窒息新生儿血NGAL、CysC和尿微量蛋白的水平变化及临床意义

张珊，董文斌

（西南医科大学附属医院 新生儿科，四川 泸州 646000）

新生儿窒息可由多种因素导致，由于未及时有效地对机体各器官组织供氧，导致不同程度的损伤，以肾脏受损最常见[1-2]。目前判断肾功能最常用指标尿素氮（blood urea nitrogen, BUN）及血肌酐（serum creatinine, Scr）易受多种非肾因素影响而发生误诊和漏诊。本研究选取尿微量蛋白、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（neutrophil gelatinase associated lipocalin, NGAL）、半胱氨酸蛋白酶抑制剂（Cystatin C,CysC）、BUN及Scr作为测定指标，探讨其对窒息新生儿肾脏功能损害的早期诊断价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2015年1月-2016年4月于西南医科大学附属医院新生儿科收入生后因窒息住院治疗的足月儿187例作为观察组，入组患儿符合新生儿窒息诊断标准[3]。观察组细分如下，①轻度窒息组（90例）：Apgar生后1 min评分4～7分；②重度窒息组（97例）：Apgar生后1 min评分≤3分。选取同期入院的健康新生儿95例作为对照组。所有研究对象均未使用过肾毒性抗生素。

1.2 尿标本采集及测定

所有研究对象取生后24 h清洁尿的10 ml作为标本，0.2 mol/L 氢氧化钠调整pH值＜7.0，所测指标包括：α1微球蛋白（alpha1-microglobulin, α1-m）、β2微球蛋白（beta 2-microglobulin, β2-m）、白蛋白（Albumin, Alb）、免疫球蛋白G（immune globulin G,IgG）及转铁蛋白（Transferrin, TRF）。

1.3 血标本采集及测定

所有研究对象于分娩后并治疗前12 h内采取静脉血，于当日测定NGAL、CysC、BUN及Scr值。CysC、BUN及SCr浓度采用美国BECKMAND公司的xc 800全自动生化分析仪及其配套试剂进行测定；血清NGAL水平用ELISA法检测，试剂盒购自美国R＆D公司，实验步骤严格按试剂盒说明书进行操作，测定使用酶标仪为美国Bio-Rad公司酶标仪，每份标本检测3次并取平均值。

1.4 统计学方法

数据分析采用SPSS 18.0统计软件，计量资料以均数±标准差（±s）表示，多组比较用单因素方差分析，组间两两比较用LSD-t检验；计数资料以率表示，用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 3组患儿一般情况比较

3组患儿在胎龄、性别、体重上比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。见表1。

表1 各组患儿一般情况比较

2.2 3组患儿尿微量蛋白检测结果及异常率比较

3组 患 儿 α1-m、β2-m、Alb、IgG及 TRF含量比较，差异有统计学意义（P＜0.05），重度窒息组患儿α1-m、β2-m、Alb、IgG及TRF含量高于轻度窒息组，重度窒息组以及轻度窒息组患儿α1-m、β2-m、Alb、IgG及TRF含量高于对照组。见表2。

轻、重度窒息组尿α1-m、β2-m、Alb、IgG及TRF异常率比较，差异有统计学意义（P＜0.05），重度窒息组α1-m、β2-m、Alb、IgG及TRF异常率均高于轻度窒息组。见表3。

2.3 3组患儿血NGAL、CysC、BUN及Scr检测结果及异常率比较

3组患儿NGAL、CysC比较，差异有统计学意义（P＜0.05），而3组患儿Scr及BUN比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。重度窒息组患儿NGAL、CysC含量高于轻度窒息组，重度窒息组和轻度窒息组患儿NGAL、CysC含量高于对照组。见表4。

轻、重度窒息组NGAL、CysC异常率比较，差异有统计学意义（P＜0.05），重度窒息组NGAL、CysC异常率均高于轻度窒息组。3组患儿BUN、Scr异常率比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。见表5。

表2 3组患儿尿微量蛋白检测结果 （mg/L，±s）

表2 3组患儿尿微量蛋白检测结果 （mg/L，±s）

组别 α1-m β2-m Alb IgG TRF轻度窒息组（n =90） 8.6±1.1 3.5±2.6 15.3±1.2 8.5±0.9 3.2±1.3重度窒息组（n =97） 11.2±2.1 9.5±1.9 25.3±1.7 11.5±1.3 7.1±1.9对照组（n =95） 3.5±1.6 1.6±1.2 11.5±0.8 5.1±1.3 1.1±1.4 F值 32.443 29.231 21.553 19.464 17.863 P值 0.013 0.017 0.023 0.028 0.031

表3 轻、重度窒息组患儿尿微量蛋白异常率比较 %

表4 3组患儿NGAL、CysC、BUN及Scr水平比较 （±s）

表4 3组患儿NGAL、CysC、BUN及Scr水平比较 （±s）

组别 NGAL/（ng/ml） CysC/（mg/ml） BUN/（mmol/L） Scr/（μmol/L）轻度窒息组（n =90） 55.6±7.7 1.9±0.2 5.3±1.6 71.4±15.8重度窒息组（n =97） 73.2±10.4 2.6±0.1 5.4±1.9 73.3±17.2对照组（n =95） 27.6±6.5 1.6±0.1 5.2±1.2 69.2±16.3 F值 36.846 28.314 4.434 4.198 P值 0.009 0.012 0.168 0.179

表5 轻、重度窒息组患儿NGAL、CysC、BUN及Scr异常率比较 %

3 讨论

新生儿窒息引起肾脏受损的主要机制包括缺血缺氧所导致的细胞内钙离子超载从而引起细胞死亡、氧自由基损伤及炎性反应[4]。传统判定新生儿肾脏损伤的指标BUN、Scr及尿量由于肾脏储备量较大，只有当肾单位破坏达＞75%，肾小球滤过率降至＜20%时，才会出现较明显的变化，这对新生儿窒息后急性肾损伤的早期诊治起不到早期诊疗的作用[5]。本研究发现在分娩后并治疗前12 h内采血进行分析的3组研究对象，Scr、BUN的水平及异常率无差异，证实了这一研究结果。

尿中某些蛋白的排泄呈亚临床升高，采用常规方法难以测出的蛋白称为尿微量蛋白。α1-m及β2-m是由淋巴细胞等产生的游离小分子蛋白质，几乎可完全被肾小球滤过。新生儿窒息时由于缺氧缺血造成了肾近曲小管功能受损导致重吸收障碍，则可出现肾小管性蛋白尿，尿中α1-m、β2-m含量增多。Alb、IgG及TRF则属于大分子或中分子蛋白，正常情况下不能被肾小球滤过。新生儿窒息时导致肾小球滤过膜屏障受损，Alb、IgG及TRF大量通过肾小球基底膜屏障和上皮细胞裂隙，从而产生蛋白尿。近年来研究发现微量蛋白水平在窒息新生儿肾功能早期损伤中有较高的诊断敏感性，并能反映肾功能损伤的严重程度，初步判断肾小管以及肾小球是否受损[6-7]。有学者提出由于α1-m测定不受pH等因素的影响，α1-m较β2-m更能反映肾脏早期病变[8]。还有学者提出随着新生儿窒息程度的加重，Tf、AIb及IgG含量增加，说明窒息后的肾损伤中肾小管功能减退先于肾小球功能减退出现[9]。本研究发现轻、重度窒息组α1-m、β2-m、，Alb、IgG及TRF含量均较正常对照组升高，重度窒息组尿微量蛋白较轻度窒息组升高。重度窒息组α1-m、β2-m、Alb、IgG及TRF异常率高于轻度窒息组。证明尿微量蛋白水平的检测在临床中用于窒息新生儿早起肾功能的监测具有可行性，能早期发现肾脏功能的损伤。

CysC是一种小分子蛋白质，能自由滤过肾小球，在肾小管中被完全重吸收乃至降解，肾脏是其唯一滤过以及代谢的器官，它是反映肾小球滤过率改变的灵敏标记物。肾小球轻度受损时血液中浓度就会升高[10]。近年来研究发现CysC水平可作为监测窒息新生儿肾功能损害的早期指标之一，其敏感性优于BUN、Scr水平，可更早、更敏感地反映肾损伤情况[11-12]。NGAL也是一种小分子蛋白质，它是脂质运载蛋白超家族成员，在肾小管上皮细胞、肝细胞及免疫细胞上表达。有研究表明，NGAL水平与新生儿窒息以及窒息后的肾损伤密切相关，可作为窒息后肾损伤的检测指标[13]。当肾小管上皮细胞受到缺氧复氧损伤及炎性刺激时，NGAL在受损的肾小管上呈现高表达[14]。近期有研究发现研究发现尿NGAL、CysC的联合检测早期诊断新生儿急性肾损伤的效果优于单一的NGAL或CysC检测[15]。本研究发现轻、重度窒息组尿血NGAL及CysC含量均较正常对照组升高，重度窒息组血NGAL及CysC较轻度窒息组升高，重度窒息组血NGAL及CysC异常率高于轻度窒息组。说明尿NGAL及CysC的检测用于窒息新生儿早期急性肾损伤是有明确临床意义的，是检验窒息新生儿早期急性肾损伤的有效指标。

综上所述，加大微量蛋白、尿NGAL及CysC在窒息新生儿早期急性肾损伤中的推广力度，有利于早发现、早治疗，对提高患儿生存率及保护肾功能具有重要意义。