瑶药抗疲方对慢性疲劳综合征大鼠血清SOD活性和血液流变学的影响*

张林平，戴必胜，欧阳资章

1清远职业技术学院护理学院，广东 清远 511520;2清远市人民医院药剂科

慢性疲劳综合征（chronic fatigue syndrome，CFS）患者常表现为难以忍受的全身乏力、慢性疲劳，患者工作生活受到很大影响。笔者采用瑶药和传统中药组成瑶药抗疲方治疗慢性疲劳综合征，对消除疲劳有显著的效果［1］，但其治疗机制尚未阐明。CFS的发病与患者在应激状态下神经-内分泌-免疫网络调节及代谢功能失调有关，相关的文献报道多以此为基础来阐明CFS的发病机制

和治疗机制。本实验以Wistar大鼠建立慢性疲劳综合征模型，并以瑶药进行干预，测定大鼠血清丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性以及血液流变参数变化，试图为瑶药抗疲方治疗CFS提供实验依据，并从氧自由基代谢和血液流变学角度推测CFS的发病机制和瑶药抗疲方的治疗机制。

1 材料与方法

1.1 动物 Wistar大鼠30只，雄性，平均体质量（180±20）g，实验动物合格证号：SCXK（粤）20090011。由广东省医学实验动物中心提供。

1.2 药物 瑶药抗疲方，药物组成：黄花倒水莲20g，五指毛桃20g，党参15g，白术10g，丹参15g，葛根15 g，淫羊藿15 g，郁金15 g。以上中草药均购自广东大参林连锁药店有限公司，经鉴定全部药材均符合药用标准。将上方水煎浓缩为含生药1.30 g/mL的浓缩液。

1.3 分组与造模 取雄性大鼠30只，适应性饲养，任其自由摄水和饮食。1周后，随机选取10只大鼠为对照组，另外20只进行慢性疲劳综合征大鼠造模。造模方法采用文献报道方法［2-3］：1）单日冷水（4℃）游泳30分钟（劳力）；2）双日让其与发情期Wistar雌鼠合笼（每次合笼均新换一批雌鼠，房劳）；3）每天上午9：00～12：00 将大鼠置于自制限制活动的塑料筒内，不能自由活动，同时禁止饮食，每次限制活动3小时（劳神）。造模时间连续14天，造模结束后，将造模成功的20只雄鼠随机分为模型组及瑶药抗疲方组，每组10只。

1.4 处理方法 1）对照组与模型组：普通饲养，按每100g体质量1mL给予生理盐水灌胃；2）瑶药抗疲方组：普通饲养，按每100 g体质量1 mL给予瑶药抗疲方浓缩液灌胃。从造模结束次日起开始灌胃给药，3组均1次/d，连续14天。

1.5 取材与检测 末次给药次日，3组大鼠均采集颈总动脉血。试管中静置20分钟，4℃，3 000 r/min离心10分钟，按照测定试剂盒的技术要求制备血清。用HT-l型血液流变仪（上海航天局第803所）测定全血黏度（高切、低切）、血浆黏度。SOD和MDA测定分别采用硫代巴比妥酸法、黄嘌呤氧化酶法，试剂盒均购于南京建成生物工程研究所。

1.6 统计学方法 所有数据采用SPSS 17.0统计软件处理，计量资料以（±s）表示，采用t检验，P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 大鼠血清M D A含量及SO D活性 模型组大鼠与对照组比较，大鼠血清SOD活性明显下降（P＜0.01）并且MDA含量明显上升，差异有统计学意义（P＜0.01）；瑶药抗疲方组与模型组比较，大鼠血清SOD活性及血清MDA含量差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 3组大鼠血清M D A含量及SO D活性比较（±s）

表1 3组大鼠血清M D A含量及SO D活性比较（±s）

注：与模型组比较，a表示P＜0.05，b表示P＜0.01

组别 只数 剂量 /（g·kg-1） M D A/（nm ol·m L-1） SO D/（U·m L-1）对照组 10 - 6.99±1.24b 245.29±12.54b模型组 10 - 9.01±0.56 224.67±12.63瑶药抗疲方组 10 13.0 8.18±0.48a 244.10±5.21b

2.2 大鼠血液流变学指标 模型组与对照组比较，高切和低切黏度升高明显（P＜0.01），血浆黏度升高明显（P＜0.01）；瑶药抗疲方组与模型组比较，大鼠高切和低切黏度降低明显（P＜0.01），血浆黏度有所降低（P＜0.05）。见表2。

表2 3组大鼠血液流变学指标比较（±s）

注：与模型组比较，a表示P＜0.05，b表示P＜0.01

组别 只数 剂量/（g·kg-1） 全血黏度/（m Pa·s） 血浆黏度/（m Pa·s）高切200/s 低切1/s对照组 10 - 0.20±0.06b 4.22±0.41b 1.13±0.09b模型组 10 - 2.38±0.53 6.30±0.27 1.45±0.81瑶药抗疲方组 10 13.0 0.44±0.08b 4.38±0.41b 1.19±0.22a

3 讨论

CFS患者的物理和实验室检查常无明显的特异性表现，其发病机制仍然在探索之中。有研究显示，神经-内分泌-免疫网络调节及代谢功能失调可能参与了CFS的发生。现代医学研究认为自由基与许多疾病的发生发展有关。有文献报道，CFS的发生与自由基网络中的氧自由基代谢平衡失调有关［4］。机体通过有效的抗氧化防御系统，维持氧自由基生成与清除的动态平衡。在抗氧化防御系统中，SOD是最主要的抗氧化酶，是氧自由基的清除剂，可保护细胞免受损伤。MDA是氧自由基与不饱和脂肪酸发生脂质过氧化反应的代谢产物，对细胞有损伤作用。二者的测定常常相互印证，反映机体氧自由基的代谢状况。本实验结果显示，模型组大鼠血清SOD活性降低而MDA含量升高，反映出模型大鼠氧自由基代谢紊乱。推测可能与大鼠在劳力、劳神、房劳状态下，机体清除氧自由基能力下降、代谢稳态失衡，其强大的破坏作用引起机体组织功能的氧化损伤，导致机体内环境如神经-内分泌-免疫网络调节及代谢功能失调有关。瑶药抗疲方对CFS大鼠进行干预后，均能不同程度地提高大鼠血清SOD的活性，降低MDA的含量，提示瑶药抗疲方能增强机体清除氧自由基的能力，抵抗氧自由基对机体的氧化应激损害，维持自由基生成与清除的代谢稳态，这可能是瑶药抗疲方治疗CFS的机制之一。

本实验同时观察到模型组大鼠在不同切变力下全血黏度和血浆黏度与对照组大鼠相比明显升高，提示在CFS状态下，大鼠机体血液流变学特性改变可能与CFS的发生发展有关［5］。血液流变性异常引起血流动力学变化、微循环障碍，导致组织缺血缺氧、代谢紊乱和功能失调，导致CFS发生。本实验中瑶药抗疲方组大鼠的血液流变学指标明显比模型组大鼠下降，提示瑶药抗疲方能降低血液黏度，改善微循环，改善组织缺血缺氧状态，改善CFS机体内环境，促进CFS的康复。

现代中医药研究认为CFS可导致多个脏腑的气血阴阳失调，病机复杂。笔者在临床中观察到CFS患者多见心、脾、肾3脏气虚，湿瘀阻滞，气郁不利等证，瑶药抗疲方据此而立。方中黄花倒水连、五指毛桃是广东瑶族地区常用的民间草药。现代药理研究显示，黄花倒水莲具有清除自由基作用［6］，黄花倒水莲总苷能抑制血瘀模型和高脂血症血液流变学指标的改变，降低血液黏度，改善血液循环［7］。五指毛桃水提液可提高实验小鼠血清SOD，降低小鼠血清 MDA水平［8］。方中白术含有的白术多糖能增强衰老大鼠大脑皮质SOD、GSH-Px活力，降低自由基代谢产物的含量［9］。丹参活血化瘀，可改善微循环。葛根素对家兔红细胞压积、全血比黏度、血沉等指标也有改善作用。淫羊藿总黄酮可明显增强机体神经内分泌免疫网络的调节功能，维持机体内环境稳定，激发机能，延缓衰老［10］。瑶药抗疲方选药结合了现代药理学的研究成果，诸药相互协同，起到了改善CFS大鼠血液流变学异常和恢复机体氧自由基代谢平衡的作用。

以中医病因理论为依据，通过竭力运动、束缚应激和过度交配模拟人类的劳伤致病因素，建立大鼠CFS模型，与人类因社会环境和工作压力而产生CFS状态的病因相似。瑶药抗疲方干预CFS大鼠，可减轻大鼠的疲劳反应，增强其抗自由基氧化能力，降低血液黏度，改善微循环，从而起到治疗CFS的作用。