番茄红素茶多酚组合物抗辐射作用研究

郑侠　袁根良　杨晓惠　殷光玲

[摘要]研究番茄红素茶多酚组合物对小鼠辐射危害的辅助保护作用。方法：按照《保健食品檢验与评价技术规范》（2003年版）“对辐射危害有辅助保护功能试验”的相关规定，选用昆明种雄性小鼠，设低、中、高三个剂量组，分别为样品人体推荐剂量5倍、10倍、30倍，另设辐射模型对照组。结果：外周血白细胞计数实验结果阴性，小鼠骨髓细胞微核实验结果阳性，血清溶血素含量实验结果阳性。结论：根据判定原则，认为样品番茄红素茶多酚组合物对小鼠的辐射危害有辅助保护功能。

[关键词]番茄红素；茶多酚；小鼠；辐射

中图分类号：TS201.3 文献标识码：A DOI：10.16465/j.gste.cn431252ts.20180406

辐射损伤是由电离辐射引起的急性、慢性或迟发性的机体损伤…。随着电子产品的迅速普及，人们日常生活中接触辐射的机会越来越多，遭受辐射损伤的可能性也随之增加。目前有多种辐射防护药物，但大多存在毒副作用大，防护效价低等缺点[2-5]。因而寻找安全、有效的抗辐射损伤食品原料日渐紧迫。已有研究表明番茄红素和茶多酚都具有一定的抗辐射作用，本实验将两者按一定比例混合使用，以考察番茄红素茶多酚组合物的抗辐射作用。

1实验材料

1.1药品及试剂

番茄红素（乐康瑞德食品添加剂（常州）有限公司，20120331）、茶多酚（安徽红星药业有限责任公司，20140217-2）、预胶化淀粉（戴纬林国际贸易（上海）有限公司，130401A）、二氧化硅（广州荣启贸易有限公司，130701）。

1.2仪器

电子天平BS223S（北京赛多利斯公司，50961567）、电子秤ACS--3A型（上海太和衡器厂，10400365）、台式离心机Mikr022（HETrlCH公司，105）、血液分析仪XT-2000i（希森美康，66541）。辐照装置：¹³⁷Csγ辐射源，Gaminacell-40（加拿大Nurdion公司），放射源出厂活度为1.27×10¹⁴Bq，现吸收剂量率为0.75Gy/min。

1.3实验动物

昆明种小鼠，雄性，18～22g，120只，由上海杰思捷实验动物有限公司提供，许可证号：SCXK（沪）2013-0006。实验动物饲养室温度20℃～25℃，相对湿度40%～70%，实验动物使用许可证号：SYXK（沪）2013-0008。

2实验方法

2.1番茄红素茶多酚组合物的制备

取番茄红素380g、茶多酚112g、预胶化淀粉400g、二氧化硅8g混合均匀得900g番茄红素茶多酚组合物。小鼠灌胃前用蒸馏水按比例稀释至所需浓度。

2.2分组与给药

取昆明种小鼠120只，逐只称重，按体重分层随机分为12组，每组10只。以每四组为一个实验组，随机分为1个辐射模型对照组和3个受试样品剂量组。连续灌胃30d，3个剂量组灌胃给予不同浓度受试样品，辐射模型对照组灌胃给予溶剂（蒸馏水）。30d灌胃结束后进行白细胞计数实验、骨髓细胞微核实验、血清溶血素实验。

本品成人（体重按60kg计算）每天推荐量900mg，折合剂量为15mg/kg。将番茄红素茶多酚组合物设计为75mg/kg、150mg/kg.450mg/kg三个剂量组，分别相当于人体推荐用量的5倍、10倍、30倍。

2.3测定指标

（1）白细胞计数实验。动物连续给样30d后，取样品三个剂量组及辐射模型对照组动物均以同一剂量γ射线¹³⁷Csγ全身照射一次，照射剂量为3Gy。分别于照射前、照射后第3d、照射后第14d三次采末梢血，进行白细胞计数。实验结果如表1所示。

（2）小鼠骨髓细胞微核实验。动物连续给样30d后，取样品三个剂量组及辐射模型对照组动物均以同一剂量γ射线¹³⁷Csγ全身照射一次，照射剂量为3Gy，另取一组动物作为环磷酰胺致突变物对照组。各剂量组及辐射模型对照组于照射后（继续给予样品）第3d，颈椎脱臼处死小鼠，剥离出胸骨或股骨，用止血钳挤出骨髓液，加灭活的小牛血清，常规制片，Giemsa染色，镜检，每鼠计数1000个嗜多染红细胞中的微核细胞数，以千分率表示。结果如表2所示。

（3）血清溶血素实验。动物连续给样30d后，取样品三剂量组及辐射模型对照组动物均以同一剂量γ射线¹³⁷Csγ全身照射一次，照射剂量为3Gy。于照射后（继续给予样品）第6d用2%（v/v）sRBC免疫动物，5d后眼眶采血，颈椎脱臼处死，分离血清。在微量血凝板上加25μL血清，用生理盐水将血清倍比稀释，再加入等量0.5%（v/v）sRBC悬液，混匀后，装入湿润的平盘内加盖，37℃放置3h，当血球对照出现沉落时观察结果。结果如表3所示。

3统计学分析

采用SPSS 11.0软件对试验数据进行方差分析。

4实验结果

4.1白细胞计数实验结果

如表1所示，照射前各剂量组与辐射模型对照组比较，差异无显著性（P>0.05）；照射后第3d，辐射模型对照组和各剂量组的白细胞数分别与照射前进行自身比较，均明显下降，且差异均有显著性（P<0.01），可判定辐射损伤模型成立；动物照射后第14d白细胞明显回升，但各剂量组的白细胞数与辐射模型对照组相比，无显著性差异（P>0.05）。

4.2鼠骨髓细胞微核实验结果

如表2所示，样品各剂量组与辐射模型对照组相比，高剂量（450mg/kg）组的骨髓细胞微核率明显下降，有显著性差异（P<0.05）。

4.3血清溶血素实验结果

如表3所示，样品各剂量组与辐射模型对照组相比，高剂量（450mg/kg）组的血清溶血素明显增加，有显著性差异（P<0.05）。

5结论

番茄红素（1vcopene）是一种黄/红色类胡萝卜素，广泛存在于自然界中。1875年MiHardet从番茄中萃取出含有番茄红素的粗提物，称之为Solanorbin。1903年Schunck通过对番茄红素吸收光谱的研究，发现其不同于从胡萝卜中提取的胡萝卜素，于是将这种色素命名为lycopene，从而确立了番茄红素的名称。其分子式为C40H56，是由11个共轭双键以及2个非共轭的碳一碳双键构成的高度不饱和直链型烃类化合物。研究发现，番茄红素具有抗氧化、抗辐射、延缓衰老、抑制肿瘤、减少心血管疾病、提高人体免疫力等作用。

刘勇等选用健康志愿者进行番茄红素软复合胶囊抗氧化人体试验研究，采用双盲随机分组、组问和自身两种对照设计，表明人体食用番茄红素具有抗氧化功效。李辉等采用动物试验方法研究表明小鼠灌胃给予番茄红素具有显著抗氧化功效。彭晓莉等采用动物试验方法研究表明番茄红素具有一定的抗辐射保护作用。综上，番茄红素具有一定的抗氧化防辐射功能。

茶多酚是以儿茶素类为主体，由多种酚类物质组成的羟基酚类化合物。大量研究表明，茶多酚具有抗氧化、抗动脉粥样硬化、防癌、抗辐射、抑菌、抗病毒、解毒、降血糖和血脂、抗衰老等方面的保健和药理作用。

李继媛等采用动物试验方法，连续90d，每天对实验小鼠注射低、中、高剂量组的茶多酚样品。测定小鼠血清超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量，测定结果显示，不同剂量茶多酚对小鼠血清SOD、MDA水平有影响。实验结果说明茶多酚可提高小鼠血液抗氧化能力，以血清SOD活性增强为主要表现。刘明哲等通过茶多酚（TP）对青、老年NIH小鼠血清中MDA、红细胞SOD和过氧化氢酶（CAT）活性的作用，研究了它对机体自由基的清除功效，并以人体淋巴细胞DNA单链断裂为指标研究了TP對辐射诱发的DNA损伤的保护作用。结果显示茶多酚具有清除体内自由基抗氧化和抗辐射的作用。

计融等为评价茶多酚对小鼠的抗辐射作用，将60只小鼠作为抗辐射Ⅰ组，动态观察白细胞数。另60只小鼠为抗辐射Ⅱ组，进行存活试验。结果显示茶多酚能显著提高辐照小鼠存活率。郭绍来等采用⁶⁰Csγ射线照射小鼠造成亚急性损伤模型，给予不同剂量TP及表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）后1d、3d、7d、14d、21d、28d检测对小鼠外周血指标和脏器系数的影响。同时检测血清中SOD和MDA水平，结果表明含50%EGCG的茶多酚（TP50）具有明显缓解辐射所造成的造血功能损伤和抗氧化作用。

本实验以番茄红素和茶多酚混合物为主要原料，现代药理研究及实践结果表明，番茄红素和茶多酚均具有抗氧化和抗辐射作用。本研究结果表明番茄红素和茶多酚混合物具有较好的抗辐射作用。