山楂叶提取物抗抑郁作用的初步研究

王 瑛

（哈尔滨医科大学附属第四医院静脉药物调配中心，黑龙江哈尔滨 150001）

山楂叶为蔷薇科植物山里红（Crataegus pinnatifida Bge. var.major N. E. B r.） 或山楂（C. pinnatifida Bge.）的干燥叶[1-2]。山楂叶味酸、性平， 归肝经， 具有活血化瘀、理气通络的作用。我国山楂叶资源丰富，价廉易得，而山楂叶总黄酮为山楂叶提取物中的主要成分。目前对山楂叶的现代药理研究主要集中在心脑血管、降脂、降糖、降压和抗氧化等方面[3]。有资料表明，山楂叶的主要成分黄酮类物质具有一定的抗抑郁作用[4]。本研究旨在明确山楂叶的抗抑郁作用，为临床研究提供理论依据。

1 资料与方法

1.1 实验药物

主要药品包括山楂叶提取物粉末（晋城中晋药业有限公司生产） ，百合皂苷（黑龙江中医药大学自制，纯度为70%），氟西汀（常州四药制药有限公司）。

1.2 实验动物

健康昆明种小鼠，雄性，体质量18～21 g，2月龄，由黑龙江中医药大学实验动物中心提供。饲养环境：室温18～22℃，相对湿度40%～55%。

1.3 试剂

蒸馏水、生理盐水于购哈尔滨三联药业有限公司。

1.4 实验仪器

主要仪器包括电子天平（沈阳龙腾电子称量仪器有限公司）；MC-3型数字式温度体温计[欧姆龙（中国）有限公司 ]；1/100 s秒表秒表。

1.5 实验方法

（1）动物分组和给药。昆明种小白鼠适应性饲养1周，随机分为6组，分别为山楂叶提取物高剂量组（1 g/kg）、中 剂 量 组（0.5 g/kg）、低 剂 量 组（0.25 g/kg）、氟 西 汀 组（0.004 g/kg）、百合皂苷组（0.05 g/kg）和空白对照组（给等体积的生理盐水）。灌胃给药1次/d，连续7 d。

（2）悬尾实验。末次给药1 h后将每组小鼠尾部距末端2 cm处用胶带条固定悬挂于铁架台上，距离桌面15 cm，适应2 min后计算4 min内小鼠悬尾累计不动时间（小鼠表现被动悬挂，肢体运动消失时被认定为不动状态）。

（3）强迫游泳实验。小鼠末次给药1 h后先训练游泳5 min，1 d后将小鼠放入水深10 cm、直径20 cm 的玻璃缸内，水温保持在25℃，先预适应2 min，然后记录小鼠4 min内不动时间（小鼠表现被动漂浮，挣扎行为消失持续1 min被认定为不动状态）。

（4） 拮抗利血平降低小鼠体温实验。将体温计探头轻插入小鼠肛门内 1～2 cm，当温度显示稳定后读数，为基础体温。然后给药，1 h后腹腔注射利血平 2.5 mg/kg，4 h后测定肛温，以体温降低值作为指标。

1.6 统计学分析

采用 SPSS 17.0 统计学软件进行数据分析，多组间单因素比较先用单因素分析其正态分布，后以LSD 法进行统计。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 山楂叶提取物对小鼠悬尾不动时间的影响

各组小鼠与空白对照组比较，山楂叶提取物高、中、低剂量组、百合皂苷组和氟西汀组小鼠悬尾不动时间均明显缩短，组间比较差异有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01），见表1。

表1 山楂叶提取物对小鼠悬尾不动时间的影响（±s）

表1 山楂叶提取物对小鼠悬尾不动时间的影响（±s）

注：与正常对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01

组别 n 剂量（g/kg） 4 min累计不动时间（s）山楂叶提取物高剂量组 10 1 74.28±6.22*山楂叶提取物中剂量组 10 0.5 70.13±7.25*山楂叶提取物低剂量组 10 0.25 85.17±8.45*百合皂苷组 10 0.05 77.08±6.93*氟西汀组 10 0.004 48.35±5.47**空白对照组 10 等容积 102.69±8.36

2.2 山楂叶提取物对小鼠强迫游泳不动时间的影响

各组小鼠与空白对照组比较，山楂叶提取物高、中、低剂量组、百合皂苷组和氟西汀组小鼠强迫游泳不动时间均明显缩短，组间比较差异有统计学意义（P＜0.05或P ＜ 0.01），见表 2。

表2 山楂叶提取物对小鼠强迫游泳不动时间的影响（±s）

表2 山楂叶提取物对小鼠强迫游泳不动时间的影响（±s）

注：与正常对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01

组别 n 剂量（g/kg） 4min累计不动时间（s）山楂叶提取物高剂量组 10 1 66.38±5.37*山楂叶提取物中剂量组 10 0.5 59.24±5.67*山楂叶提取物低剂量组 10 0.25 68.90±7.19*百合皂苷组 10 0.05 69.14±3.98*氟西汀组 10 0.004 47.75±4.79**空白对照组 10 等容积 98.29±6.20

2.3 山楂叶提取物对拮抗利血平降低小鼠体温的影响

腹腔注射利血平1 h后各组小鼠体温无明显变化，组间比较差异无统计学意义（P＞0.05）；腹腔注射利血平4 h后，各组小鼠与空白对照组比较，山楂叶提取物中、低剂量组、百合皂苷组合氟西汀组小鼠体温变化明显减小，组间比较差异有统计学意义（P＜0.05），见表3。

3 讨论与结论

抑郁症是以显著而持久的心情低落为主要特征，是心境障碍的主要类型，是近年来严重危害人类身心健康的精神类疾病之一[5]。氟西汀、帕罗西汀、舍曲林等西药的抗抑郁作用主要与单胺类神经递质有关，且副作用明显。今年来，植物抗抑郁药的研究也有了一定的发展。山楂叶是一种常用天然药用植物，其野生资源非常丰富，目前临床上多用于心血管疾病，有资料表明，山楂叶的主要成分黄酮类物质具有一定的抗抑郁作用[6]。动物模型悬尾试验与强迫游泳是临床评估应用药物抗抑郁效果的一种模型，将动物模型放置在有限空间内对其进行悬尾或使之进行游泳，会发现动物会拼命逃脱，但一段时间后动物会停止挣扎放弃逃脱，是一种绝望表现。本文作者制作小鼠动物模型，结果发现，各给药组小鼠与空白对照组相比，小鼠悬尾不动时间和小鼠强迫游泳不动时间均缩短，初步证实山楂叶提取物具有一定抗抑郁效应。目前临床普遍认为抑郁症的发病机制与单胺类神经递质含量下降或单胺类受体功能减弱密切相关。利血平可以通过阻碍神经末梢内囊泡对神经递质的摄取，使中枢5-羟色胺与去甲肾上腺素等单胺类神经递质耗竭，引起运动不能或者体温降低等行为以及生理上改变[7-8]。本文作者制作小鼠动物模型，结果发现，各给药组小鼠与空白对照组相比，体温变化有所减小。提示山楂叶提取物可以拮抗利血平所致的体温下降情况，与抗抑郁机制有着一定联系，然而其抗抑郁的作用机制仍需我们进一步探讨。

表3 山楂叶提取物对拮抗利血平降低小鼠体温的影响（±s）

表3 山楂叶提取物对拮抗利血平降低小鼠体温的影响（±s）

注：与正常对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01

组别 n 剂量（g/kg） 1 h体温降低值（℃） 4 h体温降低值（℃）山楂叶提取物高剂量组 10 1 1.38±0.53 5.14±0.07山楂叶提取物中剂量组 10 0.5 -0.09±0.04 4.07±0.13*山楂叶提取物低剂量组 10 0.25 1.14±0.09 3.55±1.21*百合皂苷组 10 0.05 1.20±0.11 3.94±0.09*氟西汀组 10 0.004 -0.07±0.02 3.21±0.04*空白对照组 10 等容积 0.22±0.08 5.68±1.27