复方中药擦剂X对试验家兔正常皮肤黑色素影响的药理学研究

吕帅

【中图分类号】R28 【文献标识码】B 【文章编号】2095-6851（2018）09--01

目前，国内外对其研究已不断深入，有药物疗法、物理疗法及外科疗法。本课题在此研究的背景下，搜集验方，以中医药理论为指导，形成一种中药擦剂X，对试验家兔正常皮肤用药，进行药理学研究。通过对试验家兔正常皮肤药理试验的研究，试找出能增加家兔正常皮肤黑色素的处方，由于人的皮肤与家兔皮肤类似，在众多的关于皮肤用药的药理试验研究中，研究者大多采用家兔做药理试验，若药理试验的研究能达到预期的效果—可增加或刺激试验家兔正常皮肤黑色素，则为下一步“中药擦剂X对白癜风疾病的治疗效果研究”提供试验依据。

研究的内容：

复方中药擦剂X处方组成：蒺藜18—30份，补骨脂9—18份，制何首乌8—12份，当归6—15份，红花2—6份，甘草2—10份。

1 提取实验

采用超声波提取、试剂提取等不同的方法、采用乙醇、乙醚、乙酸乙酯等不同的试剂进行提取，试研究出简单、有效、可行的、绿色环保的提取方法。

2 药理试验

对上述提取方法所得提取物对实验家兔分别做急性毒理试验、药理试验。

2.1 外用给药的部位的选择与处理。给药部位应与临床用药保持一致，一般选用动物皮肤作为主要给药部位。实验前先根据实验目的和要求，确定需要备皮的部位，给药皮肤應光洁裸露、无损伤及瘢痕；如给药时间较长，应在2～3d内脱毛1次，尽量消除毛发对给药的影响。实验过程中，用药前后根据情况，可用温水清洗用药部位。

2.2 给药过程中给药时间、剂量、剂型、给药方法的确定。

2.2.1 f外用给药时间应尽量与临床保持一致。如给几次药，每次保持多长时间，给药间隔时间，共给几天等。

2.2.2 外用药的剂量的确定。对于粉末或膏状，原则上以均匀涂覆在给药区一层。根据多次试验并与临床沟通，认为中药粉剂外用每层厚度约2—3mm；同时要对粉剂的粉碎度进行规定，根据不同中药的性质，一般在60-80目之间，此粉碎度，无明显的沙粒感，易于药物发挥作用。

2.2.3 外用剂型及外用给药方式。受试中药应与临床中药外用制剂一致，如含有透皮促进剂或赋形剂有一定活性等，应考虑设透皮促进剂或赋形剂的对照组。

2.3 外用实验的分组及对照组的设置。外用药理实验可设计2—3个剂量组，通过提高用药的浓度、增大外用药量、增大用药面积改变外用药量。但对于外用药，每一种方式都有其不足，如浓度不能提高太多，浓度高可能不利于皮肤的吸收或在局部作用的发挥；外用给药量的增大可能只是增加了药物量，接触药物的皮肤面积不变，并不会明显增加疗效；增大用药面积又会导致各组条件的不一致，缺少可比性。基于上述因素的综合考虑，设置出合理的实验组与对照组。

2.4 结果观察做出实验报告。

2.4.1 急性毒性试验：

2.4.1.1 家兔急性毒性试验：成年健康白色家兔24只，体重2kg左右，雌雄各半。赋形剂：30%的乙醇溶液。将家兔按体重、性别随机分为6组，每组4只，即：完整皮肤模型动物，分为高、低剂量的实验组和基质对照组。破损皮肤模型动物，分为高、低剂量的实验组和基质对照组，受药物浓度的限制，低剂量设为1.25ml/kg，高剂量设为5ml/kg，2次/d给予家兔，于试验前24h用Na2S淀粉糊将所有动物背部脊柱两侧去毛，去毛面积约为150cm2（约占体表面积的10%）。破损皮肤去毛部位消毒后采用刀片将皮肤划破，以渗血为度。试验时将不同剂量擦剂或基质均匀涂于脱毛区，表面覆盖无刺激性纱布，用胶布固定，每次低剂量给药0.625ml/kg，高剂量给药2.5ml/kg，间隔6h再给药一次，共2次。第二天用温水除去残留药物。

2.4.1.2 一般观察：给药即刻至第7天，每日观察动物的全身中毒表现和死亡情况，包括皮肤、毛发、眼睛、粘膜、四肢活动有无异常变化，同时观察动物呼吸、中枢神经系统有无中毒症状表现，以及给药前后动物体重变化。实验结果见表1.表2、表3。

由表1.表2可见，完整皮肤和破损皮肤模型动物给药剂量高达临床等效量40倍时，动物仍无死亡，观察各组动物均未出现异常变化，一般活动正常，行为活泼，毛发亮光，饮食、排便无异常，口、眼、鼻无异常分泌物，粘膜无充血；由表3可见，家兔给药前后，体重无明显变化。说明该药无毒，该药的临床用药量是一个安全的剂量。

2.4.1.3 病理组织学检查：观察期结束，取各组部分动物敲击头部致死，取用药部位皮肤进行病理组织学检查，结果表明，正常组动物皮肤角质层、表皮层和真皮层结构完整，而破损皮肤组动物为角化的复层扁平上皮，表明该擦剂高、低剂量组，家兔用药后皮肤与对照组比较未见显著性差异。

观察实验结果显示，使用上述复方中药擦剂对实验家兔的正常皮肤擦涂7天后，均有黑斑产生，说明该擦剂能刺激实验家兔正常皮肤的黑色素的产生，为进一步研究该擦剂的临床效果—治疗白癜风、白斑病等黑色素疾病缺失性疾病提供了理论、实验依据。