IGF-2及IGFBP-3与稽留流产的关系

曾莉，张月香，丁易钤

江苏省南通市妇幼保健院妇科，江苏南通 226028

稽留流产的定义为在怀孕后的20周内，胎儿以及胚胎死亡后没有被排除体外，而仍然存在患者宫腔内，此类病症也可以叫做胚胎停止发育。在育龄期妇女中发病率高达15%～20%，占自然流产的42.21%[1]。目前已知引起稽留流产的原因很多，包括染色体数量或结构异常、子宫内环境异常、内分泌功能紊乱、免疫功能异常、过量吸烟等不良习惯、全身性及生殖道感染疾病、严重营养缺乏、环境污染及创伤等[2]，近年研究热点在遗传物质异常、母胎界面免疫调节异常、绒毛细胞的侵袭与凋亡失衡、氧化应激异常等，仍有大部分病因不明发病机制大多不明确，目前普遍认为是多因素综合作用而产生的。其中，胰岛素样生长因子（insulin-like growth factor，IGF）家族的研究是当今细胞生物领域的热点，家族成员之一的多功能生长因子IGF2以及数量最多的结合蛋白IGFBP-3，可能是对胎儿正常发育产生影响的主要调节因子。对2016年1—12月该院稽留流产患者以及正常早孕女性血中IGF-2及IGFBP-3水平进行对比研究，从一个新的角度去探索导致稽留流产的原因，为今后的治疗以及防治提供准确的理论基础。

1 资料与方法

1.1 一般资料

在该院住院手术终止妊娠的稽留流产以及在该院门诊要求人流者中，随机纳入研究对象；采用1:1对照；纳入标准：孕7～10周内超声观察未见胚芽和（或）胎心搏动，孕期未服用激素类药物，妊娠之前3个月内月经规律；排除标准：孕7～10周正常早孕要求终止妊娠，超声见胚芽及胎心搏动。对照组中，患者年龄在21～41岁之间，平均（28.6±6.9）岁；研究组中，患者年龄在 21～40 岁之间，平均（39.2±7.1）岁。所有患者在年龄等一般资料方面比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。所有患者各项资料均经患者家属同意，并通过伦理委员会的批准。

1.2 方法

吸宫前抽取静脉血3 mL，离心后取血清置入-80°冰箱保存，采用长春东杰生物制品有限公司提供的ELISA试剂盒，检测血清中IGF-2及IGFBP-3水平，试验步骤需要严格参考说明书上的标准开展。

1.3 统计方法

应用SPSS 20.0统计学软件分析数据，血清数据以均数±标准差表示，检验方式为t检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组血清中IGF-2含量

两组产妇血清中IGF-2含量对比，差异无统计学意义(P>0.05)，见表 1。

表1 两组产妇血清中IGF-2含量对比[（±s），ng/mL]

表1 两组产妇血清中IGF-2含量对比[（±s），ng/mL]

组别IGF-2含量研究组对照组t值P值0.37±0.22 0.42±0.26 0.859>0.05

2.2 两组血清中IGFBP-3含量比较

研究组的IGFBP-3含量为(3 105.03±1 002.95)ng/mL，而对照组的IGFBP-3含量为(3 832.84±1 201.12)ng/mL，研究组低于对照组，且差异有统计学意义(P＜0.05)。见表2。

表2 两组产妇血清中IGF-3含量对比[（±s），ng/mL]

表2 两组产妇血清中IGF-3含量对比[（±s），ng/mL]

组别IGF-3含量研究组对照组t值P值3 105.03±1 002.95 3 832.84±1 201.12 4.235<0.05

3 讨论

稽留流产病因复杂，染色体异常是稽留流产的主要原因，通过染色体检查的金标准即绒毛培养及核型分析，稽留流产染色体异常检出率为50%～55%，而高通量基因测序技术检测染色体数目异常率56%，结构异常率达16%，实际异常率高于此，这是目前无法通过干预预防或避免的稽留流产。另外小一部分通过改善环境、改变生活方式、免疫治疗、感染控制等，可避免稽留流产发生，仍有大部分病因与发病机制不明，促使临床医生去深入研究。

1957年Daughaday发现生长激素在发挥生理作用过程中必需的一种活性蛋白多肽物质，因其结构与胰岛素类似而得名“胰岛素样生长因子”，随后科学家们逐渐发现一个庞大的由多种蛋白酶、IGF结合蛋白 （IGFBP1-10）及 IGF-1和 IGF-2、IGF 受体（IGF-1R、IGF-2R 及 IGF/Ins杂合受体）组成的系统（IGFs），它们的属于一种多肽类物质，可以对生长起到促进作用，在人体肝、肾等组织中存在大量的此类细胞，是调节细胞增殖、分化和转化的关键因素，可能是中枢神经系统发育时期重要的自分泌和旁分泌信号分子。此后并逐渐认识到，IGFs在肿瘤发生中也起着重要的作用，例如妇科的宫颈癌中IGF-2明显上升，林红[3]甚至提出血清IGF2的检测可作为宫颈上皮内瘤变向宫颈癌发展的监测指标之一。血清及胎盘存在该系统的各种因子，与人类胚胎开始到个体生长发育可能有密切关系[4]。

3.1 IGF-2与稽留流产的关系

IGF在与细胞表面的受体相互接触后可以产生相应的作用，在被激活后，便可以出现多种效应。IGF有3种分泌形式，包括内分泌、自分泌及旁分泌，其中自分泌占主导。IGF-1与IGF-2之间具有一定的相似性以及差异性，从结构上来看，两者的结构以及活性存在相似性，但是从细胞体内的生物学角度来看，其产生的效应具有差异，此种差异性在不同的组织以及生长周期中，更为明显。生长发育过程需要IGF1和IGF2的参与，IGF1的主要作为用，为身体的正常发育提供保证，而IGF2的主要作用为胎儿的生长。生长激素的合成代谢功能主要是由IGF-1介导，正常妊娠IGF-1的水平随孕周逐渐增加，国内外大量研究[5]已发现早期胚胎发育停止母血中的IGF-1水平降低本项目未进行IGF-1的相关研究，有待深入。

IGF-2是由 67个氨基酸组成的偏酸性的单链多肽，是目前所知功能最复杂多样的生长因子，根据其功能，也可以被叫做生长调节素，属于胰岛素-胰岛素样生长因子-释放生长因子，此类生长因子与具有加强有丝分裂活性的功能的胰岛素，在结构上与具有同源性的特点，并且在啮齿类动物中同样具有促进有丝分裂的作用。妊娠早期在胎盘组织中表达，并参与调节滋养细胞的侵袭能力，主要作用于胚胎和胎儿期。妊娠中期及后期，IGF-2在组织中表达高于IGF-1，整个孕期水平相对稳定，出生后开始下降，因而被称为出生前的主要生长因子，着床前的胚胎发育、滋养细胞侵入蜕膜、胎盘和胚胎的生长发育有关[6]。通过学者对小鼠胚胎干细胞进行研究时，可以发现用在敲除部分IGF-2等位基因后，与健康的雌性小鼠进行交配，在产生的后代中，杂合子的个体与野生型基因相同的小鼠较小，以此实验现象论证IGF-2在小鼠胚胎发育中的作用，也将胚胎期的作用进行论证[7]。冯艳萍等[8]的研究中，也证明在胚胎发育的早期阶段，停止大于后IGF-2水平较低，证明胚胎发育早期IGF-2蛋白的高表达与正常妊娠的维持密切相关。

但是，该研究中，稽留流产与正常早孕相比，IGF-2血清浓度差异无统计学意义，与冯艳萍等研究结论有所不同，综合分析可能有以下原因：①该研究样本量小，研究组和对照组各20例，结果显示研究组较对照组的IGF-2水平有降低趋势，扩大样本量可能差异有统计学意义；②IGF-2可能在组织中表达高，因此，进一步检测胎盘绒毛组织IGF-2水平，可能更具有意义；③IGF-2的作用强度与其受体数量、IGFBP调控有关，需深入研究相关作用链，另外，与IGFBP结合以外的游离IGF-2是否才是真正有活性的部分，均有待于进一步深入研究。

3.2 IGFBP-3与稽留流产的关系

IGF与IGFBP发生高亲和性结合，IGFBPs对IGF亲和力是IGF-1R的2-50倍，后者可以通过调节胰岛素样生长因子与受体的结合影响其生物功能[9]。人体研究中，相关研究者[10]研究发现胎儿脐血中IGF-Ⅰ与胰岛素水平呈正相关关系,而与IGFBP-2呈负相关关系;脐血胰岛素、IGF-Ⅰ水平与新生儿出生体重呈正相关关系,而IGFBP-2与之呈负相关关系。循环中90%以上IGF是和IGFBP-3结合在一起。IGFBP-3是在肝脏部位形成的，通常以复合体的形式存在与血循环中：大分子三聚体，携带约80%的IGF，该复合体难以通过毛细血管屏障，仅在IGFBP-3蛋白分解酶的作用下从复合体中释放出来的IGF才能通过血管内皮屏障到达组织血管发挥作用；小分子质量二聚体，能通过毛细血管屏障，转运IGF到达靶细胞。

IGFBP-3的产生时会受到GH影响，其水平不受时间段的影响，但是与年龄的变化有关，在儿童的青春期会达到最大值，并且女性中的含量要高于同年龄的男性高出10%左右，在吸收不良、肥胖、糖尿病、肝功能异常等情况下IGFBP-3水平下降。该次研究发现稽留流产的研究组患者体内IGFBP-3的浓度显著低于正常组，差异有统计学意义（P<0.05）。黄丽娟等[11]研究发现特发性身体矮小(ISS)儿童血清IGF-1水平、IGFBP-3水平均显著低于对照组，提出血清IGF-I及IGFBP-3水平检测对ISS儿童临床诊断、生长监测及GH治疗随诊有着重要的临床价值，其中，患者血清中的 IGF-3含量为（3 150.4±1 056.2）ng/mL。 对照组患者的血清中含量为（3 821.5±1 040.9）ng/mL。该研究结果显示：稽留流产患者血清IGFBP-3的水平较正常早孕女性显著下降，观察组患者的含量为（3 105.03±1 002.95）ng/mL，对照组患者的含量为（3 832.84±1 201.12）ng/mL，而 IGF-2差异无统计学意义，可能与IGFBP减少，转运至组织真正起作用的IGF-2相应减少有关，从而显示表明IGFBP-3在稽留流产发生中有更重要的作用，进一步的机制有待更深入研究。相关文献的研究与该文的研究结果相符。

综上所述，IGFs的研究对稽留流产的发病原因以及发病原理进行进一步的分析，为后续治疗提供值得借鉴的理论，可以将IGFBP-3作为预测稽留流产指标用于临川治疗工作中。但是，IGFs是一个庞大而复杂的系统，目前研究仍然比较零星，全面了解IGF-2及IGFBP在稽留流产中的作用，尤其IGFBP-3在IGF生物效应中起到较重要的调控，需研究其在孕妇血清、胎盘绒毛及蜕膜中的水平，需更多更深入的大样本研究，从而对稽留流产可以起到预测以及干预等作用，使后续的治疗具有针对性，减少稽留流产的发病与复发几率，推动妇女保健工作。