结核感染T淋巴细胞斑点试验检测在非典型肺结核诊断中的临床价值

尤旭华

肺结核是由于肺部受到结核分枝杆菌感染并被侵袭损伤，出现咳嗽咳痰、咯血、乏力消瘦、午后低热、盗汗等症状[1]。典型肺结核的临床症状特异性较高，不容易造成误诊，但是随着结核菌耐药性的增加、人类自身免疫水平的下降以及治疗的不规范，导致不典型肺结核临床表现和胸部影像学改变均不典型，易被其他疾病症状掩盖，给临床诊断增加了困难[2]。近年来结核感染T淋巴细胞斑点试验在结核诊断中应用广泛，本文探讨了该试验在非典型肺结核诊断中的价值，旨在为非典型肺结核的临床诊断提供参考，现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 收集2015年12月～2017年12月本院呼吸科接受过结核感染T淋巴细胞斑点试验的患者病例214例，男110例，女104例，平均病程（24.3±10.6）d，平均发病年龄（51.2±13.4）岁。结核感染组（48例）：痰培养结核分枝杆菌阳性；病理检查干酪样坏死；诊断性治疗有效。其中临床表现和影像学检查不典型的患者为非典型肺结核（16例）。非结核感染组（166例）：无明显结核接触史，诊断性治疗临床症状和影像学改变均无缓解。

1.2 方法 采集患者静脉血4 ml，置于肝素抗凝管内，并加入4 mlRPMI1640培养液，混合均匀。在离心管内加入3 ml淋巴细胞分离液，后加入抗凝管内的8 ml混悬液，置于离心机，转速1 600 r/min，时间22 min，后置于15 ml离心管中，并加入RPMI 1 640培养液，600 r/min，离心7 min，去除上清液后再加入AIMV培养液11 ml，转速350 r/min，离心7 min，去除上清液后再加入适量AIMV培养液，混合均匀后取10μl混悬液与40μl锥虫蓝染液混合，然后取10μl混合液置于细胞计数版计数。结核感染T淋巴细胞试剂盒由四川华西数康生物医药有限公司提供，判断标准严格按照试剂盒说明书。

1.3 统计指标 计算结核感染T淋巴细胞斑点试验的灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值，绘制ROC曲线，计算曲线下面积，并计算该试验对非典型肺结核患者的阳性率。

1.4 统计学方法 本研究数据均用SPSS 18.0统计学软件进行数据处理并分析，计量资料采用“x±s”表示，组间比较采用t检验；计数资料用例数（n）表示，计数资料组间率（%）的比较采用χ2检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 结核感染T淋巴细胞斑点试验对肺结核的诊断价值结核感染组48例，非结核感染组166例，结核感染T淋巴细胞斑点试验（T-SPOT.TB）的灵敏度为93.75%（45/48），特异度为95.78%（159/166），阳性预测值为 86.53%（45/52），阴性预测值为98.15%（159/162），ROC曲线下面积为0.681，差异有统计学意义（P=0.00），见表1。

表1 结核感染T淋巴细胞斑点试验对肺结核的诊断价值

2.2 结核感染组中结核感染T淋巴细胞斑点试验阳性率按照临床症状和影像学改变，将结核感染组分为典型肺结核组和非典型肺结核组，两组结核感染T淋巴细胞斑点试验阳性率均为93.75%，差异无统计学意义，见表2。

3 讨论

肺结核是结核分枝杆菌侵袭肺组织引起的一种呼吸系统常见传染病，主要通过飞沫传播[3]。随着医疗水平的提高，目前，我国肺结核的发病已经得到了有效的控制，但是重症肺结核仍会对肺部造成严重的不可逆损伤，威胁患者生命[4]。经过长期的规律总结，典型肺结核的发病特点，影像学表现已经被医务人员熟知，诊断难度不大，但是由于结核菌的耐药性提高、诊治流程不规范、个体化差异等原因会出现非典型肺结核。这部分患者发病时临床表现、影像学改变均不典型，若合并其他呼吸道疾病时病情容易被其他症状掩盖，在临床诊治中存在较大难度，也常常造成误诊而延误病情[5]。梁新峰[6]在对43例成人不典型肺结核的临床分析中得出，有34.88%的患者并不表现出咳嗽咳痰这一常见症状，62.79%的患者无明显肺部体征（呼吸音减弱、湿啰音等），经过肺部高清X片检查发现以往认为的典型X片改变如大小不同的结节影、粟粒影、空洞等表现并不多，相反有51.16%的患者表现为肺段、叶等实质性改变及肺不张，而实验室检查发现血沉指标升高较为明显，与以往经验较相符。因此，在临床上对于肺结核的检查一定要结合多方面表现，防止漏诊误诊。近来也有研究分析了造成非典型肺结核误诊的原因，张建勇[7]通过分析46例肺结核患者发现，50%的不典型肺结核患者被诊断为急慢性呼吸道感染，另外，还有患者被误诊为肺炎、肺癌、肺脓肿等疾病，通过分析作者猜测造成肺结核临床表现不典型的原因可能是近年来抗菌药物的广泛应用、生活水平的提高使得人们对特异性感染的免疫力增强等，而造成误诊的主要原因有非专科就诊、临床表现隐匿或不典型、辅助检查特异性不高、能确证的主要手段如痰菌检查阳性率不高、临床医师未考虑肺结核等[8]。

表2 典型与非典型肺结核组结核感染T淋巴细胞斑点试验阳性率[n（%）]

目前，多数相关研究也只是从概率上分析了误诊原因，提出了临床医师从主观上重视肺结核的诊断，多方面综合分析帮助诊断等解决办法，但是由于部分非典型肺结核的临床表现基本和急慢性呼吸道感染相同，上述方法在理论上可减少该病的误诊率，但是实际工作中可行性并不高，目前，临床迫切的需要一个检出率高且方便可行的诊断方法。随着医疗水平的逐渐提高，结核感染T淋巴细胞斑点试验进入了医务人员的视线。该试验的原理是利用了机体接触结核分枝杆菌时激活了T淋巴细胞，当被激活的T淋巴细胞再次接触特异性抗原时释放γ-干扰素，检测时将释放γ-干扰素的T淋巴细胞计数，从而了解机体的免疫应答状态，为临床诊断提供参考[9]，所以从理论上讲，不论典型还是非典型肺结核，结核感染T淋巴细胞斑点试验均能表现出特异性。

本试验先验证了结核感染T淋巴细胞斑点试验对于肺结核的诊断价值，结果显示结核感染T淋巴细胞斑点试验（T-SPOT.TB）的灵敏度为93.75%(45/48)，特异度为95.78%（159/166），阳性预测值为86.53%（45/52），阴性预测值为98.15%（159/162），ROC曲线下面积为0.681,差异有统计学意义（P=0.00），说明该试验可作为结核感染的诊断依据，且诊断价值较高，然后在将所有结核感染的病例分成典型肺结核组和非典型结核组，通过比较发现，在这两组中该试验的阳性率差异无统计学意义，说明非典型肺结核并不影响结核感染T淋巴细胞斑点试验的阳性率，与孙付有等[10]研究结果相符。

综上所述，结核感染T淋巴细胞斑点试验对非典型肺结核有较高的诊断价值，且操作相对较简便，值得临床推广应用。