不同检测方法在不同种属及易混淆中药饮片鉴别中的应用研究

李杰

山东省兖矿集团有限公司总医院药剂科，山东兖州 273500

随着科技的不断创新和医疗技术的快速发展，尤其是西医在我国的迅猛发展，在一定程度上对我国传统医学造成了冲击[1]。虽然在检查、治疗等方面西医优势突出，但是，我国传统医学已经流传了几千年，对人类的健康做出了巨大贡献，且在很多方面，尤其是疑难杂症的治疗上，其疗效是西医所不能达到的[2]。近年来，之所以出现中医治疗效果不显著的状况，在很大程度上与药材的质量密切相关[3]，以前的中药饮片多为野生，且炮制讲究，药材道地，药效自然显著，而今，药材多为人工养殖，且多不道地，更不乏一些药商为了牟取利益，以次充好，甚至以假充真，严重影响了方子的治疗效果[4]。因此，对中药饮片进行鉴别，就变得尤为急迫、重要。目前，对中药饮片的鉴别主要在实验室进行，专业性强、操作复杂、时间漫长、价格高昂，多有不便[5]。该文选取了2016年1月—2017年12月期间该院的临床常用162种中药饮片，旨在探索一种更为简便、快捷、准确有效的中药饮片鉴别方式，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

该次研究根据《中国药典》2010版一部规定的品种[6]，经由相关专家鉴定，选取了该院的临床常用162种中药饮片。

1.2 设备

实验所用设备包括：便携式荧光（紫外）、激光笔（红外线激光灯、紫外光验钞灯、LED日光灯四合一）（红外线:630 nm;紫外光:365 nm/254 nm；光斑直径:6 M≤φ10 mm；工作电压:DC 4.5 V）[7]。

1.3 研究方法

对所有中药应用便携式荧光（紫外）、激光笔（红外线:630 nm;紫外光:365 nm/254 nm）对选取的中药饮片的表面、剖面或溶液、提取液进行照射，根据颜色差异对中药饮片进行鉴别。对两组检测手段的检测准确率进行评价，准确率的计算最终是依靠药物化学成分含量进行评定，准确率=确定的中药数量÷总药物数量×100.00%[8]。

1.4 统计方法

对研究中搜集到的数据应用SPSS 20.0统计学软件进行统计分析，计数资料采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 区分不同来源的中药饮片

应用便携式荧光（紫外）、激光笔进行饮片断面照射，怀牛膝紫外灯下呈黄白色荧光，而川牛膝断面紫外光灯下显浅蓝色荧光；在紫外光灯(365 nm)下，天然珍珠呈浅蓝色，养殖珍珠呈亮黄色，人造珍珠则无荧光；紫外光灯下生晒参木部显兰色荧光，红参显兰紫色荧光，白参显亮兰色荧光。在荧光显微镜下直立百部粉末呈竹黄绿色，蔓生百部根粉末呈五簪绿色，对叶百部粉末显清水兰色[4]。便携式荧光（紫外）笔对不同来源中药饮片的诊断准确率为97.53%，激光笔准确率98.15%，两组比较差异无统计学意义 （χ2=0.392,P＞0.05），见表 1。

2.2 区分同科中药饮片

对藜芦表皮剥落处和金针菜根进行横切，用便携式荧光（紫外）、激光笔对切面进行照射，在紫外光灯下藜芦表皮剥落处发蓝色荧光，金针菜根的横切面呈亮黄白色荧光。便携式荧光（紫外）笔对区分同科中药饮片的诊断准确率为96.30%，激光笔准确率95.68%，两组比较差异无统计学意义 （χ2=0.895,P＞0.05），见表 1。

表1 两组检测手段准确率统计[n（%）]

2.3 区分易混淆的中药饮片

用水或乙醇分别浸泡五加皮和香加皮，在紫外光灯下观察其水泡液或者乙醇浸出液，紫外灯下，显紫色荧光，加稀盐酸其显色荧光不变，加氢氧化钠产生黄绿色荧光的为香加皮，无反应的为五加皮；再如地骨皮与大青根皮，紫外灯下，地骨皮断面木栓层呈棕色，韧皮部呈淡蓝色荧光，呈淡蓝色荧光的为大青根皮。便携式荧光（紫外）笔区分易混淆的中药饮片准确率97.53%，激光笔区分易混淆的中药饮片准确率96.30%，两组比较差异无统计学意义 （χ2=0.769,P＞0.05），见表 2。

2.4 区分正品与替代品

便携式荧光（紫外）、激光笔还可以区分正品与替代品，如：麦冬与代用品山麦冬、大麦冬的鉴别。将其切片置紫外光灯365 nm下观察，正品麦冬显浅蓝色荧光，大麦冬显蓝色荧光，山麦冬无荧光现象。便携式荧光（紫外）笔区分正品与替代品准确率94.44%，激光笔区分正品与替代品准确率95.06%，两组比较差异无统计学意义（χ2=0.614,P＞0.05），见表 2。

表2 两组检测手段准确率统计表[n（%）]

2.5 根据饮片的提取液或浸泡液进行鉴别

有的饮片需要经过特定溶剂提取后，将提取液滴于滤纸上才能进行荧光观察[9]。如真假大黄，分别将真大黄和假大黄的粉末用乙醇进行浸泡，浸泡液滴在滤纸上，紫外灯下，显棕色至棕红色荧光的为真大黄，显亮蓝紫色荧光的假大黄；香加皮的水或乙醇浸出液在紫外灯下显紫色荧光，加稀盐酸荧光不变；加氢氧化钠试液产生黄绿色荧光[10]；而地骨皮70%乙醇浸出液则显淡蓝色荧光；用乙醇回流的方式提取皱皮木瓜粉末和光皮木瓜粉末，将其提取液滴在滤纸上[11]，干后，紫外灯下，显蓝色荧光的为皱皮木瓜，显鲜黄色荧光的为光皮木瓜；用乙醇浸泡紫苑和山紫苑，将浸泡液滴在滤纸上，荧光灯下，显蓝色荧光斑点的为紫苑，显黄色或淡黄色荧光斑点的山紫苑[12]。

3 讨论

随着医学，尤其是中医学的发展，药品市场上参差不齐，良莠并存的中药饮片，严重影响了中医中药的临床治疗效果，中药饮片需要更为简便、快速、准确的鉴别方式对伪品、替代品、不道地品等进行区分筛选，这也是中药质控科学发展的需要[13]。在此背景下，该文提出了这一课题，并进行了这一研究。

临床上中药种类之多，常常难于鉴别，甚至混淆。原植物鉴定、经验性状鉴别、显微鉴定等是真伪鉴别最常用方法，但需要一定的仪器，对于基层中草药工作者存在一定的难度[14]，该研究应用便携式荧光（紫外）、激光笔对饮片断面、剖面或提取液、浸泡液进行照射，通过不同的荧光色对饮片进行鉴别方法简便、快捷、环保[15]。但是也应看到，荧光鉴别的结果也受多方面因素的影响，如饮片本身特性、实验方法、标定荧光的依据以及人视觉的差异等，各个环节也难免掺杂主观因素[16]，所以此方法需要进一步规范细节，制定统一标准。

同本研究结果发现，便携式荧光（紫外）笔对不同来源中药饮片的诊断准确率为97.53%，激光笔准确率98.15%，两组比较差异无统计学意义（χ2=0.392,P＞0.05）；便携式荧光（紫外）笔对区分同科中药饮片的诊断准确率为96.30%，激光笔准确率95.68%，两组比较差异无统计学意义（χ2=0.895,P＞0.05）；便携式荧光（紫外）笔区分易混淆的中药饮片准确率97.53%，激光笔区分易混淆的中药饮片准确率96.30%，两组比较差异无统计学意义（χ2=0.769,P＞0.05）；便携式荧光（紫外）笔区分正品与替代品准确率94.44%，激光笔区分正品与替代品准确率95.06%，两组比较差异无统计学意义（χ2=0.614,P＞0.05）。 由此可见，便携式荧光(紫外)、激光笔均可以快速、简便、准确、环保地鉴别不同种属及易混淆的中药饮片，两种检查笔临床效果相当。学者李莉等[17]探讨了便携式荧光(紫外)、激光笔在不同种属及易混淆中药饮片中鉴别应用，经过研究发现，两种检测笔临床准确率达98.59%，临床诊断价值较大，与该研究结果一致。

综上所述，便携式荧光（紫外）、激光笔可以快速、简便、准确、环保地鉴别不同种属及易混淆的中药饮片，适用于药监、医院、药企等，具有广泛的应用前景。