郑雨,魏琳,邓薇,李雪,宫汝淳,苗婷婷
摘要:探讨西兰花提取液对二甲基甲酰胺(DMF)诱导小鼠急性肝损伤模型的保护作用。方法:60只小鼠随机分为空白对照组、模型组、高、中、低浓度组及阳性药物组。通过DMF致小鼠肝损伤,测定小鼠血清中GPT、GOT及GSH的含量。结果显示:西兰花提取液能显著抑制DMF所致急性肝损伤小鼠血清中的GPT、GOT含量的升高,还可以促进GSH含量的升高,且有明显促进肝功能恢复的作用。光镜下可见西兰花提取液明显改善肝组织损伤程度。结论:西兰花提取液对DMF引起的小鼠肝损伤具有保护作用。
关键词:西兰花提取液;二甲基甲酰胺;肝损伤
基金项目:吉林省大学生创新创业训练计划(编号: 2017093039)
中图分类号: R730 文献标识码: A DOI编号: 10.14025/j.cnki.jlny.2018.18.023
西兰花又名绿菜花、意大利芥兰等,是一年生或越年生草本植物[1]。西兰花含有丰富的营养成分,如植物性优质蛋白质、脂肪、矿物质、维生素、胡萝卜素、类黄酮、硒等,最突出的有效成分是芥子油苷和黄酮类化合物[2]。据报道,西兰花对保护血液有益,能解毒肝脏、预防高血压、清化血管、增强机体免疫力[3]。近年来西兰花防癌抗癌的作用被重点研究,但是还有很多值得被研究的药理作用。本实验通过DMF致小鼠肝损伤,测定小鼠血中GPT、GOT及GSH的含量,探讨了西兰花提取液对小鼠急性肝损伤的保护作用,为进一步研究西兰花的药用价值提供理论依据。
1 实验材料
1.1实验动物及药品
健康CD小鼠60只,雄性,体重(18±2)g。
二甲基甲酰胺,护肝片,微量还原型谷胱甘肽测试盒,谷丙转氨酶测试盒,谷草转氨酶。
1.2 实验仪器
徕卡冰冻切片机;生物显微镜;半自动生化分析仪;离心机等。
2实验方法
2.1西兰花提取液制备
将西兰花90g,加水910ml,置于文火煮30min,过滤,反复3次,合并3次滤液得到高浓度西兰花提取液,分别稀释,得到中、低浓度西兰花提取液。
2.2动物分组及给药
将小鼠随机分为6组,模型组和高、中、低浓度组用DMF进行造模,浓度为2.5g/kg,早、晚各一次;空白组灌胃等体积蒸馏水,共7d。造模完成灌胃西兰花提取液,高、中、低浓度组分别灌胃浓度为9%的西兰花提取液,阳性药物组灌胃浓度为0.0175g/mL的护肝片。15d后取各组小鼠进行断头取血,制备血清用于谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)和还原型谷胱甘肽(GSH)的检测,然后对肝组织切片进行观察。
2.3冰冻切片的制作
小鼠断头取血后,剖腹分离出肝脏组织,置于10%戊二醛中,然后用包埋剂包埋,冰冻切片机切5um厚切片,利用结晶紫染色。
2.4生化指标的测定
药物入血15d,断头取小鼠血0.5ml离心1min,12000r/min,取上清液用半自动生化分析仪测血清中GPT、GOT、GSH含量的变化。
2.5数据处理
采取SPSS数据处理系统,进行t检验,结果以(x±s)表示。
3 结果与分析
3.1西兰花提取液对小鼠血清中GPT、GOT、GSH含量的影响
GPT、GOT、GSH的绝对OD值(x±s)
从上表可以看出:西兰花提取液高浓度组、阳性药物组的GPT、GOT、GSH的OD值与模型组和空白组比较有极显著差异(P<0.01),中浓度组与模型组和空白对照组比较有显著差异(P<0.05),而低浓度组没有差异。
3.2 西兰花提取液对小鼠肝组织形态学的影响
将染色后的切片在(10×10)倍显微镜下进行观察,结果见图1。
观察空白组和阳性药物组小鼠肝脏,可见肝脏呈红褐色,表面光滑,肝细胞体积较大,排列紧密,显微镜下肝细胞较饱满,无破裂的细胞或坏死的细胞;模型组小鼠肝脏表面硬度较大,轻度水肿,有略微黑色,显微镜下可见大面积的细胞坏死,还可见皱缩的肝细胞、破裂的细胞核以及细胞碎片;高、中、低浓度组小鼠肝脏可见肝脏表面呈红褐色,表面尚光滑,肝脏均有略微黑色,部分肿胀,在显微镜下可见少数破裂的细胞和坏死的细胞。
4 讨论与结论
肝脏是以代谢为主的器官,在身体里扮演着去毒素,储存糖原,分泌性蛋白质合成等角色,谷丙转氨酶升高是肝脏功能出现问题的一个重要指标,在常见的因素里,各类肝炎都可以引起谷丙转氨酶升高,这是由于肝脏受到破坏造成的。谷草转氨酶是肝功能检查中的一项重要指标,在肝细胞与心肌细胞内均存在,心肌细胞中含量高于肝细胞,但肝脏损害时谷草转氨酶血清浓度也可升高。还原型谷胱甘肽是人类细胞质中自然合成的一种肽,由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸组成,含有巯基(-SH),广泛分布于机体各器官内,对维持细胞生物功能有重要作用。在本实验中西兰花提取液可以抑制小鼠血清中GOT、GPT含量的升高,还可以促进GSH含量的升高,对各项指标均有不同程度的改善。
西兰花提取液对二甲基甲酰胺致小鼠肝损伤有一定的保护作用,可以用西兰花制成護肝药物,为进一步分析西兰花提取液对小鼠肝损伤的影响提供理论依据。
参考文献
[1]李向果.西兰花叶中硫代葡萄糖苷和原花青素的生物学效价评定[D].甘肃农业大学,2013:23-3.
[2]洪姣,王佳蕊,黄春琦,等.西兰花预防和治疗肿瘤研究的新进展[J].肿瘤药学,2014(06):405-409.
[3]钱丽丽,刘江丽,李扬,等.西兰花中硫代葡萄糖苷的提取及抑菌实验初报[J].中国农学通报,2008(02):335-338.
作者简介:郑雨,在读本科生,研究方向:动物生理及药理。
通讯作者:苗婷婷,硕士研究生,实验师,研究方向:动物生理及药理。