多种测序技术在药品检测环境微生物鉴定分析中的应用研究

周政

[摘要]目的：对多种测序技术进行研究，探究多种测序技术在药品检测环境微生物鉴定分析中的作用。方法：在12个月中对微生物实验室进行连续的样本采集，共采集了10株细菌和11株霉菌，把采集的细菌和霉菌采用一代测序技术、生化鉴定技术分别进行测定，将这两种方法所得的结果进行交叉对比分析，保证是研究结果的准确。结果：通过对一代测序技术和生化鉴定技术测定的测定结果的比较，发现了4株水平分类的细菌；通过生化鉴定测得了5株霉菌的信息；一代测序测得4株霉菌的信息，一代测序比生化鉴定少测了一种霉菌；结论：通过对实验结果的对比可知生化鉴定技术在鉴定特异性菌种时有着不俗的表现，但鉴定特异性不强的菌种时准确率不高；一代测序技术可以对菌株进行基因测序，但在特异性区分时不如生化测定的效果好，所以为了保证药品生产时的安全，减少药品被污染的可能性我们可以利用多种测序技术进行检测结果的交叉对比，从而更好的对药品检测环境进行微生物的鉴定分析，降低微生物污染。

[关键词]多种测序技术 药品检测环境微生物鉴定分析 应用

在药品生产中很容易出现微生物污染药品的情况，微生物污染药品会对药品的临床作用造成影响，不利于病人的治疗。但由于医疗技术和经济基础的局限在生产药品时很难做到无菌生产，而且在药品生产的合格标准是对空气中的浮游细菌的数量进行判断。这种标准很难查找细菌的源头，不能从源头上对细菌进行控制，随着生物学和分子学的共同发展，涌现了很多先进的微生物测定方法，新一代的测序技术也开始出现，在微生物的测定和分析领域得到了很大的进步，所以为了增加微生物检测的准确度，在进行微生物检测时逐步开始使用多种测序技术对药品生产环境进行检测，并将检测结果进行交叉对比来获取最终的微生物检测结果。本文通过多种测序技术进行探究，利用多种测序技术对药品生产环境中的微生物数量进行测定，探讨多种测序技术在药品检测中微生物含量检测中应用的意义，为药品生产中减少细菌污染提供一定的技术支持。

一、资料与方法

（一）资料数据

本次实验中所应用的菌种由本院微生物实验室不同的研究员在不同的位置使用胰蛋白胨大豆琼脂平板进行采集。本次实验所使用的菌株是本院在12个月内所采集的，共采集了10株细菌和11株霉菌，所有的菌株标本在采集后都经过了纯化，标本不存在相互污染的现象。

（二）方法

采用一代测序技术、生化鉴定技术分别进行测定，将这两种方法所得的结果进行交叉对比分析。

（1）生化鉴定技术测定：首先对10株细菌进行常规的生化检测，在对10株细菌样本进行检测时，检测操作严格遵守相关规定和说明书。

（2）一代测序技术：首先要对所有菌株的DNA进行扩增鉴定，在操作过程中要严格按照操作标准和基因分析鉴定系统的试剂、说明书进行操作。在操作时要对菌株的DNA进行提、扩增和纯化，利用数据库中的菌株信息对10个菌株的种属进行对比鉴定。

将所有的菌株按照以上两种方式进行测定，对这两种方式进行分析，确定鉴定结果的科学有效。

（三）评价指标

使用两种方法对10株细菌和11株霉菌的种属进行测定，验证多种测序技术的有效性。

二、结果

（1）细菌的种属测定结果：把一代测序技术和生化鉴定技术测定的测定结果进行交叉比较发现，有4株水平分类的细菌；

（2）霉菌的种属测定结果：通过生化鉴定测得了5株霉菌的信息；一代测序测得了4株霉菌的信息，比生化鉴定少测了一种霉菌；

三、讨论

目前的药品生产企业在生产药品时很容易出现药品被微生物污染的情况，药品被微生物污染会严重影响药品的质量，如果患者服用被污染过的药物不仅不能治疗自身的疾病而且还有可能会引发并发症，威胁自身的健康。所以对药品生产进行监管是十分重要的，但由于医疗技术和经济基础的局限在生产药品时很难做到无菌生产，而且在药品生产的合格标准水对空气中的浮游细菌的数量进行判断的，这种检验保准有很大的漏洞，不能保证药品不受污染。通过本文的研究发现，不同的微生物检测技术都有着自己的优势和弱项，通过对多种测序技术的结果进行交叉对比可以嘉禾每种卫生我检测技术的优势和弱势进行优势互补，从而更好的检测药品生产环境中微生物的数量，降低药品被微生物污染的概率提高药品安全。本文通过对多种测序技术在药品检测环境中进行微生物鉴定分析得知，生化鉴定技术在鉴定特异性菌种时准确率很高，但鉴定特异性不强的菌种时准确率不高；一代测序技术可以对菌株进行基因测序，但对菌种进行特异性区分时不如生化测定的效果好。所以，在对药品检测环境中进行微生物鉴定分析时可以将多种测序技术进行应用，上文提及的两种微生物检测方法各有优劣，通过交叉检测可以使这两種方式进行互补，提高检测精度。