MTHFR和MTRR基因多态性与宁夏高血压患者血浆同型半胱氨酸水平的相关性分析

田进海 李璞 张旭 黄琦 姜敏

【摘要】目的 研究MTHFR和MTRR基因多态性对高血压患者血浆同型半胱氨酸水平的影响。方法 选择2016年1月至2017年12月宁夏医科大学总医院高血压患者798 例作为研究对象，检测血浆同型半胱氨酸（Hcy），采用高分辨率溶解曲线法（HRM）检测MTHFR（rs1801133、rs1801131）和MTRR（rs1801394）基因型。结果 rs1801133、rs1801131和rs1801394不同基因型间同型半胱氨酸水平具有统计学差异（P<0.05）；Hcy正常组和异常组在rs1801133、rs1801131基因型存在统计学差异（P<0.05），在rs1801394基因型不存在统计学差异（P>0.05）。结论 MTHFR和MTRR不同基因型对宁夏人群高血压患者血浆同型半胱氨酸水平有影响，对高血压预防和临床治疗具有积极意义。

【关键词】MTHFR；MTRR；高血压；同型半胱氨酸；基因型

【中图分类号】R541_4 【文献标识码】B 【文章编号】ISSN.2095.6681.2018.05.14..02

亞甲基四氢叶酸还原酶（MTHFR）是甲硫氨酸-叶酸代谢通路中的关键酶，与甲硫氨酸合成还原酶（MTRR）一起，维持机体内叶酸正常代谢。另外，它们还参与维持体内正常的同型半胱氨酸（Hcy）水平。MTHFR C677T（rs1801133）、A1298C（rs1801131）和MTRR A66G（rs1801394）位点的不同基因型对这两种酶活性影响比较大，使得叶酸代谢关键酶活性降低，引起叶酸代谢障碍，造成叶酸水平降低及高同型半胱氨酸血症[1]。对于MTHFR基因异常的人，MTHFR酶活性明显降低，造成叶酸代谢障碍，导致新生儿神经管畸形、唐氏综合症、唇腭裂及心血管等疾病的发病风险明显增高[2]，这类人需要补充更多的叶酸才能达到预期的效果。高同型半胱氨酸是高血、脑卒中及冠心病等心血管疾病的危险因素[3]，因此研究MTHFR和MTRR在高血压人群的分布特征及对血浆同型半胱酸水平的影响对预防心血管疾病具有重要意义。

1 材料与方法

1.1 一般资料

选择2016年1月至2017年12月宁夏医科大学总医院高血压患者798作为研究对象。高血压诊断按照《中国高血压防治指南2010》的诊断标准，收缩压≥ 140 mmHg或舒张压≥90 mmHg。排除肝肾功能异常、患有其他心血管疾病的及其他严重疾病史的患者。

1.2 同型半胱氨酸测定

选用欧普兰公司OP-162 微量荧光检测仪检测血浆同型半胱氨酸水平。

1.3 基因分型

采用Promega试剂盒（Wizard，Genomic DNA Purification Kit）提取DNA，针对MTHFR和MTRR位点设计特异性引物rs1801133（F：5-TGAAGGAGAAGGTGTCT GCGGA-3，R：5-AGGACGGTGCGGTGAGAGTG-3）、rs1801131（F：5-CTTTGGGGAGCTGAAGGACTACTA-3，R：5-CACTTTGTGGACCATTCCGGTTTG-3）和rs1801394（F：5-GCAAAGGCCATCGCA GAAGACAT -3，R：5-GTGAAGATCTGCAGAAAATCCATGTA-3），利用Roche480仪器，采用高分辨率溶解曲线（high-resolution melting，HRM）法检测三个位点的基因型。

1.4 统计分析方法

采用SPSS 23.0统计学软件对数据进行分析。计量资料以“x±s”表示，应用t检验，计数资料以百分数（%）表示，采用x2检验。以P<0.05为差异有统计学有意义。

2 结 果

2.1 MTHFR和MTRR基因型对血浆同型半胱氨酸水平的影响

结果显示，rs1801133 TT基因型Hcy水平最高，其次是CT基因型，CC基因型Hcy水平最低。rs1801131 CC基因型Hcy水平最高，AC基因型次之，AA基因型较低。Hcy水平在各基因型间差异具有统计学意义（P<0.05）。rs1801394位点AG和GG基因型Hcy水平相对较高，差异具有统计学意义（P<0.05）。见表1。

2.2 同型半胱氨酸水平正常组和异常组的基因型差异比较

rs1801133和rs1801131的基因型在Hcy正常组和异常组差异具有统计学差异（P<0.05），rs1801394在Hcy正常组和异常组间没有统计学差异（P>0.05）。见表2。

3 讨 论

血液中Hcy浓度的升高受遗传、环境、饮食等多因素影响，在忽略环境等外部因素的影响下，相关代谢酶的基因突变引起该酶缺陷或活性下降，进而导致Hcy升高可能是发病的主要原因之一。高同型半胱氨酸是众多心血管疾病发生的危险因素之一，对人类健康产生严重的威胁，高同型半胱氨酸可能与动脉粥样硬化、脑卒中及冠心病的发生密切相关[4]，高血压是这些疾病的病理基础。研究高血压患者血浆同型半胱氨酸水平对预防心血管疾病至关重要，MTHFR 和MTRR 基因突变造成酶活性降低是血浆同型半胱氨酸积累的遗传因素，搞清楚它们之间的这种内在关系对预防和治疗心血管疾病有很大帮助。我们研究发现宁夏人群高血压患者的rs1801133位点CT 和TT 基因型，rs1801131位点的CC和AC基因型是血浆高同型半胱氨酸主要影响因素，此外rs1801394位点的GG和AG基因型同样对血浆同型半胱氨酸的积累产生影响，这三个位点对高血压患者的Hcy水平的影响是显著的。

综上，MTHFR和MTRR基因多态性对高血压患者血液Hcy水平的影响是显著的，对包括高血压在内的心血管疾病的预防及治疗具有重要意义。

参考文献

[1] 邓颖芳，王丽丽，田萌萌，等.高同型半胱氨酸（Hcy）血症患者的叶酸缺乏与MTHFR、MTRR基因多态性情况分析[J].中国分子心脏病学杂志，2015，（5）：1463-1465.

[2] 侯书宁.叶酸基因多态性和唐氏综合征高危风险之间的相关性研究[J].国际检验医学杂志，2016，37（22）.

[3] 刘小艳，刘 涛.同型半胱氨酸及其代谢酶基因多态性与冠心病的关系[J].中国动脉硬化杂志， 2018（1）.

[4] Zhang R，Huo C，Wang X，et al.Two Common MTHFR Gene Polymorphisms （C677T and A1298C） and Fetal Congenital Heart Disease Risk：An Updated Meta-Analysis with Trial Sequential Analysis[J].Cell Physiol Biochem，2018，45：2483-2496.

本文编辑：吴宏艳