刘 科 施赫赫 杨 林 夏冠玲 刘盛来 王 刚
(广东省医学实验动物中心,佛山 528248)
CB6F1小鼠和B6CF1小鼠分别为近交系雌性BALB/c和近交系雄性C57BL/6,及近交系雌性C57BL/6和近交系雄性BALB/c的杂交F1代。目前,杂交F1代小鼠在干细胞、移植免疫、细胞动力学、单克隆抗体等研究中已经广泛应用[1]。CB6F1小鼠和B6CF1小鼠作为常用F1品系,主要研究有:红白血病模型[2-3]、异基因NK细胞减轻移植物抗宿主病的研究[4-5]、移植物抗实体瘤的研究[6-7]、制备遗传修饰小鼠模型和短期致癌性研究[8-9]等。本实验通过BALB/c和C57BL/6相互杂交,分别获得CB6F1小鼠和B6CF1小鼠,对9~10周龄成年CB6F1小鼠和B6CF1小鼠的血生化指标、主要脏器质量和脏器系数进行测定和分析,为相关科研实验提供参考数据。
SPF级BALB/c和C57BL/6由广东省医学实验动物中心提供,合格证[SCXK(粤)2013-0002],杂交繁育获得CB6F1小鼠和B6CF1小鼠。9~10周龄,每个品系40只,雌雄各半,共80只。饲养在屏障系统中,空气洁净度7级,室温20~25 ℃,湿度40%~70%,每日光照10 h,动物自由采食和饮水。饲料成分:粗蛋白21.3%,粗纤维3.5%,粗灰分7.2%,粗脂肪4.8%,钙1.3%,磷0.9%,钠0.24%。饲料经60Co辐照灭菌、垫料经高压消毒处理,饮用水是净化水系统制备的纯净水(RO水),添加盐酸酸化处理,至pH=2~3。
德国赛多利斯电子分析天平(BS223S),上海安亭科学仪器厂生产的低速大容量离心机(TDL-5-A),意大利爱康公司生产的全自动血液生化分析仪(ECHO),用激光计数法检验。
随机选取9~10周龄SPF级CB6F1与B6CF1小鼠各40只,雌雄各半。空腹12 h,分别称体质量,麻醉后摘眼球采血,运用全自动生化分析仪测定血生化指标,颈椎脱臼处死,迅速解剖取出主要脏器(心、肝、脾、肺、胃、左肾、右肾、肾上腺、膀胱、睾丸、附睾、子宫、卵巢),剔除脂肪和筋膜,用滤纸吸干表面的液体,心脏需剪开,用滤纸吸干血液,称其质量并计算脏器系数。脏器系数(%)=脏器质量(g)/体质量(g)×100。
血生化指标测定结果见表1,CB6F1小鼠雌性AST、ALP、ALB、A/G、BUN、CREA 显著高于雄性,GLOB、TBIL、GLU、CHOL、TG显著低于雄性(P<0.05),其余无显著性差异(P>0.05)。B6CF1小鼠雌性GLOB、TBIL、BUN、CREA、CHOL 显著高于雄性,ALP、ALB、A/G、TG显著低于雄性(P<0.05),其余无显著性差异(P>0.05)。
注:同品系雄性与雌性比较*P<0.05,B6CF1与CB6F1同性别比较△P<0.05
Note: Female compared with male in same strain*P<0.05,CB6F1 compared with B6CF1 in same gender△P<0.05
同性别不同品系之间,雌性CB6F1小鼠ALP、ALB、A/G、TBIL、CHOL、TG显著高于B6CF1小鼠,GLOB、GLU、BUN、CREA显著低于B6CF1小鼠(P<0.05),其余无显著性差异(P>0.05)。雄性CB6F1小鼠TP、GLOB、TBIL、GLU、CHOL显著高于B6CF1小鼠,AST、ALP、A/G、BUN、CREA、TG显著低于B6CF1小鼠(P<0.05),其余无显著性差异(P>0.05)。
从表2可知,雌性CB6F1小鼠体质量、心脏、肝脏、肺脏、左肾、右肾、膀胱显著小于雄性(P<0.05)。雌性B6CF1小鼠体质量、左肾、右肾显著小于雄性,脾脏、胃显著大于雄性(P<0.05),其余无显著性差异(P>0.05)。
同性别不同品系脏器相比,雌性B6CF1小鼠脾脏、肺脏、右肾显著小于CB6F1小鼠,卵巢显著大于CB6F1小鼠(P<0.05),其余脏器没有显著性差异(P>0.05)。雄性B6CF1小鼠体质量、心脏、肝脏、脾脏、肺脏、胃、左肾、右肾、睾丸均显著小于CB6F1小鼠(P<0.05),其余脏器没有显著性差异(P>0.05)。
从表3可知,雌性CB6F1小鼠心脏、脾脏、肺脏、胃、肾上腺脏器系数显著大于雄性,左肾、右肾、膀胱显著小于雄性(P<0.05)。雌性B6CF1小鼠肝脏、脾脏、肺脏、胃、肾上腺脏器系数显著大于雄性,右肾显著小于雄性(P<0.05),其余无显著性差异(P>0.05)。
同性别不同品系脏器系数相比,雌性B6CF1小鼠脾脏、肺脏、右肾显著小于CB6F1小鼠,卵巢显著大于CB6F1小鼠(P<0.05),其余没有显著性差异(P>0.05)。雄性B6CF1小鼠肝脏、脾脏、肺脏、左肾、右肾均显著小于CB6F1小鼠、睾丸显著大于CB6F1小鼠(P<0.05),其余没有显著性差异(P>0.05)。
表2 9~10周龄CB6F1小鼠与B6CF1小鼠主要脏器质量Table 2 The main organ weight of CB6F1 mice andB6CF1 mice in 9th to 10th week
注:同品系雄性与雌性比较*P<0.05,B6CF1与CB6 F1同性别比较△P<0.05
Note: Female compared with male in same strain*P<0.05,CB6F1 compared with B6CF1 in same gender△P<0.05
表3 9~10 周龄CB6F1小鼠与B6CF1小鼠主要脏器系数Table 3 The main organ coefficient of CB6F1 mice andB6CF1 mice in 9th to 10th week
注:同品系雄性与雌性比较*P<0.05,B6CF1与CB6F1同性别比较△P<0.05
Note: Female compared with male in same strain*P<0.05,CB6F1 compared with B6CF1 in same gender△P<0.05
目前,CB6F1与B6CF1小鼠作为常用F1品系,有关其血生化、主要脏器质量、脏器系数等生物特性数据指标未见报道。而这些指标是实验动物重要的生物特性,是实验所需的基础数据及科学研究与应用的重要依据[10-11],其中血液生理生化指标与代谢、营养及健康状况有着密切的联系,能反映动物机体生理机能,健康状况[12]。内脏器官质量和脏器系数是鉴定动物遗传品质的重要依据,在生物医学研究中,还可用来衡量和反映动物的功能状态[13]。因此,本实验对不同性别的CB6F1和B6CF1的血生化、主要脏器系数指标进行测定及比较分析,为生物医学研究提供基础数据。
从14项血生化指标的检测结果看,同品系雌雄之间多数指标有显著性差异,CB6F1小鼠有11项,B6CF1小鼠有9项。雌雄之间差异较大,这与CB6F1小鼠与B6CF1都是由两个品系杂交获得,品系雌性和雄性遗传背景来源于2个品系,雌雄获得2个品系的遗传几率有所差异有关。CB6F1小鼠和B6CF1小鼠同性别比较有显著性差异的指标,雌性有10项;雄性有11项,与2个品系遗传背景、生理状况有关。以上结果说明,同样2个近交品系,选取不同父本和母本杂交,其产生的F1小鼠血生化指标品系间存在较大差异,而且雌雄之间也存在差异。
脏器质量方面,同品系雌雄之间比较,CB6F1小鼠9项指标中有7项有显著性差异;B6CF1小鼠有5项。2个F1代品系比较,雌性11项指标中的4项,雄性9项有显著性差异;雄性差异指标多于雌性。脏器系数方面比较,同品系雌雄之间比较,CB6F1小鼠9项指标中有7项有显著性差异;B6CF1小鼠有6项。2个F1代品系比较,雄性11项指标中有4项有显著性差异;雌性有5项。在体质量方面,性别、品系也有显著的不同。结果说明,以不同品系作为父母代进行杂交,其产生的子代CB6F1和B6CF1小鼠脏器质量和脏器系数指标存在一定差异,而且雌雄之间也存在差异。F1代小鼠血生化指标和主要脏器质量和脏器系数的部分差异,验证了F1代动物因母体环境不同或性染色体不同而出现的差异[1]。
本实验测定CB6F1与B6CF1小鼠的血生化、主要脏器质量和脏器系数,并进行了统计分析。说明了品系、性别对CB6F1与B6CF1小鼠血生化、脏器质量、脏器系数有一定的影响。今将实验实测数据及差异比较结果提供给广大科技工作者参阅、参考。但动物血液生理生化值、脏器质量、脏器系数除受性别、品系的影响,还受年龄、营养、环境、生理状况等影响[14],这些影响因素有待进一步研究。