LC-MS/MS法分析8%高氯·虱螨脲乳油

何 伟，龚会琴，何 钰，蒲忠禄，杨鸿波，段亚玲

（贵州省分析测试研究院，贵阳 550000）

高效氯氰菊酯（beta-cypermethrin）是Chinoin Pharmaceutical＆Chemical Works公司开发的拟除虫菊酯类杀虫剂。其杀虫谱广，击倒速度快，杀虫活性高，适用于棉花、蔬菜、果树、茶树等作物害虫及卫生害虫的防治[1]389-394。虱螨脲（lufenuron）是由汽巴-嘉基（现属先正达）公司开发的苯甲酰脲类杀虫杀螨剂。其具有胃毒作用，通过阻碍幼虫蜕皮，而使其停止取食，致其死亡。其适于防治对拟除虫菊酯和有机磷类杀虫剂产生抗性的害虫。虱螨脲用于玉米、蔬菜、柑橘、棉花、马铃薯、葡萄、大豆等作物，防治刺吸式口器害虫，对益虫的成虫和捕食性蜘蛛作用温和[1]175-178。

高效氯氰菊酯和虱螨脲的分析方法已有报道[2-10]，但两者复配制剂的分析方法未见报道。本文建立液相色谱-串联质谱法，同时分离测定乳油中高效氯氰菊酯和虱螨脲，以期为产品质量控制及应用研究中分析测试工作提供参考。该方法操作简便、快速，分离效果好，准确度和精密度高。

1 试验部分

1.1 试剂和溶液

甲醇（色谱纯）；甲酸（色谱纯）；超纯水（电阻率18.2 MΩ·cm）；乙酸铵（优级纯）；虱螨脲标样（质量分数99.45%）、高效氯氰菊酯标样（质量分数98.00%），德国Dr.Ehrenstorfer公司；8%高氯·虱螨脲乳油（5.5%高效氯氰菊酯＋2.5%虱螨脲），广西汇丰生物科技有限公司。

1.2 仪器

液质联用仪：Agilent 1290-6470A LC-MS/MS，具有AJSESI离子源；Masshunter数据采集、定性分析、定量分析工作站；色谱柱：Agilent Eclipse Plus-C18柱［50 mm×2.1 mm，1.8 μm（USDAY34375）］。

1.3 仪器操作条件

1.3.1 液相色谱操作条件

进样体积：5 μL；流速：0.25 mL/min；柱温：35 ℃；流动相：10 mmol/L乙酸铵水溶液（含0.1%甲酸）＋甲醇，体积比17∶83。保留时间：虱螨脲约为1.6min，高效氯氰菊酯约为2.8 min。

1.3.2 MSD操作条件

离子源：AJS ESI源；离子源参数：干燥气N2，干燥气温度300℃，干燥气流速6 L/min；鞘气N2，鞘气温度250℃，鞘气流速11 L/min；雾化器压力138 kPa；喷嘴电压-500～0 V；毛细管电压-3 500～4 000 V。监测模式：MRM。MRM离子采集主要参数如表1所示。

表1 MRM离子采集参数

1.4 测定步骤

1.4.1 标样储备液的配制

称取虱螨脲标样（99.45%）0.001 55 g和高效氯氰菊酯标样（98.00%）0.002 43 g，分别置于100 mL容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，得虱螨脲、高效氯氰菊酯质量浓度分别为15.41 mg/L和23.81 mg/L的标样储备液。

1.4.2 混合标样溶液配制

吸取适量上述标样储备液，以50%甲醇水溶液为溶剂配制虱螨脲质量浓度为154.15 μg/L，高效氯氰菊酯质量浓度为238.14 μg/L的混合标样母液，并稀释配制成系列梯度混合标样工作溶液。

1.4.3 试样溶液的配制

称取8%高氯·虱螨脲乳油试样0.012 5 g（精确至0.000 2 g），置于100 mL容量瓶中，用去离子水溶解并稀释至刻度，摇匀，过0.45 μm滤膜。

1.4.4 测定

在1.3仪器操作条件下，待仪器基线稳定后，连续注入数针标样溶液，直至相邻2针标样溶液中各有效成分的响应值相对变化＜1.5%后，按照标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液的顺序进行测定。高效氯氰菊酯和虱螨脲混合标样及8%高氯·虱螨脲乳油样品色谱图见图1和图2。

图1 高效氯氰菊酯和虱螨脲混合标样色谱图

图2 8%高氯·虱螨脲乳油试样色谱图

1.4.5 计算

将测得的2针试样溶液以及试样前后2针标样溶液中高效氯氰菊酯或虱螨脲峰面积分别进行平均。试样中高效氯氰菊酯（或虱螨脲）的质量分数w（%）按下式计算。

式中：A1为标样溶液中高效氯氰菊酯（或虱螨脲）峰面积的平均值；A2为试样溶液中高效氯氰菊酯（或虱螨脲）峰面积的平均值；m1为高效氯氰菊酯（或虱螨脲）标样的质量（g）；m2为高效氯氰菊酯（或虱螨脲）试样的质量（g）；P为标样中高效氯氰菊酯（或虱螨脲）的质量分数（%）。

2 结果与讨论

2.1 分析方法的线性相关性试验

试验按1.3仪器操作条件进行，分别以高效氯氰菊酯或虱螨脲质量浓度为横坐标，高效氯氰菊酯或虱螨脲相应峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。高效氯氰菊酯线性方程为y＝857 x＋26，线性相关系数为0.993；虱螨脲线性方程为y＝591 x＋11，线性相关系数为0.999。试验结果表明，高效氯氰菊酯、虱螨脲在测试质量浓度范围内具有良好的线性关系。

2.2 分析方法的精密度试验

按1.3仪器操作条件对试样溶液进行分析，测得高效氯氰菊酯和虱螨脲的标准偏差分别为0.06和0.04，变异系数分别为2.45%和3.22%，结果见表2。

2.3 分析方法的准确度试验

在已知质量浓度的8%高氯·虱螨脲乳油试样溶液中，分别加入一定量的高效氯氰菊酯和虱螨脲标样，在1.3仪器操作条件下进行分析。测得高效氯氰菊酯的平均回收率为110.28%，虱螨脲的平均回收率为93.98%，结果见表3。

2.4 检测限和定量限

取虱螨脲质量浓度为0.12 μg/L，高效氯氰菊酯质量浓度为0.19 μg/L的标样工作液，重复测定6次，根据S/N值计算检测限（LOD）和定量限（LOQ），结果见表4。试验结果表明，虱螨脲的LOD为0.005 7 μg/L，LOQ为0.019 μg/L，高效氯氰菊酯的LOD为0.054 μg/L，LOQ为0.18 μg/L。

表2 精密度试验结果

表3 准确度试验结果

表4 分析方法的检出限和定量限 μg/L

3 结论

试验建立了一种简便、快速测定8%高氯·虱螨脲乳油中有效成分的分析方法。试验结果表明：在测试浓度范围内，该方法对高效氯氰菊酯和虱螨脲具有良好的线性关系，分离效果好，准确度和精密度较高。高效氯氰菊酯和虱螨脲出峰时间短，3 min内可完全出峰，快速出峰缩短了检测时间，减少了溶剂用量，大大提高了工作效率。方法对高效氯氰菊酯和虱螨脲具有较低的检测限和定量限，且方法操作简便、快速，是产品质量控制和应用研究中较为理想的分析方法。