两种方法检测HLA—B27的临床价值

林乾飞

[摘要] 目的 探讨磁性酶联免疫分析法和流式细胞术两种方法检测HLA-B27的临床价值，为临床血液HLA-B27的检验提供科学理论依据。 方法 方便选取该院2017年1—12月在该院检测血液HLA-B27的134例患者为研究对象，所有患者均采用两种方法进行检验，根据检验方法不同，分为对照组和观察组。对照组采用流式细胞仪检验，观察组采用磁性酶联免疫分析法进行检验，观察两种检验方法的灵敏度、特异性及阳性、阴性预测值。 结果 磁性酶联免疫分析的灵敏度、特异性及阳性、阴性预测值分别为0.961，0.985，0.981，0.985，流式细胞仪的灵敏度、特异性及阳性、阴性预测值分别为0.961，0.971，0.968，0.973，两种方法结果的符合率为97.76%，差异无统计学意义（P>0.05）。 结论 磁性酶联免疫分析法在检验血液HLA-B27的灵敏度和特异性较好，具有方面、省时、简单、准确的特点，适合强直性脊柱炎的早期诊断及鉴别，实用可靠，值得在临床上应用推广。

[关键词] 磁性酶联免疫分析法；流式细胞术；两种检测方法；HLA-B27；临床价值

[中图分类号] R4 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742（2018）06（c）-0188-03

[Abstract] Objective This paper tries to explore the clinical value of magnetic enzyme-linked immunosorbent assay and flow cytometry in the detection of HLA-B27， and to provide scientific theoretical basis for the clinical blood HLA-B27 test. Methods 134 patients with HLA-B27 in the hospital from January to December 2017 were selected conveniently as the study subjects. All patients were tested by two methods. According to the different testing methods， they were divided into control group and observation group. The control group was examined by flow cytometry. The observation group was tested by magnetic enzyme-linked immunosorbent assay. The sensitivity， specificity， and positive and negative predictive value of the two test methods were observed. Results The sensitivity， specificity， and positive and negative predictive values of magnetic enzyme-linked immunosorbent assay were 0.961，0.985，0.981 and 0.985， respectively. The sensitivity， specificity， and positive and negative predictive values of flow cytometry were 0.961，0.971，0.968，0.973. The coincidence rate of the two methods was 97.76%. the difference was not statistically significant. Conclusion The magnetic enzyme-linked immunosorbent assay has good sensitivity and specificity in the detection of blood HLA-B27. It has the characteristics of being time-saving， simple， and accurate. It is suitable for the early diagnosis and identification of ankylosing spondylitis. It is practical and reliable， and worthy of clinical application.

[Key words] Magnetic enzyme-linked immunoassay； Flow cytometry； Two detection methods； HLA-B27； Clinical value

HLA-B27屬于HLA-B位点之一，是人体白细胞抗原。HLA-B27基因属于Ⅰ型MHC基因，表达在机体中所有有核的细胞上，尤其是在淋巴细胞表面含量较多。现在研究表明[1-3]，HLA-B27和强直性脊柱炎具有高度的相关性，HLA-B27检验已经成为临床上支持强直性脊柱炎诊断的重要依据。目前检验HLA-B27的方法有许多，如微量细胞毒试验、流式细胞仪检验法、酶联免疫分析法、PCR法等。该文方便选取该院2017年1—2017年12月在该院检测血液HLA-B27的134例患者为研究对象，探讨两种方法检测HLA-B27的临床价值，取得较好的效果，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

方便选取在该院检测血液HLA-B27的134例患者为研究对象，所有患者血液均经流式细胞仪和酶联免疫分析法进行测定，分别为对照组和观察组。患者中男71例，女63例，年龄6～85岁，平均年龄（47.0±2.69）岁。该研究的所有流程项目都是在符合伦理委员会各项条例和批准的前提下进行的，同时也是获得了所有参与患者及其家属的知情同意。

1.2 治疗方法

1.2.1 标本准备 两组患者晨起空腹抽取静脉血4 mL，分别装于2支EDTA抗凝管（美国BD公司）中，每管2 mL，编号注明性别和年龄，在24 h内分别用于酶联免疫分析法和流式细胞仪检测。

1.2.2 对照组 对照组采用流式细胞仪对患者血液进行检验，采用美国BD公司的FACSCalibur流式细胞仪进行检验，HLA-B27试剂盒为BD公司的专用试剂盒，严格按照试剂盒说明书进行操作，采用专用软件进行血液样品分析和结果计算，将结果和定界值进行比较，大于等于定界值则为阳性，否则为阴性。

1.2.3 观察组 观察组采用美国Goldsign公司的HLA-B27抗原磁酶免疫试剂盒，严格按照试剂盒说明书进行操作，采用国产KHBst-360酶免疫检测仪，在波长450 nm和630 nm下读取吸光度值（OD值），OD值<0.7则判定为阴性，OD≥0.7则为阳性。

1.4 统计方法

采用SPSS 19.0统计学软件处理数据，计数资料[n（%）]采用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

经过不同方法检测后，差异无统计学意义（P>0.05），检测结果比较见表1。

两种方法检测后，灵敏度、特异性及阳性、阴性预测值，差异无统计学意义（P>0.05），见表2。

3 讨论

HLA抗原是人类重要组织相容性复合体（MHC）的表达产物，在人体免疫系统中负责细胞与细胞之间的识别、诱导免疫反应以及调节免疫应答的功能。近年来，研究HLA和疾病相关性的资料证明[4-6]，一些疾病的发生率盒某些特殊的HLA检出率密切相关，这些患者大都是发病机理尚不明确，并伴有免疫功能异常和有遗传倾向性的疾病[7]。

流式细胞术（FCM）是通过检测标记的荧光信号，对悬液中的单细胞或其他生物粒子，实现高速、逐一的细胞定量分析技术，其特点是通过快速测定库尔特电阻、光散射、荧光和光吸收定量测定细胞细胞体积、DNA含量、酶活性、蛋白质含量、细胞膜受体及表面抗原等参数，根据得到的参数将性质不同的细胞分开，获得供医学研究用的纯细胞群体。FCM法通过荧光抗原抗体检测技术，对细胞表面抗原进行分析，进行细胞分类及亚群分析，FCM对于人体细胞免疫功能的评估、各种血液病及肿瘤的诊断和治疗均有重要作用。酶联免疫吸附剂测定法（ELISA法），简称酶联免疫法，是让抗体和酶复合物结合并通过显色来进行指标检测。该研究检查结果显示流式细胞仪的灵敏度、特异性及阳性、阴性预测值分别为0.961、0.971、0.968、0.973，磁性酶联免疫的灵敏度、特异性及阳性、阴性预测值分别为0.981、0.985、0.981、0.985，与沈静[8]磁性酶联免疫分析的灵敏度、特异性及阳性、阴性预测值分别为0.958、0.969、 0.965、0.968，流式细胞仪的灵敏度、特异性及阳性、陰性预测值分别为0.979、0.981、0.982、0.987检测结果一致。

该文研究磁性酶联免疫分析法在检验血液HLA-B27的灵敏度和特异性较好，具有方面、省时、简单、准确的特点，适合强直性脊柱炎的早期诊断及鉴别，实用可靠，值得在临床上应用推广。

[参考文献]

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[2] 叶阿里.实时荧光PCR法和流式细胞术检测HLA-B27的结果分析[J].国际检验医学，2017，38（7）：892.

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[4] 王平均.聚合酶链反应-直接测序法在强直性脊柱炎患者HLA-B27检测中的应用[J].中国实验诊断学，2015，19（11）：1898.

[5] 艾金伟.国内HLA-B27诊断强直性脊柱炎价值的Meta分析[J].中国循证医学，2015，15（9）：1059.

[6] 孙灵迪.HLA-B27基因表达量及亚型分析在 AS 疾病评估中的意义[J].现代检验医学，2016（1）：58.

[7] 张世坤.不同方法在强直性脊柱炎患者HLA-B27检测中的比较[J].中国现代药物应用，2016，10（13）：39.

[8] 沈静.SSP-PCR法与流式细胞仪检测HLA-B27的相关性比较[J].国际检验医学， 2014，35（1）：70.

（收稿日期：2018-03-26）