不同药剂对辣椒菌核病菌的抑制效果试验*

杨士杰 占军平

（1.江西省宜春学院生命科学与资源环境学院，江西 宜春 336000；2.江西新龙生物科技股份有限公司，江西 宜春 336000）

辣椒菌核病为大棚辣椒的重要病害之一，发生普遍，一般在3月下旬发病，4～5月为发病高峰期，长时间阴雨天气病害加重，防治不及时常造成减产20%～50%，严重的死苗达70%[1]。长期以来，农户采用化学药剂防治辣椒菌核病，但随着药剂使用年限的延长，辣椒菌核病菌已对多种药剂产生了抗药性。为了了解目前常用药剂戊唑醇、咯菌腈、啶酰菌胺、苯醚甲环唑、烯酰吗啉对辣椒菌核病菌的抑制效果，我们特开展了相关试验，现将试验结果总结如下。

1 材料与方法

1.1 试验材料

供试药剂为97%戊唑醇、95%苯醚甲环唑原药（湖北康宝泰精细化工有限公司生产），98%咯菌腈（上虞颖泰精细化工有限公司生产），96%烯酰吗啉（山东先达化工有限公司生产），95%啶酰菌胺（湖北薪和化工有限公司生产）。2017年从宜春市郊辣椒种植地采集感病辣椒菌核病菌样品，在室内进行单孢分离纯化后得到单孢菌株，通过斜面（4℃）和滤纸片法低温（-20℃）将供试菌株保存在江西省宜春学院植物保护实验室。其他试验仪器和器皿为YXQ-LS-50-SII灭菌器（上海博讯实业有限公司医疗设备厂生产）、SW-CJ-2F型双人双面净化工作台（苏州净化设备有限公司生产）、QHX-40085H-III人工气候培养箱（上海新苗医疗器械制造有限公司生产）、威尔250B生化培养箱（苏州威尔实验用品有限公司生产）、电子万用炉、烧杯、量筒、镊子、试管、酒精灯、漏斗、玻璃棒、游标卡尺等。

1.2 试验方法

采用PDA培养基，成分为马铃薯200 g、葡萄糖20 g、琼脂15～20 g、水1 000 mL。分别将97%戊唑醇、98%咯菌腈、96%烯酰吗啉、95%啶酰菌胺、95%苯醚甲环唑稀释至0.01 μg/mL、0.1 μg/mL、1 μg/mL、5 μg/mL、10 μg/mL、100 μg/mL，然后置于45℃PDA培养基中，制成含药平板，以不加药剂的平板为空白对照。在新鲜的辣椒菌核病菌菌落边缘打取6 mm菌饼，接种于各药剂培养基的平板中央，在23℃黑暗条件下培养72 h。

测量菌落直径，计算菌丝生长抑制百分率，绘制抑菌率变化趋势图，并求出毒力回归方程、相关系数、有效抑制中浓度（EC50值）[2]。抗性水平依据纪明山等的敏感基线值进行判别[3]，菌株EC50值小于0.455 μg/mL为敏感菌株，菌株EC50值处于0.455～0.911 μg/mL为低抗菌株，菌株EC50值处于0.911～3.644 μg/mL为中抗菌株，菌株EC50值大于3.644 μg/mL为高抗菌株。

抑制率（%）=[（对照菌落生长直径-药剂处理菌落生长直径）/（对照菌落生长直径-接种菌的菌饼直径）]×100。

图1 各处理辣椒菌核病菌的抑菌率

2 结果与分析

2.1 各处理对辣椒菌核病菌的抑菌率及抑菌趋势

由图1可知，戊唑醇、咯菌腈、苯醚甲环唑、啶酰菌胺对辣椒菌核病菌抑菌率相对较高，烯酰吗啉的抑菌效果较差，100 μg/mL浓度的抑菌率也仅为45.05%。

2.2 不同药剂不同浓度间的抑菌差异性

根据戊唑醇、咯菌腈、苯醚甲环唑、啶酰菌胺、烯酰吗啉对辣椒菌核病菌的抑制率数值，经方差处理得表1。由表1可见，相同药剂不同浓度间F=48.4＞F0.01（5，20）=4.1，即浓度间差异极显著，不同药剂间F=14＞F0.01（4，20）=4.43，即药剂间差异极显著。

表1 不同药剂不同浓度间抑菌方差分析

2.3 浓度间多重比较

用LSD法做相互比较。v=20时，t0.05=2.086，t0.01=2.845，故LSD0.05=0.094，LSD0.01=0.128。浓度间多重比较结果见表2。由表2可以看出，5 μg/mL与10 μg/mL间和10 μg/mL与100 μg/mL间抑菌率无显著性差异，其他各浓度间抑菌率均存在极显著差异。

表2 不同浓度间与0.01 μg/mL的多重比较

2.4 药剂间多重比较

用LSD法做相互比较。v=20时，t0.05=2.086，t0.01=2.845，故LSD0.05=0.09，LSD0.01=0.120。药剂间多重比较结果见表3。由表3可见，烯酰吗啉与戊唑醇、苯醚甲环唑、啶酰菌胺、咯菌腈间抑菌率均存在极显著差异，咯菌腈与烯酰吗啉间抑菌率存在极显著差异，咯菌腈与啶酰菌胺间、啶酰菌胺与苯醚甲环唑间、苯醚甲环唑与戊唑醇间无显著性差异。

2.5 辣椒菌核病菌与不同药剂间敏感性分析

通过回归统计方法，将浓度转化成对数和百分率转化成几率值，分别求出辣椒菌核病菌与戊唑醇、苯醚甲环唑、啶酰菌胺、咯菌腈、烯酰吗啉敏感相关回归方程和相关系数、抑菌中量EC50。

表3 不同药剂间烯酰吗啉的多重比较

由表4可知，辣椒菌核病菌对戊唑醇的EC50=0.65 μg/mL，大于敏感菌株标准值0.455 μg/mL（纪明山等的敏感基线值划分标准），居0.455～0.911 μg/mL之间，表明辣椒菌核病菌对戊唑醇为低抗；辣椒菌核病菌对苯醚甲环唑和啶酰菌胺的EC50分别为1.16786 μg/mL和2.96226 μg/mL，居0.911～3.644 μg/mL之间，表明辣椒菌核病菌对苯醚甲环唑和啶酰菌胺为中抗；辣椒菌核病菌对咯菌腈和烯酰吗啉的EC50分别为5.1999 μg/mL和217.76 μg/mL，均大于高抗标准值3.644 μg/mL，表明辣椒菌核病菌对咯菌腈、烯酰吗啉为高抗，辣椒菌核病菌对烯酰吗啉的EC50值为高抗标准值3.644 μg/mL的59.75倍。

表4 辣椒菌核病菌对各参试药剂的敏感相关回归方程和相关系数、ED50值

3 小结

试验结果表明，辣椒菌核病菌对戊唑醇表现为低抗，抑菌效果较好；辣椒菌核病菌对苯醚甲环唑、啶酰菌胺表现中抗，建议生产中尽量少用这两种药剂；辣椒菌核病菌对咯菌腈、烯酰吗啉已产生较高抗药性，生产中不宜采用这两种药剂。防治辣椒菌核病时，可采用药效较好的戊唑醇与其他药剂交替使用，以尽量延缓病菌产生抗药性的时间。同时应综合考虑环境、作物以及药剂等因素，筛选出最佳的药剂浓度。进一步比较EC50值可知，辣椒菌核病菌为低抗菌，生产上不宜在同一目标作物上频繁使用同种药剂。