有患儿入院当天、用药前用一次性吸痰器从鼻孔进入抽取的下呼吸道痰液。连续2 d采集痰样本送检，送检样本按《全国临床检验操作规程》（第4版）[2]的要求进行检验，不合格的样本重新采集送检。

1.3 方法

1.3.1 细菌培养 将痰样本分别接种于血琼脂平板、麦康凯琼脂平板和嗜血杆菌巧克力琼脂平板（郑州安图公司），于5% CO2孵育箱培养24 h。

1.3.2 细菌鉴定及药物敏感性试验 分离出的病原菌采用法国生物梅里埃公司VITEK 2 Compact全自动微生物分析系统及配套的鉴定卡和药物敏感性试验卡进行细菌鉴定和药物敏感性试验。肺炎链球菌分别采用GP和GP68卡进行细菌鉴定和药物敏感性试验，未被覆盖的青霉素用E-test条复核；流感嗜血杆菌采用NH卡进行细菌鉴定；流感嗜血杆菌和卡他莫拉汉菌的药物敏感性试验采用纸片扩散法补充完成，HTM平板为温州康泰公司产品，药物敏感性试验纸片为英国Oxoid公司产品。

1.3.3 结果判定 根据美国临床实验室标准化协会（the Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI）M100-S25（2014）文件[3]和M45-A2（2010）文件[4]判定药物敏感性试验结果。用头孢硝噻吩试验定性检测流感嗜血杆菌和卡他莫拉汉菌的β-内酰胺酶。

1.4 质量控制

质控菌株为大肠埃希菌（ATCC 25922）、金黄色葡萄球菌（ATCC 29213）、铜绿假单胞菌（ATCC 27853）、流感嗜血杆菌（ATCC 49247）、肺炎链球菌（ATCC 49619），由四川省临床检验中心提供。

1.5 统计学方法

采用Whonet 5.6和SPSS 10.0软件进行统计分析。组间比较采用χ2检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 病原菌的分布

6 205份痰样本中共分离出病原菌14种（2 147株），阳性检出率为34.6%，主要的菌种为肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、卡他莫拉汉菌。其中肺炎链球菌检出率呈逐年减少趋势，而卡他莫拉汉菌检出率呈逐年上升趋势。见表1。

2.2 病原菌对常见抗菌药物的耐药率

2014—2016年肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、卡他莫拉汉菌对常用抗菌药物的耐药率见表2～表4。

表1 2014—2016年分离自LRI住院患儿痰样本的病原菌

表2 2014—2016年肺炎链球菌对13种常用抗菌药物的耐药率

表3 2014—2016年流感嗜血杆菌对13种常用抗菌药物的耐药率

表4 2014—2016年卡他莫拉汉菌对10种常用抗菌药物的耐药率

3 讨论

由于儿童免疫系统及呼吸系统的发育未完善，LRI发病率高。抗菌药物的广泛使用，造成病原菌的耐药性不断增强，且不同地区由于使用抗菌药物的习惯不同，造成致病菌的不同，致病菌对抗菌药物产生耐药的程度也不同[5]。

本研究对宜宾市第二人民医院2014—2016年6 205例LRI住院患儿痰样本进行培养，共分离病原菌14种（2 147株），阳性率为34.6%，与国内报道相近[6]，但较国外报道的50%～70%偏低[7]。原因可能为：（1）住院前使用了抗菌药物；（2）患儿依从性差，痰样本合格率低。本研究对患儿入院当天用药前用一次性吸痰器从鼻孔进入抽取下呼吸道的痰样本进行培养，大大提高了培养的阳性率和准确率。本研究结果显示，宜宾市第二人民医院儿童LRI常见的致病菌主要为肺炎链球菌（39.17%）、流感嗜血杆菌（23.43%）、卡他莫拉汉菌（20.63%）、金黄色葡萄球菌（7.59%），其中肺炎链球菌检出率逐年降低，卡他莫拉汉菌检出率逐年上升，与罗宇鹏[8]的研究结果相近，与袁萍等[6]和周卫萍等[9]的研究结果存在较大差异。可能由气候以及居民生活环境等多种因素而造成流行病原菌不同所致，也可能由采样的方法不同所致。

肺炎链球菌是川中南地区儿童社区获得性肺炎的主要病原菌。近年来，肺炎链球菌对青霉素不敏感和对大环内酯类抗菌药物耐药率的日趋上升已受到广泛关注[10]。本研究结果显示，宜宾市第二人民医院的肺炎链球菌对青霉素的耐药率有上升趋势（P＜0.05），其原因可能与患儿入院前滥用抗菌药物有关。对大环内脂类的阿奇霉素的耐药率达78.5%，说明大环内酯类抗菌药物已不能作为LRI抗感染治疗的首选药物。肺炎链球菌对四环素、复方磺胺甲噁唑和头孢呋辛等抗菌药物的耐药率均有上升趋势（P＜0.05），说明需根据药物敏感性试验结果选择用药。

本研究结果显示，流感嗜血杆菌对复方磺胺甲噁唑、氯霉素的耐药率有明显上升趋势（P＜0.05），对氨苄西林、复方磺胺甲噁唑耐药率较高。作为条件致病菌的卡他莫拉汉菌可定植于呼吸道，当呼吸道局部免疫功能低下或黏膜屏障受损时，该菌可自呼吸道定植的部位向邻近区域扩散，导致出现感染的临床症状[11]。本研究结果显示，卡他莫拉汉菌对10种常用抗菌药物中的2种耐药。卡他莫拉汉菌主要通过产生β-内酰胺酶而耐药，其高产酶率导致其对青霉素类抗菌药物普遍耐药，但对头孢菌素类、β-内酰胺酶 ／抑制剂类、四环素及喹诺酮类药物仍保持很高的敏感性。但是喹诺酮类药物会影响软骨发育，儿童慎用。所以流感嗜血杆菌和卡他莫拉汉菌感染首选的抗菌药物应是β-内酰胺酶／抑制剂类和头孢二、三代抗菌药物。

综上所述，川中南地区引起儿童LRI的病原菌主要有肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、卡他莫拉汉菌及金黄色葡萄球菌，这些病原菌对青霉素、复方磺胺甲噁唑等抗菌药物的耐药率有上升趋势。临床医师经验用药应避免抗菌药物的滥用，降低抗菌药物使用不当而产生多重耐药菌株的风险。