低密度脂蛋白胆固醇匀相法与公式法间移动相关系数的研究

陈宣男 王志富 蔺亚晖

[摘要] 目的 观察血脂含量对血清低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）匀相法与公式法相关性的影响，比较LDL-C匀相法与五种公式法结果间的相关性，探讨公式法的临床应用价值。 方法 募集2014年5月～2014年7月阜外医院就诊的患者17 488例，采用贝克曼AU5421全自动生化分析仪测定载脂蛋白（ApoB）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、LDL-C和三酰甘油（TG）。利用移动相关系数（Mr）观察血脂含量对LDL-C匀相法与公式法相关性的影响，同时观察匀相法与公式法的相关性和差异性。 结果 LDL-C匀相法和5种公式法的结果存在强相关（r > 0.95，P < 0.05），中位数偏差在-3.065～-8.145%，差异有统计学意义（P < 0.05），Mr与ApoB、TC和HDL-C血清含量呈同向变化，在LDL-C中先下降后升高，在TG中先恒定后下降。Delong法、胡柏成法和吴秀茹法与LDL-C匀相法相关性最强（r = 0.97，P < 0.05）。同时还发现，LDL-C与ApoB和TC呈强相关，（r = 0.92，P < 0.05）。 结论 公式法与匀相法测定值呈显著相关性，差异有统计学意义（P < 0.05）。如果有条件，建议实验室均采用匀相法进行检测。

[关键词] 低密度脂蛋白胆固醇；移动相关系数；匀相法；Friedewald公式

[中图分类号] R446.112 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2018）06（c）-0163-04

[Abstract] Objective To observe the effect of lipid levels on the correlation between homogeneous and formula assays for measuring low-density lipoprotein cholesterol （LDL-C）， and compare the relationship and difference between homogeneous and five formula assays， in order to explore the clinical application of formulas. Methods From May 2014 to July 2014， total 17 488 patients from Fuwai Hospital were recruited. All of apolipoprotein B （ApoB）， total cholesterol （TC）， high-density lipoprotein cholesterol （HDL-C）， LDL-C and total triglyceride （TG） were measured by an automatic biochemical analyzer （AU5421， Beckman）. The moving correlation coefficients （Moving r， Mr） were computed to evaluate lipid effects on the correlation between homogeneous assay and formulas. Meanwhile， observe the correlation and the difference between different methods. Results There were strong correlations between five formulas and homogeneous method （r > 0.95， P < 0.05）. Biases of median ranging were from -3.065% to -8.145%， the differences were statistically significant （P < 0.05）. Mrs changed with levels of ApoB， TC and HDL-C， which decreased firstly， then increased with LDL-C level， and hold constant， then decreased with TG level. The correlations between Delong， Hu Bocheng and Wu Xiuru methods were the strongest （r = 0.97， P < 0.05）. It was also found that LDL-C was correlated with ApoB and TC levels （r = 0.92，P < 0.05）. Conclusion There are significant correlations as well as the differences were statistically significant （P < 0.05） between the homogeneous assay and the formulas. It is recommended that the laboratory would employ the homogeneous assay.

[Key words] Low density lipoprotein cholesterol； Moving correlation coefficient； Homogeneous assay； Friedewald formula

《中國心血管病报告2016》显示心脑血管疾病已成为居民死亡的首要病因[1]。低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）是心脑血管疾病的独立危险因素[2-5]。美国国家胆固醇教育计划（National Cholesterol Education Program，NCEP）也将LDL-C含量作为治疗高脂血症的决策标准。目前LDL-C测定方法分为匀相法和公式法，前者适合自动化分析，能满足临床要求；后者由血脂其他实测指标计算获得，简便、快速、经济，但也存在许多限制，如乳糜血、M型脂蛋白血症时，由于载脂蛋白（ApoB）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、LDL-C和三酰甘油（TG）等测量误差增大，导致公式法不准，甚至不能应用。本研究通过比较匀相法和公式法的相关性和差异性，探索LDL-C匀相法与公式法在不同ApoB、TC、HDL-C、LDL-C和TG水平下的变化趋势，为正确使用公式提供参考依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

检索2014年5月～2014年7月在中国医学科学院阜外医院就诊患者的血脂数据。

1.2 检测方法

清晨空腹静脉取血5 mL，血液自然凝固后，3000 r/min离心10 min分离血清。利用贝克曼AU5421全自动生化分析仪检测血脂含量。LDL-C公式法如下[6]：

Friedewald法[7]：LDL-C（mmol/L） = TC - HDL-C - 0.45TG；

Delong法[8]：LDL-C（mmol/L）= TC - HDL-C - 0.37TG；

Planella法[9]：LDL-C（mmol/L）= 0.43TC - 0.32TG + 1.7ApoB - 0.27；

胡柏成法[10]：LDL-C（mmol/L）= 0.87TC - 0.9HDL-C - 0.32TG + 0.274；

吴秀茹法[11]：LDL-C（mmol/L）= 0.87TC - 0.9HDL-C -0.33TG + 0.27。

1.3 移动相关系数（Moving r，Mr）

观察匀相法和公式法相关系数在不同血脂含量下的变化趋势。本研究中的Mr定义为随第三变量动态变化的另外两变量子集的相关系数。如观察不同TG含量对LDL-C匀相法和Friedewald法相关系数的影响，按TG含量排序，顺序选取1-2000号的2000个样本计算匀相法和Friedewald法相关系数，并计算中位数，然后选取2-2001号的2000个样本计算相关系数和中位数，依次类推，以2000样本量为窗口，按TG含量顺序计算相关系数和中位数，最后以中位数为横坐标，相关系数为纵坐标描绘LDL-C匀相法和Friedewald法相关系数随TG含量的变化曲线。

1.4 统计学方法

采用R3.4.2统计学软件进行数据分析，非正态分布数据采用中位数（M）和四分位数间距（Q）进行统计描述，用配对Wilcoxon符号秩检验比较组间差异，用Spearman秩相关进行相关性检验。双侧检验，以P < 0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1 基本信息

共收集了17 488例来阜外医院就诊患者的血脂数据，年龄和血脂呈非正态分布（Kolmogorov-Smirnov正态性检验，P < 0.01），采用中位数和四分位数间距进行统计描述。见表1。

2.2 LDL-C匀相法与公式法各参数的相关性

LDL-C与ApoB和TC相关性较高（r = 0.92，P < 0.05），与HDL-C和TG相关性较低（r = 0.21、0.10，P < 0.05）。见图1。

2.3 匀相法与公式法Mr曲线

5组Mr随ApoB、TC和HDL-C血清含量的升高而升高，在LDL-C<2.2 mmol/L时，Mr随LDL-C升高而降低，在LDL-C>2.2 mmol/L时，Mr随LDL-C升高而升高，在LDL-C>3.5 mmol/L时呈线性增加。TG<3.5 mmol/L时，Mr维持恒定，当TG>3.5 mmol/L时，Mr逐渐下降。见图2，封四。

2.4 匀相法与公式法的相关性和差异性

5种LDL-C检测法间均具有显著相关性（r > 0.95，P < 0.05），其中Delong法、胡柏成法和吴秀茹法与匀相法相关性最强（r = 0.97，P < 0.05）。见图3。公式法与匀相法中值差异有统计学意义（P < 0.05）。见表2。

3讨论

本研究首次利用Mr描述血脂浓度对LDL-C匀相法与公式法相关性的影响，在大样本人群中绘制了Mr变化曲线。发现Mr在ApoB、TC和HDL-C中呈递增变化，在LDL-C中先降后升，在TG中先水平后下降。同时发现，公式法与匀相法差异有统计学意义（P < 0.05）。

LDL-C的参考方法是美国疾病控制预防中心推荐的β定量法[12]，精准度高，重复性好，但需要超速离机，技术难度大，不适合临床常规工作。1972年提出的Friedewald公式[7]（F公式）计算的LDL-C与参考方法相关性很强，被NCEP推荐作为实验室LDL-C常规测定法而广泛使用。随后又有多人提出了LDL-C计算公式。但均存在前提条件：如不能存在乳糜微粒，TG主要包含在VLDL中，VLDL-C/TG恒定等。公式法中血脂参数任测定不准会影响计算结果[13-15]。

文獻回顾[16-17]发现，在TC、TG和HDL-C符合NCEP性能要求的条件下，TG<2.26 mmol/L时F公式结果较可靠。TG在2.26～4.52 mmol/L时，除部分继发性高脂蛋白血症标本外，大部分结果可接受。TG>4.52 mmol/L、Ⅲ型高脂蛋白血症[18]、乳糜微粒（CM）血症和异常脂蛋白血症时结果不可靠。本研究通过Mr发现，F公式的可靠性呈连续性变化，在TG<3.5 mmol/L时比较可靠，随后随着TG增高相关性急剧下降，证实了前人的观察结果。Mr比分段分析能更详尽的描绘LDL-C匀相法与公式法相关性随观察指标的血清含量的动态变化，更加直观和准确。

Mr分析发现，匀相法和公式法的相关性在LDL-C中呈开口向上的抛物线，实测LDL-C约2.2 mmol/L时，相关性最低。当大于3.5 mmol/L后呈线性增长，可能是由于LDL-C在TC中所占的比例改变所致。随着LDL-C含量升高，TC中干扰成分比例下降，使公式法与匀相法越来越一致。但在极低LDL-C浓度时，相关系数呈现下降的趋势有待进一步研究。

公式法均未考虑中间密度脂蛋白（IDL）和载脂蛋白a[LP（a）]中的胆固醇对计算结果的影响[19-20]，正常人血清中IDL-C很少，但血脂紊乱患者TG和IDL常升高，高TG血症患者中IDL-C也常增加，血清LP（a）升高也会伴有LDL-C升高，这些情况下公式法无法计算出可靠的LDL-C值，但匀相法测定的LDL-C包含了IDL和LP（a）中的胆固醇，比公式法更可靠。因此，NCEP建议分析性能不符合标准的实验室应使用更精准的LDL-C匀相法。中华医学会检验分会血脂专家委员会制订的《关于临床血脂测定的建议》也推荐匀相法作为临床实验室测定LDL-C的常规方法[21]。通过Mr分析发现，干扰因素对公式法的影响呈渐变趋势，只有在某些范围内才和匀相法呈强相关。本研究为加速匀相法推广，使公式法尽快退出历史舞台提供了强有力的证据。

綜上所述，就5种公式法比较而言，在分析性能达标的实验室，可用Delong法、胡柏成法和吴秀茹法计算LDL-C含量。但若标本ApoB、TC、HDL-C含量过低或TG含量过高，则应使用均相法测定。

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