MMP—2与NF—KB在肺癌侵袭转移中的作用研究

潘兆宝 吉华青 韩丽芳 董安山 史立宏

摘要 目的：观察在肺癌组织中基质金属蛋白酶MMP-2和NF-KB的表达，探讨MMP-2与NF-KB在肺癌侵袭转移中的作用。方法：收治80例癌肺患者作为观察组，67例肺癌旁正常患者作为对照组，用免疫组织化学方法检测肺癌组织中MMP-2和NF-KB的表达。结果：观察组和对照组MMP-2的表达率分别为20%（16/80）、71.6% （48/67）；观察组和对照组NF-KB蛋白的表达率分别为68.7%（55/80）、35.8%（24/67）。肺癌分化程度、淋巴结转移及术后生存时间与MMP-2和NF-KB蛋白的表达水平有很大关系。MMP-2表达水平和NF-KB负相关（P<0.05）；患者的MMP -2蛋白表达水平低以及NF-KB蛋白表达水平高，会降低患者的平均生存时间以及5年生存率（P<0.05）。结论：MMP-2的低表达以及NF-KB蛋白的高表达在肺癌侵袭转移中有直接影响，MMP-2低表达可促使NF-KB蛋白信号激活，促进肺癌侵袭转移。

关键词 肺癌；MMP-2蛋白；NF-KB；侵袭转移

目前在肺癌治疗中较难解决的问题之一是恶性肿瘤的侵袭及转移。在肿瘤的侵袭转移过程中基质金属蛋白酶MMP-2和NF-KB（核因子KB）的表达起到了很重要的作用[1-3]，本研究通过对80例癌肺患者和67例肺癌旁正常患者的MMP-2和NF-KB的表达水平比较，分析MMP2与NF-KB在肺癌侵袭转移中的作用，现报告如下。

资料与方法

2014年10月-2015年10月收治80例癌肺患者作为观察组及67例肺癌旁正常患者作为对照组。80例癌肺患者中男45例，女35例；年龄32～74岁，平均52.8岁；均未术前无化疗或放疗患者。67例肺癌旁正常患者中男37例，女30例；年龄33～ 72岁，平均50.5岁。根据1997年公布的修订分期标准，35例鳞癌，45例腺癌；低分化31例，中分化30例，高分化19例；36例I+Ⅱ期患者，44例Ⅲ+Ⅳ期患者。44例淋巴结阳性转移，36例阴性转移。完整随访78例，随访时间2015年11月-2016年5月，以手术日期到随访结束日期记为生存时间，或者囚复发、转移死亡的日期为生存时间，见表1。

处理方法：①免疫组织化学法：用二甲苯脱蜡和梯度乙醇水化两组的石蜡切片，浸泡3%甲醇一过氧化氢溶液20min，抗原修复12min，用购自北京中杉公司的免疫组化sP试剂盒和DAB显色试剂，10～15min室温下H202氧化物进行染色。阳性对照物为PBS。②结果判定：胞膜或胞质染成棕色为阳性反应，NF-KB以细胞质和（或）细胞核出现棕黄色颗粒为阳性。以200个细胞作为每张切片的计数基数，统计不同级别阳性细胞所占的百分比。O分为胞膜或胞质无染色患者；1分为胞膜或胞质染色浅棕患者；2分为胞膜或胞质染色深棕患者。不同级别阳性细胞所占的百分比：0分为0%～ 5%；1分为6%～25%；2分为26%～50%：>50%为3分。胞膜或胞质染色分数不同级别阳性细胞所占的百分比分数的得分作为淋巴结转移为阴阳性的标准。强阳性>6分，中等阳性4～6分，弱阳性2～3分，阴性O～1分。阴性或弱陽性为低表达，中等阳性或强阳性为高表达。

统计学处理：采用SPSS 20.0数据处理软件对所得数据资料进行统计学分析。所有计量资料数据采用（x±s）表示，免疫组织化学染色结果与临床病理参数计数资料采用X2检验。MMP-2与NF-KB蛋白表达的相关关系采用Spearman相关分析，采用Kaplan-Meier曲线和Log-rank检验进行生存分析，P<0.05为差异有统计学意义。

结果

基质金属蛋白酶MMP-2在肺癌和正常肺组织中的表达比较：80例癌肺患者基质金属蛋白酶MMP-2呈阴性或少数微弱阳性表达64例，高表达16例，表达率20%；65例癌旁正常患者呈阴性或少数微弱阳性15例，阳性表达48例（71.6%），差异有统计学意义（P<0.05），见表2。

NF-KB在肺癌和正常肺组织中的表达比较：80例癌肺患者NF-KB呈阴性或少数微弱阳性表达28例，高表达52例，表达率65%，在高倍显微镜下肿瘤细胞的胞质或胞核成棕黄色；67例正常肺组织中阴性或少数微弱阳性表达43例，高表达24例（44.7%），两组差异有统计学意义（P<0.05），见表3。

MMP-2与NF-KB蛋白表达与临床病理特征关系：MMP-2与NF-KB蛋白的阳性表达与性别、肿瘤大小以及吸炯史无明显关系（P>0.05），MMP-2阳性表达随肺癌分化变高而变高，反之NF_KB阳性表达随随肺癌分化变高而降低（P<0.05）。TNM分期增加，MMP-2阳性表达下降，NF-KB阳性表达上升（P<0.05）。由此可以看出MMP-2与NF-KB蛋白的表达呈负相关，见表4。

MMP-2和NF-KB蛋白表达与术后生存时间的关系：80例肺癌患者中78例完整随访，随访发现MMP-2低表达患者的术后生存时间低于高表达患者生存时间，NF-KB高表达患者的术后生存时间低于高表达患者生存时间，总之患者的生存时间受MMP-2低表达和NF-KB高表达影响，见表5。

讨论

MMP-2是基质金属蛋白酶一种，是蛋白水解酶，可以降解如基底膜及其结缔组织等细胞外间质，为肿瘤浸润和转移打开了第一道缺口。研究发现肿瘤组织中的MMP-2表达高于正常组织。核因子KB及NF-KB是真核细胞转录因子，NF-KB信号通路可以调控细胞增殖、分化和凋亡等重要生理功能，同时与肿瘤发生联系密切。

综上所述，MMP-2的低表达以及NF-KB蛋白的高表达在肺癌侵袭转移中有直接影响。