于文蛟,王苗苗,韩 飞,李慕春
(新疆维吾尔自治区分析测试研究院,新疆乌鲁木齐 830011)
核桃(Juglans regia L.)又名胡桃、羌桃,为胡桃科(Juglandaceae) 胡桃属(Juglans) 植物,是一种具有很高药用价值和经济价值的珍贵果木[1-3]。核桃原产于亚洲西部,自汉代时传入我国,至今己有1 700多年的栽培历史,目前我国的栽培面积居世界首位。临床上,核桃广泛用于治疗泌尿系统结石、慢性气管炎、皮炎、湿疹及痢疾等疾病[4-7]。核桃仁又名胡桃肉、万岁子,富含油脂、蛋白质及维生素等营养成分。据《本草纲目》记载,核桃仁能补气益血、润燥化痰、温肺润肠,且味甘性平[8]。《开宝本草》曰:核桃仁,食之令人强健、润肌、黑发须。分心木是核桃果核的干燥木质隔膜,味苦、涩,性平,入脾、肾经,具有补肾、抑菌、抗氧化等功效[9]。核桃壳富含黄酮类化合物和胡桃醌,具有增强免疫力、化感、消炎、抗菌、抗癌等功效[10-12]。
植物多酚(Plant polyphenol)是多羟基酚类化合物的总称,又叫植物单宁,是天然植物中分离提纯的多种酚类化合物的复合体,广泛存在于蔬菜、水果、豆类、谷物类、茶等植物中[13-14]。植物多酚具有很强的抗氧化能力,能清除人体过剩的自由基,它在油脂、食品、医药、日化、轻化、化妆品、保健品和环境等诸多方面具有广阔的应用前景,并被专家誉为21世纪对人类健康产生巨大影响的化合物[15-18]。近年来,随着多酚等植物次生代谢物质在医疗保健方面研究的深入,日益受到人们的关注。
目前,以核桃为药源植物的研究大都只局限于单一品种,且针对核桃仁的较多,而对不同品种及不同部位中多酚的分布特点研究鲜有报道。试验以3个不同地区的核桃品种为试材,比较分析不同的核桃品种及其在核桃壳、核桃仁和分心木的多酚含量,以期明确多酚在核桃不同部位的分布规律及品种间的差异,从而为核桃的开发利用和良种选育提供理论依据和数据支持。
阿克苏核桃,新疆天山林果业食品有限公司提供;和田薄皮核桃,新疆八大怪食品有限公司提供;巩留野核桃,新疆伊犁巩留县提供。
无水碳酸钠,西安化学试剂厂提供;福林酚试剂(FC试剂),新疆新隆昌实验器材有限公司提供;无水乙醇,西安化学试剂厂提供;一水合没食子酸,天津光复精细化工研究所提供;石油醚(60~90℃),天津市富宇精细化工有限公司提供。以上试剂均为分析纯。
UV-2700型紫外分光光度计,日本岛津公司产品;碎样机,飞利浦公司产品;密封式化验制样粉碎机,南昌通化化验制样机厂产品;电子天平,赛多利斯科学仪器有限公司产品。
2.1.1 核桃仁处理
取无皮核桃样品机械破碎,取出核桃仁粉碎,称取1.00 g粉碎样品,加入50 mL 60%乙醇在55℃下回流30 min,过滤后收集滤液。滤渣用相同提取工艺提取2次,3次滤液合并后用60%乙醇定量,蒸馏除去乙醇后的溶液用去离子水定容到50 mL;石油醚等体积萃取2次,除去脂溶性杂质,水相样品溶液低温避光保存,备用。
2.1.2 核桃壳处理
取无皮核桃样品机械破碎,取出核桃壳粉碎,过40目,称取0.50 g粉碎样品,加入50 mL 60%乙醇在55℃下回流30 min,过滤后收集滤液。滤渣用相同提取工艺提取2次,3次滤液合并后用60%乙醇定量,低温避光保存,备用。
2.1.3 核桃分心木处理
取无皮核桃样品机械破碎,取出核桃分心木粉碎,称取0.50 g粉碎样品,加入50 mL 60%乙醇在55℃下回流30 min,过滤后收集滤液。滤渣用相同提取工艺提取2次,3次滤液合并后用60%乙醇定量,低温避光保存,备用。
准确称取一水合没食子酸0.110 0 g,溶于100 mL去离子水中,搅拌使之充分溶解,然后转移到250 mL容量瓶中,定容,充分混匀。取上述溶液10 mL,定容至100 mL,充分混匀,所得溶液即为质量浓度为0.04 mg/L的没食子酸溶液。
从其中分别吸取0,0.5,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0 mL转移至25 mL比色皿中,然后分别加入2 mL FC试剂、10 mL 10%Na2CO3溶液,摇匀,于50℃下恒温水浴中避光反应1 h,以浓度为零的反应液为空白,于波长765 nm处测定吸光度。得没食子酸质量浓度(X) 与吸光度(Y) 之间的直线方程Y=0.113 41X+0.022 16 (R2=0.997 96)。
没食子酸测定标准曲线见图1。
图1 没食子酸测定标准曲线
分别取适量各种已提取的核桃样品于25 mL比色管中,然后分别加入2 mL FC试剂、10 mL 10%Na2CO3溶液,摇匀,于50℃下恒温水浴中避光反应1 h,于波长765 nm处测定吸光度。
表1 9个核桃样品中多酚含量测定结果(n=3,±s)
表1 9个核桃样品中多酚含量测定结果(n=3,±s)
核桃样品 含量/%核桃仁(阿克苏)核桃仁(和田)核桃仁(伊犁巩留)核桃壳(阿克苏)核桃壳(和田)核桃壳(伊犁巩留)核桃分心木(阿克苏)核桃分心木(和田)核桃分心木(伊犁巩留)1.5 9 2 7±0.0 3 9 9 1.4 3 9 5±0.0 6 7 8 1.7 6 0 6±0.0 6 7 6 0.0 9 1 4±0.0 1 0 7 0.0 4 1 0±0.0 0 3 0 0.0 9 9 4±0.0 0 8 0 0.8 7 5 7±0.0 1 1 7 0.6 3 1 4±0.0 0 3 4 1.1 1 9 8±0.0 0 9 6
不同地区石榴不同部位间多酚含量的比较见图2。
图2 不同地区石榴不同部位间多酚含量的比较
由表1和图2可知,3个不同地区核桃不同部位的多酚含量各不相同,其平均值分别为核桃仁1.60%,核桃壳0.08%,核桃分心木0.88%,核桃仁中多酚含量最高,显著高于其他器官,其次是核桃分心木,为核桃仁多酚含量的43.9%~63.6%,核桃壳中多酚含量最低,仅为核桃仁中多酚含量的2.8%~5.7%。由此可见,核桃仁和核桃分心木是核桃多酚的集中分布部位。
由表1和图2可知,在核桃仁中,巩留野核桃的多酚含量最高,为1.76%,阿克苏核桃的多酚含量次之,为1.59%,和田薄皮核桃的多酚含量最少,为1.44%。在核桃壳中,巩留野核桃的多酚含量最高,为0.10%,阿克苏核桃的多酚的含量次之,为0.09%,和田薄皮核桃的多酚含量最少,为0.04%。在核桃分心木中,巩留野核桃多酚含量最高,为1.12%,阿克苏核桃的多酚含量次之,为0.88%,和田薄皮核桃的多酚含量最少,为0.63%。结果表明,3个不同地区核桃多酚含量各不相同,其平均值分别为巩留野核桃0.99%,阿克苏核桃0.85%,和田薄皮核桃0.70%。由此可见,巩留野核桃的多酚含量高于其他2个地区的核桃。
综上所述,比较同一种核桃的不同部位中,核桃仁的多酚含量最高,核桃壳的多酚含量最低。在核桃仁、核桃壳、核桃分心木中,伊犁巩留野核桃的多酚含量均为最高的,阿克苏核桃的多酚含量次之,和田薄皮核桃的多酚含量最少。研究结果为核桃开发多酚相关功能食品或药品提供了一定的理论基础和试验依据,对于提高核桃的附加值和核桃资源的有效利用具有重要意义。