P53及RasP21蛋白在胃癌组织中的表达及其临床意义

周红林，岳文彬，李伟芳，金 静，段丛迪 (濮阳市油田总医院肿瘤二科，河南 濮阳 457000)

胃癌的发生、发展是在多种致癌因子的协同作用下，多基因变异逐渐累积而成，明确各种致癌因子的作用机制和相互之间的关系对于探索胃癌的形成并阻断其远处转移有重要意义[1]，P53、RasP21基因一直是临床探究肿瘤发生、发展过程中的研究重点，本研究旨在通过检测分析P53、RasP21基因在胃癌组织中的表达水平，判定两者在胃癌发展过程中的意义，现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1临床资料选取我院2014年至2016年行手术切除的胃癌组织石蜡标本30例，其中男18例，女12例；年龄35～78(55.0±5.0)岁；低分化癌15例，中分化癌7例，高分化癌8例。另选取20例正常胃黏膜组织标本作为对照，其中男12例，女8例；年龄35～78(55.0±5.0)岁。

1.2方法使用EnVision免疫组化染色法检测P53及RasP21蛋白在20例正常胃黏膜和30例胃癌组织中的表达水平，其中抗原组织修复液为柠檬酸盐缓冲液(pH=6.0)，一抗选择鼠抗人P53单克隆抗体及RasP21单克隆抗体，二抗为羊抗鼠FITC-IgG，工作液浓度1100。

1.3结果判断根据每张切片的阳性细胞数比例和着色深浅计分进行判断，不着色为0分，浅棕色为1分，棕色为2分，深棕色为3分，阳性细胞百分比<10%为0分，10%～<25%为1分，25%～<50%为2分，50%～<75%为3分，≥75%为4分，最终结果为2项结果之和，≤1分为阴性，2～3分为弱阳性，4～5分为阳性，>5分为强阳性[2]。

1.4统计学处理采用SPSS 15.0进行统计分析，计数资料以百分数表示，比较用χ2检验，相关性分析用Spearman相关分析，检验水准α=0.05。

2 结果

正常胃黏膜组织中P53、RasP21蛋白表达均为阴性(0.0%和0.0%)，明显低于胃癌组织中的阳性表达率(83.3%、70.0%，P<0.05)。胃癌组织中P53、RasP21蛋白阳性表达率与胃癌组织的分化程度有关(P<0.05)，随着分化程度的进展，阳性表达率逐渐升高。胃癌组织中P53蛋白表达与RasP21蛋白表达呈正相关关系(r=0.801，P<0.05)。见表1。

表1 不同胃组织中P53、RasP21蛋白阳性表达率比较 n(%)

3 讨论

RasP21蛋白是具有广泛抑制活性酶的细胞周期抑制蛋白，在细胞周期中具有双重的抑制作用，在正常组织中，只存在少量激活状态的RasP21蛋白，维持细胞的正常分化，当Ras发生突变时可使基因活化导致其产物P21蛋白表达过量[3-4]，在人类的多种肿瘤组织中均发现Ras基因的突变及P21蛋白的高表达，经临床大量研究[5-6]证实Ras基因的突变与肿瘤的发生有密切关系，且Ras基因的表达强度与肿瘤的分化程度和肿瘤生长有关，胃癌的发生、发展与Ras发生突变后形成P21蛋白有密切关系。Kim等[7]的研究表明P21蛋白的表达与胃癌的远处转移呈正相关。

本研究结果显示，正常胃黏膜组织中RasP21蛋白表达为阴性，明显低于胃癌组织(P<0.05)。胃癌组织中RasP21蛋白阳性表达率与胃癌组织的分化程度有关(P<0.05)，随着分化程度的进展，阳性表达率逐渐升高。这证实了RasP21蛋白的表达可作为判断胃癌分化程度的一个重要指标。

P53基因是一种抑癌基因，可通过抑制细胞的增殖参与细胞周期的调节，当P53蛋白发生基因突变时使其失去了对DNA的亲和力，细胞抑制能力下降，失去了抗肿瘤活性，因此，P53突变与肿瘤的形成密切相关[8]。临床研究[9-10]证实突变型P53蛋白的表达与胃癌的分化、转移和浸润等生物学行为有关，肿瘤的恶化程度越高，P53蛋白的表达水平就越高。本研究结果显示，正常胃黏膜组织中RasP21蛋白表达为阴性，明显低于胃癌组织(P<0.05)。胃癌组织中RasP21蛋白阳性表达率与胃癌组织的分化程度有关(P<0.05)，随着分化程度的进展，阳性表达率逐渐升高。这也再次证明了上述观点。

本研究结果还显示，胃癌组织中P53蛋白表达与RasP21蛋白表达呈正相关关系(r=0.801，P<0.05)。这与张宏等[6]的研究结果一致，经分析原因可能是P53基因与RasP21基因具有相互调节的作用。本研究证实P53及RasP21蛋白在胃癌组织中高表达，与肿瘤的分化程度有关，随着分化程度的进展，阳性表达率逐渐升高，且两者在胃癌组织中有共同表达现象，提示两者与胃癌的分级和分期相关，推测RasP21蛋白可通过作用于P53来促进肿瘤的发生、发展，当然，两者的内在联系需要进一步证实。