浅析食入/吸入/混合型过敏原阳性喘息性支气管炎儿童的免疫功能

王雪华

(郑州市中原区妇幼保健所，河南 郑州 450000)

目前，过敏引起的儿童喘息性支气管炎的发病率日渐增高[1]。本研究将喘息性支气管炎患儿依过敏原类型不同分型做回顾性分析，研究相应过敏原在该疾病发病机制中的作用及患儿的免疫功能。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集2016年1月～2017年9月就诊于郑州市中原区妇幼保健所确诊为喘息性支气管炎的患儿共255例，患儿血清特异性过敏原IgE(specificIgE，slgE)阳性，包括吸入性过敏原(尘螨、花粉和蟑螂等)和食入性过敏原(鸡蛋、牛奶和鱼虾等)，据此分成3组：吸入性过敏原呈阳性组(即吸入组)、食入性过敏原呈阳性组(即食入组)及混合性过敏原呈阳性组(即两者同时呈阳性)。吸入组男46例，女42例，年龄15个月～6岁；食入组男53例，女54例，年龄14个月～6岁；混合组男26例，女34例，年龄15个月～6岁。所有患儿无上呼吸道感染，外周血WBC<10×109儿。健康儿童340名，其中男女人数分别为151名、189名，年龄在12个月～6岁，无过敏性疾病及喘息性支气管炎家族史。观察对象在抽血的前2周内均未服用激素及免疫调节剂。所有患儿在性别与年龄上比较差异均无统计学意义(P>0.05)。

1.2 试剂与仪器

血清slgE、总IgE检验试剂与UniCAP100检测系统(瑞士Pharmacia公司)，血清IgA、IgG、IgM测定试剂(芬兰Orion Diagnosstica公司)，淋巴细胞表面分化抗体群(clusterodifferentation，即CD)测定试剂和FACSCalibur流式细胞测试仪(美国BD公司)，Access2全自动型微粒子化学发光免疫分析系统(美国BeckmanCoulter公司)，以及日立7600-020全自动生化分析仪(日本Hitach公司)。

1.3 标本采集方法

空腹抽取两组患者静脉血液3 mL，经离心处理后留取上清液，并将上清液置于-20℃冰箱中保存待测。应用放射免疫法测定各组CRP水平，CRP试剂盒(郑州安赛生物科技有限公司)；应用酶联免疫法测定各组IL-6、TNF-a及IgG、IgA、IgM水平，IL-6试剂盒(上海纪宁生物科研有限公司)；TNF-a试剂盒(北京赛驰生物科技有限公司)；IgG、IgA、IgM试剂盒(上海逸峰生物科技有限公司)；采用流式细胞仪测定外周血CD4+ Th17、Th17/Treg 、CD4+ CD25+ Treg比率。采用全自动化生化分析仪测定各种血清Scr、CYSC及UAER。

1.4 统计学方法

2 结果

2.1 各组细胞免疫与体液免疫相关指标对比(见表1)

表1 各组细胞免疫与体液免疫相关指标对比

注：1)与对照组相比，P<0.05；2)与吸入组相比，P<0.05；3)与食入组相比，P<0.05

2.2 过敏原阳性喘息性支气管炎患儿的血清总IgE和各淋巴细胞亚群的相关性

检测结果显示，喘息性支气管炎患儿血清总IgE分别与CD4+ Th17、CD4+ CD25+ Treg细胞显著正相关(r=034,0.34,P=0.00,0.00)。

3 讨论

以前的研究表明，喘息性支气管炎的出现主要由CD4+ Th17、CD4+ CD25+ Treg细胞调控，表现为过敏原特异性Th2细胞因子的明显升高及Thl/Th2细胞因子比例的下降。CD4+ CD25+ Treg细胞细胞属于抑制性/细胞毒性T淋巴细胞亚群，哮喘发病时，过敏原特异的CD8+T淋巴细胞抑制炎症、降低气道高反应、抑制白细胞介素_4(interleukin4，IL-4)的产生来使Thl/Th2重新保持平衡，从而达到免疫功效。

本研究中吸入组、食入组、混合组患者血清CD4+ Th17、CD4+ CD25+ Treg水平高于健康对照组(P<0.05)，且混合组患儿CD4+ Th17、CD4+ CD25+ Treg水平高于吸入组及食入组，差异有统计学意义(P<0.05)；提示吸入性过敏原更加容易引起喘息性支气管炎儿童的细胞免疫功能发生变化，混合组中CD4+ Th17、CD4+ CD25+ Treg的表达失衡也存在受吸人性过敏原影响的可能性。

既往研究认为自身应答性T淋巴细胞可介导机体抗原免疫应答反应，并参与机体免疫系统调节平衡过程。喘息性支气管炎患者由于体内自身应答性T淋巴细胞活性下降，会导致细胞因子及其受体分泌水平异常，从而导致免疫功能障碍。CD4+ CD25+ Treg细胞为调节性T淋巴细胞亚群，其具有较强免疫抑制功能[2，3]。可直接控制过敏性炎症效应细胞，也可经过分泌细胞因子缓解喘息性支气管炎气道炎症，其功能失调及数目降低是导引起自身免疫性或过敏性疾病的关键原因。研究中吸入组的CD4+ CD25+ Treg细胞明显降低，也再次验证以上免疫致病机制，结果显示若可选取有针对性的经过诱导CD4+ CD25+ Treg水平增高，控制Th2反应的治疗方法，或许对吸入性过敏原阳性喘息性支气管炎患儿疗效确切。

CD4+CD25+Treg胞表示B淋巴细胞水平，CD4+CD25+Treg细胞表示活化B淋巴细胞水平，可正向调节IgE合成及分泌，触发IgE介导的炎症介质释放与I型变态反应发生[4]。在本研究中，喘息性支气管炎患儿血清总IgE分别与CD4+ Th17、CD4+ CD25+ Treg细胞显著正相关，表明当过敏原阳性喘息性支气管炎患儿体内的B淋巴细胞有也许处在绝对值增高及高激活状态时，能正向调节IgE水平，引起总IgE显著增长。此外，免疫球蛋白合成受T淋巴细胞与其释放的淋巴因子调控。本研究的吸入组和混合组血清IgA、IgG、IgM与IgE比食入组、健康组均明显增长，而食入组仅IgE显著高于健康组，说明吸入性过敏原更易诱发细胞免疫与体液免疫的改变。

CD4+ Th17细胞也是参与喘息性支气管炎的发病重要的免疫调节细胞，能影响Th2的分化，增强其活性[5]。在本研究中，总IgE和CD4+ Th17细胞呈明显正相关，佐证CD4+ Th17在过敏原致敏中的作用。

总之，吸入性过敏原致敏更易引起喘息性支气管炎患儿调节性T淋巴细胞的比例或者功能，包含CD4+ Th17、CD4+ CD25+ Treg失衡，从而影响体液免疫功能。所以，对于此类患儿，临床上除采用抗IgE抗体等医治外，还必须着重考察免疫调节剂在淋巴细胞亚群调节中的应用。