盐酸曲马多缓释片的含量测定分析

河南省三门峡市食品药品检测中心（472000）蔡旭升

1 仪器与试药

Alliance高效液相色谱仪（美国Waters公司生产），盐酸曲马多对照品（中国药品生物制品检定所提供），盐酸曲马多缓释片（深圳南方盈信制药有限公司，批号030201，批号030301，批号030501），超纯水、色谱纯、分析纯，备好待用。

2 方法与结果

2.1 设置条件 取KR100 C18柱应用，柱长250mm，内径4.6mm，填充材料Akzonobel，直径5μm；实验用流动相：为磷酸二氢钾与庚烷磺酸钠混合液（磷酸二氢钾0.68g+庚烷磺酸钠1.02g加水500ml）-甲醇-三乙胺-三乙醇，所占比例为45∶55∶0.1，磷酸调整pH，使其为3.5；将流速调整至1.0ml/min，波长271nm，柱温25℃，进样量20μL。理论塔板数依据盐酸曲马多峰予以记算，需>1500。

附表 回收率试验结果

2.2 制备溶液 盐酸曲马多对照品25mg干燥至恒重状态称定后，放置于25ml的实验用量瓶中，加入流动相，溶解至刻度摇匀，对1mg/ml的溶液获取，再对5ml精密量取，放置于50ml实验量瓶中，加入流动相，至刻度，对0.1mg/ml的盐酸曲马多对照品溶液获取；取盐酸曲马多缓释片10片研成粉末状，对约为盐酸曲马多50mg的量称取，于规格为50ml的实验用量瓶中放置，加入流动相溶解。适度稀释至刻度，充分混匀、过滤，对过滤液精密量取5ml，放置在50ml的量瓶中，取流动相加入，稀释至刻度，对供试品溶液获取。

2.3 方法学分析 ①线性关系分析：于105℃下，作干燥至恒重处理的盐酸曲马多对照品50mg精密称定后，放置于100ml量瓶中加入流动相稀释至刻度摇匀。对上述对照品溶液分别称取1ml，2ml，5ml，10ml，15ml，20ml，25ml，于规格为100ml的量瓶中放置，取流动相加入予以稀释处理，相应制成浓度为10μg/ml，25μg/ml，50μg/ml，100μg/ml，150μg/ml，200μg/ml，250μg/ml的溶液。分析结果示，峰面积与浓度存在良好的线性关系。得出盐酸曲马多以10～25μg/ml为质量浓度线性范围。②精密度分析：取对照品溶液100μg/ml，连续行进样6次操作，对平均峰面积测取，具体为685958.93，计算RSD为0.23%。③重现性分析：对同一批样品精密称取，共6份，对供试品溶液制备，各取20μL，对峰面积测定，RSD为0.5%；④稳定性分析：配制供试品溶液4h、8h、12h、25h后，依据色谱条件进样，提示25h内，供试品溶液稳定。⑤空白干扰试验：参考处方的实际比例，取与0.5片相当的辅料量，参考含量测定方法，对溶液予以配制，取20μL在液相色谱仪有效注入，在含量测定项下，若盐酸曲马多保留时间处未出现吸收峰，提示空白辅助未对实验构成干扰。⑥回收流试验：对盐酸曲马多对照品分别取约45mg，50mg，55mg，并依次取0.5片处方量的空白辅料加入，充分混合均匀后，于规格为50ml的实验用量瓶中放置，取流动相加入，溶解，过滤，对续滤液称取5ml，于50ml量瓶中放置，取20μl于色谱仪注入。另对呈恒重状态的对照品50mg称取，相同方法予以测定，对含量进行计算。见附表。

2.4 样品含量测定 各取供试品溶液20μl，于色谱仪注入，对盐酸曲马多含量计算，采用HPLC法测定，含量为98.5%。

3 讨论

依据《中国药典》（2000年版二部）中制定的关于盐酸曲马多原料药标准，溶剂取流动相乙酸与乙醇钠缓释液-甲醇应用时，样品表现为较差的溶解性，有较多气泡存在，较难实现定容。盐酸曲马多色谱峰存在一定的拖尾现象。应用磷酸二氢钾与庚烷磺酸钠混合液-三乙胺-甲醇，样口表现出较好的溶解性，行振摇操作时，有少量气泡产生，气泡在5s内呈完全消失显示。故磷酸混合液与庚烷磺酸钠混合液-三乙胺-甲醇（pH值3.5）可发挥作为溶剂和流动相进行使用的最佳效果。盐酸曲马多缓释片为其常用制剂，在保持血药浓度稳定、延长药效时间、降低药物不良反应率方面价值显著[1]。对盐酸曲马多缓释片中所分布的盐酸曲马多含量进行测定，可为临床安全用药提供保障。盐酸曲马多平均回归率为99.7%，HPLC法准确、简便，有较高准确度。